جسم مضاد أحادي النسيلة أرنب لثلاثي ميثيل هيستون H3-K4 (Q16695 / P68431) لأبحاث الوراثة اللاجينية واختبارات ChIP و WB و ELISA

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H3 وموقعه الخلوي

• هيستون H3 هو مكون أساسي للنيوكليوسوم، حيث يلف الحمض النووي ويكثفه إلى الكروماتين ليقيد إمكانية الوصول إليه من قبل آليات النسخ والإصلاح والتضاعف. يلعب دورًا مركزيًا في الحفاظ على استقرار الكروموسومات وتنظيم التعبير الجيني من خلال مجموعة معقدة من التعديلات ما بعد الترجمة (المسماة "شفرة الهيستون"). مراجع ذات صلة: PMID:17194708
• بروتين H3.1 النموذجي (المشفَر بواسطة جينات HIST1H3 متعددة، SWISS P68431) يتم التعبير عنه بطريقة تعتمد على التضاعف عبر معظم أنواع الخلايا، بينما النوع المتغير H3.1t المخصص للخصية (HIST3H3، SWISS Q16695) يتم التعبير عنه بشكل رئيسي في خلايا الخصية. كلاهما يقع في النواة ويرتبط بالكروموسومات أثناء انقسام الخلية. مراجع ذات صلة: خاص بالجين/البروتين؛ انظر UniProt Q16695/P68431
• الثلاثي ميثيل في ليسين 4 (H3K4me3) هو علامة وراثية لاجينية محورية مرتبطة بالمُحفزات النشطة، وبنية الكروماتين المفتوح، وبدء النسخ. يتم ترسيبه بواسطة ميثيل ترانسفيراز من عائلة COMPASS ويتم التعرف عليه بواسطة بروتينات القارئ التي تسهل تنشيط الجينات. مراجع ذات صلة: PMID:16185088
• يتواجد H3K4me3 ويتفاعل مع تعديلات الهيستون الأخرى (مثل الأستلة، الفسفرة، المثيلة في مواضع أخرى) لضبط حالات الكروماتين بدقة. تم ربط اضطراب تنظيم هذه العلامة بالسرطان، واضطرابات النمو، والخلل المناعي، مما يجعلها علامة حيوية رئيسية في أبحاث الوراثة اللاجينية وتطوير التشخيص في المختبر (IVD).

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تم تصميم المستضد المناعي (ببتيد اصطناعي ثلاثي الميثيل حول K4) لإعطاء خصوصية عالية لتعديل H3K4me3. لتأكيد الانتقائية، فكر في إجراء اختبارات التنافس بالببتيد أو المعالجة بإزالة ميثيل الهيستون (مثل LSD1) التي تزيل مجموعات الميثيل.
• بالنسبة للتلطخ الغربي (WB)، يوصى باستخدام بروتوكولات استخراج الهيستون التي تثري البروتينات النووية القاعدية. النطاق المتوقع هو ~15 كيلو دالتون؛ تحقق من هوية النطاق باستخدام ضوابط موجبة لـ H3K4me3.
• في ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP)، تحقق من التخصيب في الجينات المستهدفة المعروفة لـ H3K4me3 (مثل محفز GAPDH) عن طريق تفاعل البوليميراز المتسلسل الكمي (qPCR). قم بتضمين ضوابط IgG مناسبة لتقييم الخلفية.
• بالنسبة للكيمياء المناعية المناعية (IHC-P) والمناعة الفلورية (IF/ICC)، قد تؤثر ظروف استرجاع المستضد (سترة بدرجة حموضة 6 أو EDTA بدرجة حموضة 9) على التلوين. اختبر نطاقًا من التخفيفات على الأنسجة الموجبة والسالبة.
• نظرًا للحفاظ على التسلسل العالي عبر الأنواع، من المتوقع حدوث تفاعل متقاطع مع الإنسان والفأر والجرذ والفقاريات الأخرى. تحقق من صحة الكشف في نظام العينات المحدد الخاص بك قبل التحليل الكمي.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المنتجات

CamelBio هي شريكك الشامل لتوريد المواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD)، حيث نقدم مسارًا مبسطًا من الفكرة إلى العيادة. تشمل محفظتنا أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق من صلاحيتها، والأجسام المضادة أحادية/متعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، والكواشف المتخصصة للأهداف النادرة لدعم عمليات التشخيص والأبحاث الخاصة بك. يُعد هذا الجسم المضاد الأحادي النسيلة الأرنب لثلاثي ميثيل هيستون H3-K4 مثالًا على مجموعة الأجسام المضادة الميثيلية لدينا، مصممة لدعم أبحاث العلامات الحيوية الوراثية اللاجينية وتطوير الاختبارات القائمة على ChIP بالموثوقية والأداء الذي تحتاجه.