الجسم المضاد الأحادي النسيل الأرنبي USP9X لـ WB و IHC-P و IF/ICC و ELISA - Q93008

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة USP9X وموقعه الخلوي

• USP9X (إنتيم هيدرولاز الطرف الكربوكسيلي لليوبيكيتين 9X)، المعروف أيضاً باسم FAF و FAM و hFAM و DFFRX و MRX99، هو إنزيم كبير نازع لليوبيكيتين يُشفر بواسطة جين USP9X الموجود على الكروموسوم X. وينتمي إلى عائلة الببتيداز C19 من البروتيازات المخصصة لليوبيكيتين.
• يعمل USP9X كبروتياز ثيول، ويربط بشكل خاص سلاسل البولي يوبيكيتين متعدد الروابط مع تفضيل روابط الليزين 11، تليها روابط الليزين 63 والليزين 48 والليزين 6، وبذلك يزيل اليوبيكيتين من البروتينات المستهدفة وينظم دوران البروتينات. المراجع ذات الصلة: PMID:30914461
• يعتبر USP9X مكوناً أساسياً في سلسلة إشارات TGF-beta/BMP، حيث ينزع اليوبيكيتين من SMAD4 أحادي اليوبيكيتين، ويعارض ليغاز TRIM33 البروتين يوبيكيتين E3 ويعزز نقل الإشارات. المراجع ذات الصلة: PMID:19135894
• أثناء الانقسام الخيطي، ينظم USP9X محاذاة الكروموسومات وانفصالها عن طريق التحكم في توطين BIRC5/survivin إلى السنتروميرات الخيطية، مما يضمن حدوث الانقسام الخلوي بشكل سليم. المراجع ذات الصلة: PMID:16322459
• ينزع USP9X اليوبيكيتين ويثبت العديد من البروتينات المشاركة في إصلاح الحمض النووي (ALKBH3)، وإزالة الميثيل من الحمض النووي الريبي (ALKBH5)، وتجميع مركب mTORC2 (RICTOR)، مما يبرز دوره في الحفاظ على التوازن الخلوي. المراجع ذات الصلة: PMID:25944111 PMID:37454738 PMID:33378666
• يشارك الإنزيم أيضاً في استيراد البيروكسيسوم عن طريق نزع اليوبيكيتين من PEX5، ويعيد ضبط الساعة اليومية عبر تثبيت BMAL1، ويثبط مسار إشارات هيبو من خلال نزع اليوبيكيتين من AMOTL2. المراجع ذات الصلة: PMID:22371489 PMID:29626158 PMID:26598551 PMID:34404733
• داخل الخلية، يتواجد USP9X في العصارة الخلوية، ومخاريط النمو، ومحور الأهداب، وهو ما يتوافق مع أدواره في التطور العصبي وهجرة الخلايا.
• يتم التعبير عنه على نطاق واسع في الأنسجة الجنينية والبالغة، وترتبط الطفرات في جين USP9X بالإعاقة الذهنية المرتبطة بالكروموسوم X (MRX99، XLID99)، مما يؤكد أهميته في التطور العصبي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع منطقة الطرف N-terminal (الأحماض الأمينية 1-100) لـ USP9X البشري؛ قد يتعرف الجسم المضاد على USP9X كامل الطول بالإضافة إلى أي أجزاء من الطرف N-terminal. ضع ذلك في الاعتبار عند تفسير أنماط الحزم في لطخة ويسترن.
• نظراً للوزن الجزيئي المرتفع لـ USP9X (~290 كيلو دالتون)، استخدم هلامات SDS-PAGE منخفضة النسبة المئوية (مثل 6%) وأوقات نقل رطب ممتدة (مثل طوال الليل عند 4 درجة مئوية) للحصول على أفضل دقة ونقل في تجربة WB.
• بالنسبة لـ IHC-P و IF/ICC، يوصى باستخدام تقنيات استرجاع المستضد القياسية (السترات المُسخنة أو محلول EDTA)، ولكن يجب التحقق من صحة ظروف التثبيت لنوع العينة المحدد.
• في ELISA، يمكن استخدام الببتيد الاصطناعي المستضد كتحكم إيجابي؛ ومع ذلك، يجب التحقق من التفاعل المتبادل مع USP9X الفأري والجرذي إذا كنت تستخدم عينات من القوارض.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تعمل CamelBio كجسر توريد شامل للمواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD)، ويغطي كل مرحلة من مراحل تطوير المنتج بدءاً من الفكرة وحتى المرحلة السريرية. نقدم للباحثين والشركات المصنعة المهتمة بإنزيمات نزع اليوبيكيتين ومسارات تحلل البروتين أزواج أجسام مضادة مصدقة، وأجسام مضادة أحادية نسيلة بكميات كبيرة مثل هذا الجسم المضاد USP9X الأرنبي الأحادي النسيل، بالإضافة إلى الكواشف المساعدة لتبسيط احتياجاتك من تطوير المقاييس والإنتاج.