مضاد أحادي النسيلة من أرنب لـ SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y) لـ WB و ELISA - P0DTC2

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين SARS-CoV-2 Spike RBD (N501Y)

• بروتين السكر السنبلي (S) لفيروس كورونا SARS-CoV-2 هو بروتين اندماج من الفئة الأولى ثلاثي التمرير يوسيط التعلق الفيروسي ودخوله إلى الخلايا المضيفة من خلال التفاعل مع مستقبل إنزيم محول الأنجيوتنسين 2 (ACE2). مراجع ذات صلة: PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086
• يتم تصنيعه كبروتين سابق ويتم تقطيعه إلى وحدتين فرعيتين S1 و S2؛ تحتوي الوحدة الفرعية S1 على مجال الارتباط بالمستقبل (RBD) الذي يتفاعل مع ACE2، بينما تتوسط الوحدة الفرعية S2 اندماج الغشاء.
• يؤدي تقطيع الوحدة الفرعية S2 في موقع S2' بواسطة بروتيازات المضيف TMPRSS2 (على سطح الخلية) أو كاتيبسين L (في الجسيمات الداخلية) إلى كشف الببتيد الاندماجي وتحفيز تغييرات conformational لا رجعة فيها مطلوبة لدخول الفيروس. مراجع ذات صلة: PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• يمكن لبروتين السنبلي استخدام مستقبلات دخول بديلة، بما في ذلك نيروبيلين-1 (NRP1) و NRP2، والإنتجرينات، ومستقبل glycoprotein غير المشوي 1 (ASGR1)، مما قد يؤثر على الانسجة المستهدفة. مراجع ذات صلة: PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• هيكلياً، يحتوي مجال الساق لبروتين S على ثلاث مفاصل تمنح مجال الرأس حرية توجيهية كبيرة، وهي ميزة مهمة للتفاعل مع المستقبل. مراجع ذات صلة: PMID:32817270
• إنه glycosylated بشكل كثيف ويحتوي على روابط disulfide متعددة؛ يوجد موقع palmitoylation في الذيل السيتوبلازمي. يقع بروتين السنبلي على غشاء الفيرون، وغشاء الحجيرة الوسيطة بين الشبكة الإندوبلازمية وجهاز جولجي للمضيف، وغشاء الخلية المضيفة.
• تشمل الكلمات المفتاحية أيضاً: التهرب المناعي الفيروسي، وتثبيط الاستجابة المناعية الفطرية للمضيف، ونشاط المستضد الفائق، مما يشير إلى أدوار تتجاوز دخول الخلية.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• تم إنتاج هذا المضاد ضد ببتيد صناعي يغطي الأحماض الأمينية 450-550 من SARS-CoV-2 Spike RBD (طفره N501Y) وبالتالي من المحتمل أن يتعرف على epitope داخل هذه المنطقة؛ تأكد من النوعية ضد النوع البري والمتغيرات الأخرى إذا كانت بيانات التفاعل المتقاطع مطلوبة.
• للترحيل الغربي (Western blotting - WB)، استخدم ظروفاً اختزالية وفكر في إزالة السكر (deglycosylation) لتحسين كشف بروتين السنبلي الكامل الطول بحجم ~141 كيلو دالتون؛ تحقق من الصحة باستخدام RBD مؤتلف أو سنبلي ثلاثي كعنصر تحكم إيجابي.
• في تطبيقات ELISA، يمكن لهذا المضاد أحادي النسيلة أن يعمل ككاشف أو عامل اكتشاف؛ يجب تحسين تركيز التغليف وظروف الحظر بشكل كافٍ في مصفوفة العينة ذات الصلة.
• نظراً للدور الحرج لـ RBD في التعلق بخلايا المضيف، قد يكون هذا المضاد مفيداً لدراسات التحيد أو اختبارات الارتباط التنافسي، ولكن تتطلب هذه الاستخدامات تحقيقاً وظيفياً مستقلاً.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تعمل CamelBio كشريك توريد شامل لمصنعي التشخيص في الموقع (IVD) والباحثين، حيث تقدم أضداداً ومستضدات ومواد كيميائية مساعدة عالية الجودة لأبحاث الأمراض المعدية وتطوير التشخيصات. لدراسات SARS-CoV-2، نحن نقدم محفظة منسقة من أزواج الأضداد التي تم التحقق منها، والأضداد أحادية النسيلة، والبروتينات المؤتلفة لتسريع تطوير المقايسات. اتصل بفريقنا للحصول على حلول توريد مخصصة ودعم فني مصمم لتناسب احتياجات مشروعك.