جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة لـ TriMethyl-Histone H3-K14 (Q16695 / P68431) للاستخدام في WB، IF، ELISA

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة الهستون H3 وتوطينه

الهستون H3 هو مكون أساسي للنواة، الوحدة الأساسية للكروماتين. يشكل مع H2A وH2B وH4 نواة الهستون الثمانية التي يلتف حولها الحمض النووي، مما يضغط الجينوم وينظم إمكانية الوصول إلى الحمض النووي. هذا الدور الهيكلي أساسي لعمليات مثل تنظيم النسخ، وإصلاح الحمض النووي، وتكرار الحمض النووي، واستقرار الكروموسومات. يتم التحكم في وظيفة الهستون H3 بشكل ديناميكي من خلال مجموعة معقدة من التعديلات ما بعد الترجمة (PTMs)، بما في ذلك الأسيتلة، والمثيلة، والفوسفرة، وغيرها، والتي يشار إليها مجتمعة باسم "شفرة الهستون". هذه التعديلات تغير بنية الكروماتين وتعمل كمنصات ربط للبروتينات المؤثرة.

يتوطن الهستون H3 بشكل أساسي في النواة ويتوزع على طول الكروموسومات. توجد متغيرات مختلفة لـ H3: H3.1 وH3.2 الأساسيان، وH3.3 المستقل عن التكاثر، وH3.1t الخاص بالخصية (المشفر بواسطة H3-4/HIST3H3). وفقًا ليونيبروت، يتم التعبير عن المتغير H3.1t (Q16695) بشكل محدد في الخلايا الخصوية، بينما H3.1 الرئيسي (P68431) موجود في كل مكان. كلا النظيرين يتشاركان درجة عالية من تطابق التسلسل ويخضعان لتعديلات ما بعد الترجمة مماثلة.

بقايا K14 من الهستون H3 هي موقع معروف لتعديلات ما بعد الترجمة المتعددة، بما في ذلك الأسيتلة (H3K14ac) والمثيلة. تعد ثلاثي مثيلة H3K14 (H3K14me3) تعديلاً تم التعرف عليه مؤخرًا وقد يلعب أدوارًا في تنظيم الكروماتين والتعبير الجيني. تم تطوير هذا الجسم المضاد ضد ببتيد اصطناعي يمتد عبر الطرف الأميني (aa1-100)، وهي المنطقة التي تبرز من النواة وتكون الأكثر تعديلاً. من المتوقع أن يكتشف بشكل محدد الشكل ثلاثي الميثيل لـ K14.

مراجع ذات صلة: يونيبروت Q16695 يونيبروت P68431

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع الطرف الأميني (الأحماض الأمينية 1-100) من الهستون H3 البشري. هذه المنطقة محفوظة بشدة، مما يفسر التفاعل المتصالب المتوقع الواسع. ومع ذلك، نظرًا لأن هذا الجسم المضاد يستهدف تعديلاً محددًا بعد الترجمة (ثلاثي ميثيل K14)، يوصى بالتحقق من صحته في نظام الخلية أو النسيج محل الاهتمام لتأكيد التفاعل والنوعية.
• لعملية البقع الغربية (Western blotting)، ترتبط الهستونات بقوة بالحمض النووي النووي؛ وبالتالي، قد تحسن بروتوكولات الاستخلاص الحمضي أو إثراء الهستون من الكشف. استخدم ضوابط تحميل مناسبة (مثل H3 أو H4 الكلي) لتوحيد الاختلافات في التحميل.
• للمناعة المتألقة/ICC، يكون التثبيت باستخدام بارافورمالدهيد متبوعًا بالنفاذية باستخدام Triton X-100 فعالاً عادةً للأهداف النووية. ومع ذلك، قد يكون الحاتمة حساسًا للتثبيت المفرط؛ قم بتحسين وقت التثبيت وتركيز المنظف.
• نظرًا لأن الأجسام المضادة الخاصة بتعديلات ما بعد الترجمة قد تظهر بعض التفاعل المتصالب مع تعديلات أخرى، فكر في استخدام مقايسات تنافس الببتيد (مثل تحضين الجسم المضاد مسبقًا مع ببتيد ثلاثي ميثيل K14 مقابل ببتيدات غير معدلة أو أحادي/ثنائي الميثيل) للتحقق من النوعية في ظل ظروفك التجريبية.
• يُدرج ELISA كتطبيق؛ للتغطية، يمكن استخدام ببتيدات الهستون أو النوى المنقاة. تأكد من أن الطلاء يغطي حاتمة K14me3 بشكل كافٍ.

كاميل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تقدم كاميل بيو نفسها كشريك شامل في التوريد للمواد الخام للتشخيص المخبري (IVD)، حيث تقدم حل توريد شامل يسرع عملية تطوير التشخيص الخاص بك من المفهوم إلى العيادة. بالإضافة إلى هذا الجسم المضاد الأرنب متعدد النسيلة لـ TriMethyl-Histone H3-K14، توفر كاميل بيو أزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، وأجسام مضادة وحيدة النسيلة/متعددة النسيلة محسنة لتعديلات الهستون المختلفة، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة، وتوريد مخصص للمواد الخام ذات الأهداف النادرة. سواء كنت تقوم بتطوير مقايسات بيولوجيا الكروماتين أو اختبارات المؤشرات الحيوية للتخلق المتعاقب (الإبيجينيتكس)، فإن محفظة منتجات كاميل بيو تدعم احتياجاتك البحثية والتصنيعية بسلاسل توريد موثوقة وجاهزة للتدقيق.