جسم مضاد متعدد النسائل من الأرنب ضد يوبيكويتين لتطبيقات WB وIHC-P وIF/ICC وELISA - P0CG47

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة يوبيكويتين وتوزيعه الخلوي

• يُشفَّر يوبيكويتين بواسطة جين UBB ويُنتَج على شكل بولي يوبيكويتين-B، وهو بروتين طليعي يُعالَج لإنتاج مونومرات يوبيكويتين الناضجة. يوبيكويتين هو بروتين محفوظ بدرجة عالية يتكون من 76 حمضًا أمينيًا ويشارك في التعديل بعد الترجمة للبروتينات المستهدفة.
• يوجد يوبيكويتين إما مرتبطًا تساهميًا ببروتينات أخرى أو حرًا (غير مثبت). وعند ارتباطه تساهميًا، يقترن بالبروتينات المستهدفة عبر رابطة إيزوبيبتيدية، مكوِّنًا مونومرات (يوبيكويتين أحادي) أو سلاسل بولي يوبيكويتين مرتبطة عبر بقايا ليسين مختلفة (Lys-6 وLys-11 وLys-29 وLys-33 وLys-48 وLys-63)، أو سلاسل خطية مرتبطة عبر الميثيونين البادئ.
• تحدد الروابط المختلفة لسلاسل بولي يوبيكويتين نتائج خلوية متميزة: إذ توجّه السلاسل المرتبطة عبر Lys-48 البروتينات إلى التحلل البروتيني بوساطة البروتيازوم، بينما تشارك السلاسل المرتبطة عبر Lys-63 في الالتقام الخلوي واستجابات تلف الحمض النووي وإشارات NF-kappa-B. وتشارك الروابط الأخرى (Lys-6 وLys-11 وLys-29 وLys-33) في إصلاح الحمض النووي، والتحلل البروتيني المرتبط بالشبكة الإندوبلازمية (ERAD)، وتنظيم دورة الخلية، وتعديل الكينازات.
• بالإضافة إلى الأشكال المقترنة، تؤدي سلاسل بولي يوبيكويتين الحرة غير المثبتة أدوارًا في الإشارات، مثل تنشيط كينازات البروتين وتعديل مسارات الإشارات الأخرى.
• يتموضع يوبيكويتين في مقصورات خلوية متعددة، بما في ذلك السيتوبلازم والنواة والغشاء الخارجي للميتوكوندريا، مما يعكس مشاركته الواسعة في العمليات الخلوية.
• تشمل التعديلات التي تطرأ على يوبيكويتين نفسه بعد الترجمة الفسفرة والريبوزلة بـ ADP، وقد تعدّل هذه التعديلات وظيفته. يحتوي البروتين على رابطة إيزوبيبتيدية ويُعد جزءًا من مسار اقتران Ubl.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يشمل المستضد المناعي يوبيكويتين كامل الطول (الأحماض الأمينية 1-228)، بما يتوافق مع البروتين الطليعي لبولي يوبيكويتين-B. يُتوقع أن يتعرف هذا الجسم المضاد متعدد النسائل على يوبيكويتين الحر والبروتينات المقترنة بيوبيكويتين، لكنه قد يكشف أيضًا عن سلاسل بولي يوبيكويتين. في WB، يُنصح باستخدام ظروف نزع الطبيعة والاختزال للتمييز بين يوبيكويتين أحادي والاقترانات متعددة يوبيكويتين.
• بالنسبة إلى IHC-P، قد يؤدي استرجاع المستضد إلى تعزيز الكشف، ويُنصح باستخدام ضوابط مناسبة (مثل العينات التي أُجري فيها خفض أو حذف للجين) لتأكيد النوعية. قد تكون الإشارة منتشرة بسبب التوزيع الواسع ليوبيكويتين.
• في IF/ICC، ينبغي تحسين طرق التثبيت والنفاذية، إذ يختلف توضع يوبيكويتين بين المقصورات الخلوية. ويمكن أن يساعد التلوين المشترك مع واسمات العُضيّات في تفسير النتائج.
• ينبغي أن تتضمن بروتوكولات ELISA منحنيات معيارية باستخدام يوبيكويتين مؤتلف لتقدير مستويات يوبيكويتين الحر أو الكلي. تأكد من التحقق من صلاحية الجسم المضاد لتنسيق الاختبار المحدد ونوع العينة.
• يُظهر الجسم المضاد تفاعلًا متصالبًا واسع النطاق متوقَّعًا. وبالنسبة إلى الأنواع غير البشرية، يجب التحقق من التفاعل في نظام العينة ذي الصلة، إذ إن تماثل التسلسل مرتفع لكنه قد يختلف.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تقدم CamelBio حلًا شاملًا للتوريد لمواد IVD الخام، من خلال دعم مصنّعي التشخيص والمختبرات البحثية والمعاهد بأزواج أجسام مضادة موثَّقة، وأجسام مضادة متعددة النسائل وأحادية النسيلة محسَّنة، وكواشف مساندة بالجملة، وتوفير المواد الخام النادرة للأهداف. يدعم هذا الجسم المضاد ضد يوبيكويتين الأبحاث المتعلقة بتحلل البروتينات والإشارات الخلوية ودراسات المؤشرات الحيوية للأمراض، ويمكن لـ CamelBio المساعدة في توسيع النطاق أو تخصيص المواد لتلبية احتياجات مشروعك من مرحلة الفكرة إلى العيادة.