أرنبي مضاد للفوسفو-PI3K البشري P85α-Y467+P85β-Y464+P55γ-Y199 mAb - P27986 / O00459 / Q92569

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين الوحدات الفرعية المنظمة لـ PI3K (p85α/p85β/p55γ)

• يقوم جين PIK3R1 بترميز الوحدة الفرعية المنظمة p85α لـ PI3K، والتي توجد كأشكال متساوية متعدد (p85α, p55α, p50α) من خلال التوصيل البديل. الشكل المتساوي p85α هو البروتين بطول كامل، بينما تفتقر الأشكال المتساوية الأقصر إلى نطاق SH3 الطرفي N ومنطقة تشابه BH. يتعرف هذا الجسم المضاد على الأشكال الفوسفورية عبر منتجات الجينات الثلاثة PIK3R1 (p85α) و PIK3R2 (p85β) و PIK3R3 (p55γ).
• ترتبط الوحدات الفرعية المنظمة بكيازات البروتين-تيروزين المنشطة (الفوسفورية) عبر نطاقات SH2 الخاصة بها، وتعمل كجزيئات محول تجند الوحدة الفرعية المحفزة p110 إلى غشاء البلازما، وبالتالي تنشيط إشارات PI3K. المراجع ذات الصلة: PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429
• الوحدات الفرعية المنظمة لـ PI3K ضرورية لامتصاص الجلوكوز المحفز بالأنسولين وتخليق الجليكوجين في الأنسجة الحساسة للأنسولين مثل العضلات الهيكلية والكبد. كما تتوسط الإشارات في المصب لمستقبلات عوامل النمو (FGFR1-4, PDGFR, KIT) والإنتيجرين ITGB2. المراجع ذات الصلة: PMID:17626883 PMID:7518429
• ينظم p85α الاستجابة الخلوية لإجهاد الشبكة الإندوبلازمية (ER) عن طريق تعزيز النقل النووي للشكل المتساوي 2 من XBP1 بطريقة تعتمد على إجهاد الشبكة الإندوبلازمية و/أو الأنسولين، خاصة أثناء الحمل الزائد الأيضي في الكبد، وبالتالي تحسين تحمل الجلوكوز. المراجع ذات الصلة: PMID:20348923
• الوحدات الفرعية p85α/p85β/p55γ هي في المقام الأول سيتوبلازمية، حيث ترتبط بالوحدة الفرعية المحفزة p110. عند التنشيط، يتم تجنيدها إلى غشاء البلازما لتوطين إنزيم PI3K الكامل بالقرب من ركائزه الدهنية.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الفسفرة في بقايا التيروزين المتعددة (مثل Y467 من p85α، و Y464 من p85β، و Y199 من p55γ) بواسطة كينازات التيروزين المستقبلة وغير المستقبلة، وهو أمر بالغ الأهمية لتنظيم نشاط PI3K والتفاعلات بين البروتينات. تشمل التعديلات الإضافية الأسيتلة واليبيكويتين.
• الشكل المتساوي 2 من PIK3R1 (p55α) معبر عنه بشكل عالٍ في العضلات الهيكلية والدماغ، بمستويات أقل في الكلية والعضلة القلبية. على مستوى البروتين، يتم اكتشاف كل من الشكل المتساوي 2 والشكل المتساوي 4 (p50α) في العضلات الهيكلية، مما يشير إلى أدوار خاصة بالنسيج في إشارات الأنسولين والأيض.
• ترتبط الطفرات في PIK3R1 بمتلازمة SHORT (قصر القامة، فرط المرونة، الاكتئاب العيني، شذوذ ريغر، وتأخر التسنين) واضطرابات النمو الأخرى، مما يسلط الضوء على دوره في التطور وإشارات عامل النمو الشبيه بالأنسولين.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• المستضد هو ببتيد فوسفوري اصطناعي يشمل Y467 من p85α البشري. تأكد من أن نظامك التجريبي يحافظ على الفسفرة - استخدم مثبطات الفوسفاتاز أثناء تحضير العينة وفكر في ظروف التحفيز (مثل الأنسولين، عوامل النمو) لتعزيز اكتشاف الظاهرة الفوسفورية.
• تم التحقق من صحة هذا الجسم المضاد لقياس التدفق الخلوي داخل الخلايا (FC). للتلوين الأمثل، قم بتثبيت الخلايا وجعلها نفاذة باستخدام بروتوكولات متوافقة مع الكشف الخاص بالفوسفور (مثل التثبيت بالفورمالديهايد يليه النفاذية بالميثانول). قم بتركيب الجسم المضاد لتحديد التخفيف الأمثل لنوع الخلايا وظروف العلاج الخاصة بك.
• بما أن الجسم المضاد يتعرف على فوسفو-Y467 من p85α، وفوسفو-Y464 من p85β، وفوسفو-Y199 من p55γ، فإن نطاق الوزن الجزيئي الملاحظ قد يختلف. في التلطيخ الغربي (إذا تمت المحاولة)، قد تظهر النطاقات بين 42-54 كيلو دالتون (للأشكال المتساوية الأقصر) و 81-84 كيلو دالتون (لـ p85α/p85β بطول كامل). قم بتشغيل ضوابط إيجابية مناسبة (مثل خلايا HepG2 أو HeLa المحفزة بالأنسولين) وتحقق من النوعية باستخدام العلاج بالفوسفاتاز.
• فكر في استخدام هذا الجسم المضاد بالتزامن مع أجسام مضادة للوحدات الفرعية المنظمة الكلية لـ PI3K لتقييم نسب الفسفرة في دراسات الإشارات. لقياس التدفق الكمي، تأكد من توافق الفلوروفور مع تكوين جهاز قياس التدفق الخاص بك وتضمين ضوابط التعويض إذا كنت تقوم بالتعدد.
• تم الإبلاغ عن التفاعل المتقاطع للإنسان. إذا كنت تعمل مع أنواع أخرى، تحقق من حفظ مواقع الفوسفور المستهدفة باستخدام محاذاة التسلسل قبل الاستخدام.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تتخصص CamelBio في توفير وصول شامل لمصنعي التشخيص والمختبرات ومعاهد البحث إلى المواد الخام لـ IVD والخدمات التقنية والاستشارات - من المفهوم إلى العيادة. يدعم هذا الجسم المضاد ضد الوحدة الفرعية المنظمة لـ Phospho-PI3K الأبحاث حول مسارات إشارات PI3K/AKT التي يشار إليها بشكل شائع في السرطان واضطرابات التمثيل الغذائي وعلم المناعة. من خلال شبكة التوريد المتكاملة لدينا، يمكننا توريد أزواج الأجسام المضادة التي تم التحقق منها، وأجسام مضادة أحادية/متعددة النسيلة محسنة، ومواد مساعدة بالجملة، وحتى مواد خام لأهداف نادرة لتسريع احتياجات تطوير وإنتاج المقايسات الخاصة بك.