جسم مضاد متعدد النسيلة أرنبي ضد هيستون ثلاثي الميثيل H4-K20 لـ WB/IHC/IF (P62805)

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H4 وموقعه الخلوي

الهيستون H4 هو أحد الهيستونات الأساسية التي تشكل النوكليوسوم، الوحدة التكرارية الأساسية للكروماتين. جنباً إلى جنب مع الهيستونات H2A و H2B و H3، يشكل ثماني القوائم يلتف حوله ما يقارب 147 زوج قاعدة من الحمض النووي، مما يضغط الجينوم في النواة وينظم إمكانية الوصول إلى الحمض النووي. يلعب الهيستون H4 دوراً مركزياً في تنظيم النسخ، وإصلاح الحمض النووي، وتضاعف الحمض النووي، واستقرار الكروموسومات. يتم تحقيق التعديل الديناميكي لهيكل الكروماتين إلى حد كبير من خلال مجموعة معقدة من التعديلات ما بعد الترجمة (PTMs) على ذيول الهيستون، والتي يطلق عليها مجتمعة "شفرة الهيستون". المراجع ذات الصلة: UniProt P62805

يقع الهيستون H4 بشكل أساسي في النواة ويرتبط بالكروموسومات. يوجد أيضاً الهيستون H4 المأسَد في النواة خلال مراحل محددة من تكوين الحيوانات المنوية (الخلايا المنوية الخطوة 11). المراجع ذات الصلة: UniProt P62805

يخضع راسب الليزين 20 من الهيستون H4 (H4K20) لحالات ميثيلية متعددة، تشمل المونوميثيل، الدايميثيل، والترايميثيل. يعتبر ترايميثيل H4K20 (H4K20me3) علامة مميزة للكروماتين المغاير التأسيسي ويشارك في إسكات الجينات، واستجابة تلف الحمض النووي، وتنظيم دورة الخلية. يتم تنظيم هذا التعديل ديناميكياً بواسطة ناقلات الميثيل (مثل SUV4-20H1/2) وإزالات الميثيل. تم تحديد العديد من التعديلات ما بعد الترجمة الأخرى على H4 بواسطة قياس الكتلة وتقنيات أخرى، مما يبرز تعقيد تنظيم الهيستون. المراجع ذات الصلة: PMID:12086618, PMID:15964846, PMID:17967882

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد اصطناعي يتوافق مع منطقة K20 ثلاثية الميثيل من الهيستون H4 البشري. من المتوقع أن يتعرف هذا الجسم المضاد على H4K20me3 بشكل محدد، ولكن يجب استبعاد التفاعل المتبادل مع حالات ميثيل H4 الأخرى أو H4 غير المعدل تجريبياً باستخدام فحوصات منافسة الببتيد المناسبة أو نماذج الضربة القاضية/التثبيط.
• لكشف البروتين الغربي (WB)، يوصى باستخدام المستخلصات النووية الغنية بالهيستون أو الهيستونات المستخرجة بالحمض كنوع العينة. قم بتحسين تركيز الجسم المضاد الأولي (على سبيل المثال، ابدأ بالتركيز 1:500–1:2000) واستخدم رابط جسم مضاد ثانوي مناسب.
• في الكيمياء المناعية المناعية (IHC-P)، قد يحسن استرجاع المستضد باستخدام محلول سترات (الرقم الهيدروجيني 6.0) أو محلول EDTA (الرقم الهيدروجيني 8.0) توفر الحاتمة؛ قم بتحسين طريقة الاسترجاع تجريبياً.
• للمناعة الفلورية (IF/ICC)، يوصى بتحلل الغشاء باستخدام 0.1–0.5% تريتون X-100 أو الديجيتونين. قد تؤثر ظروف التثبيت (مثل 4% PFA) على إمكانية الوصول إلى الحاتمة؛ قم باختبار بروتوكولات مختلفة.
• عند الاستخدام في فحوصات ELISA أو البقعة المنقطة (DB)، فكر في استخدام ألواح محجوبة بـ BSA ونظام كشف مرتبط بالبيوتين لزيادة الحساسية.
• قم دائماً بتضمين مراقبة سلبية (مثل ببتيد H4 غير المعدل أو مراقبة IgG) والتحقق من خصوصية الجسم المضاد في نظام العينة ذي الصلة باستخدام قياس الكتلة أو طرق أخرى متعامدة.
• يُظهر الجسم المضاد تفاعلاً متبادلاً متوقعاً على نطاق واسع (بشر، فأر، جرذ، وغيرها)، ولكن يُنصح بالتحقق منه في كل نوع تهتم به.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص، ومختبرات الأبحاث، ومطوري الاختبارات التشخيصية في المختبر (IVD) محفظة شاملة من المواد الخام عالية الجودة، بما في ذلك أزواج الأجسام المضادة المُحققة، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة. بالنسبة لأهداف البحوث الوراثية اللاجينية والكروماتين مثل هيستون H4 ثلاثي الميثيل K20، نقدم حلول مصادر موثوقة لتسريع خط أنابيب تطوير الاختبارات الخاصة بك. اتصل بفريقنا لمناقشة تطوير الأجسام المضادة المخصصة، والطلبات بالجملة، أو احتياجات شراء الأهداف النادرة.