جسم مضاد أحادي النسيلة أرنب مضاد للهستون H3 ثلاثي الميثيل-ليسين 27 (Q16695/P68431) لتطبيقات WB و ChIP و CUT&Tag

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هستون H3 وتوطينه

هستون H3 هو بروتين هستون أساسي يشكل، مع H2A و H2B و H4، النيوكليوسوم - الوحدة المتكررة الأساسية للكروماتين. تقوم النيوكليوسومات بلف وتكثيف الحمض النووي DNA، وبالتالي التحكم في إمكانية الوصول إلى المعلومات الوراثية من قبل الآليات الخلوية المسؤولة عن النسخ والتكرار والإصلاح. هذا الدور المركزي يجعل الهستونات منظمات رئيسية لاستقرار الجينوم والتعبير الجيني.

تتمثل تنوع الوظائف للهستونات إلى حد كبير من خلال مجموعة متنوعة من التعديلات ما بعد الترجمية، والتي يشار إليها مجتمعة باسم "شفرة الهستون". تحكم هذه التعديلات - بما في ذلك الأسيتلة والمثيلة والفوسفرة وغيرها - والتي تحدث في بقايا محددة، في ديناميكيات الكروماتين. من بين هذه التعديلات، يعتبر ثلاثي مثيلة هستون H3 في الليسين 27 (H3K27me3) علامة مثبطة راسخة ترتبط بتكوين الهيتروكروماتين الاختياري وكبح التعبير الجيني طويل الأمد.

تم توليد هذا الجسم المضاد الأحادي النسيلة للأرنب ضد ببتيد ثلاثي الميثيل اصطناعي يغطي K27 من هستون H3 البشري (بناءً على NP_003520.1). يتعرف على وجه التحديد على هستون H3 فقط عندما يكون ثلاثي الميثيل في K27، مما يتيح الكشف الدقيق عن هذه العلامة اللاجينية في اختبارات متنوعة.

مراجع ذات صلة: PMID:16267050, PMID:17194708

الإرشادات التجريبية والنصائح الفنية

• المستضد المناعي هو ببتيد ثلاثي الميثيل اصطناعي حول K27؛ لذلك من المتوقع أن يكون لهذا الجسم المضاد خصوصية عالية للحالة ثلاثية الميثيل. فكر في التحقق من الخصوصية عن طريق اختبار النقطة المناعية أو اختبارات منافسة الببتيد باستخدام ببتيدات غير معدلة، وأحادية، وثنائية، وثلاثية الميثيل.
• لـ Western blot (WB)، يوصى باستخدام مستخلصات نووية غنية بالهستون أو هستونات مستخلصة بالحمض. الحزمة المتوقعة هي ~15 كيلو دالتون. استخدم ضوابط تحميل مناسبة (مثل إجمالي H3 أو جسم مضاد الطرف C لهستون H3) لتطبيع كمية البروتين المحمل.
• في ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP)، يمكن استخدام هذا الجسم المضاد لإثراء مناطق الكروماتين الموسومة بـ H3K27me3. قم بتحسين ظروف قص الكروماتين وتركيز الجسم المضاد لكل نوع خلية. قم بتضمين مناطق تحكم إيجابية (مثل مواقع جينات HOX) وسلبية (مثل محفزات الجينات المنزلية) في تحليل qPCR.
• لـ CUT&Tag (القطع تحت الأهداف والتمزيق)، يمكن أن يعمل الجسم المضاد كجسم مضاد أولي للتوجيه والقطع في الموقع. اتبع بروتوكول الشركة المصنعة لطرق الارتباط المباشرة أو القائمة على الحبيبات. قد يكشف التحليل على مستوى الجينوم عن توزيع H3K27me3 عبر الجينوم.
• في التألق المناعي (IF/ICC) والكيمياء النسيجية المناعية (IHC-P)، من المتوقع تلطيخ نووي. قم بتحسين ظروف التثبيت (مثل 4% PFA لـ IF، مقاطع مثبتة بالفورمالين ومضمنة بالبارافين لـ IHC) وظروف النفاذية. يمكن أن يقلل الحجب بالمصل/ألبومين المصل البقري من الخلفية.
• تحقق دائمًا من صحة الجسم المضاد في نظام العينة ذي الصلة وسياق التطبيق. قم بتخفيف الجسم المضاد وتضمين ضوابط مناسبة لضمان نتائج قابلة للتكرار.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تخدم CamelBio كشريك شامل للتوريد لمواد التشخيص الأولية، لسد الفجوة بين اكتشاف الكواشف والتطبيق السريري. لأبحاث التخلق اللاجيني وبيولوجيا الكروماتين، نقدم أجسامًا مضادة أحادية ومتعددة النسيلة معتمدة مثل هذا الجسم المضاد الأحادي النسيلة للأرنب المضاد للهستون H3 ثلاثي الميثيل-ليسين 27، إلى جانب أزواج أجسام مضادة محسنة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة، وتوريد مخصص للأهداف النادرة. سواء كنت بحاجة إلى قابلية تكرار متسقة من دفعة إلى أخرى أو مساعدة في توسيع نطاق فحصك التشخيصي، تكرس CamelBio جهودها لدعم خط تطويرك بالكامل من المفهوم إلى العيادة.