أرنب مضاد وحيد النسيلة لـ LAMP2 البشري لـ IF/ICC وتدفق الخلايا داخل الخلوية - P13473

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة LAMP2 وتوطينه

• يعد LAMP2 (بروتين الغشاء السكري المرتبط بالجسيمات الحالة 2)، والمعروف أيضاً باسم CD107b أو LAMP-2 أو LGP-96 أو LGP110، بروتيناً عبر الغشاء غني بالسكريات ويشفره جين LAMP2. من خلال التوصيل البديل، ينتج ثلاثة أشكال نظيرة رئيسية: LAMP-2A و LAMP-2B و LAMP-2C، والتي تختلف في ذيولها السيتوبلازمية وتظهر توزيعات أنسجة مميزة.
• بصفتها بروتيناً سكرياً رئيسياً لغشاء الجسيمات الحالة، تلعب LAMP2 دوراً أساسياً في تكوين الجسيمات الحالة وتنظيم درجة الحموضة من خلال العمل كمثبط مباشر لقناة البروتون TMEM175، مما يسهل تحمض الجسيمات الحالة ونشاط الإنزيمات المحللة الأمثل. مراجع ذات صلة: PMID:37390818
• يعد LAMP2 وسيطاً مركزياً للاستهلاك الذاتي الوسيط بالكابتن (CMA)، وهو مسار تحلل انتقائي. يرتبط بمعقدات الكابتن السيتوبلازمية (مثل HSPA8/HSC70) التي تنقل البروتينات المستهدفة مثل GAPDH و GPX4 و NLRP3 و MLLT11 إلى غشاء الجسيمات الحالة، حيث تعمل LAMP2 كمستقبل لنقل الركائز إلى الجسيمات الحالة من أجل التحلل. مراجع ذات صلة: PMID:11082038، PMID:18644871، PMID:24880125، PMID:36586411
• يتطلب LAMP2 اندماج الجسيمات التالفة للذات مع الجسيمات الحالة خلال الالتهام الذاتي الكلي؛ تفشل الخلايا التي تفتقر إلى LAMP2 في تراكم STX17 على الجسيمات التالفة للذات، مما يمنع الاندماج ويضعف تحلل حمولة الالتهام الذاتي. مراجع ذات صلة: PMID:27628032
• يسهل LAMP2 العرض الفعال لمستضدات خارجية المنشأ بوساطة معقد التوافق النسيجي الرئيسي من الفئة الثاني من خلال تمكين التحلل الليسوسومي والتحميل اللاحق للببتيدات المستضدية على جزيئات MHC II الوليدة، على الرغم من أنه غير ضروري لعرض المستضدات الداخلية المنشأ. مراجع ذات صلة: PMID:15894275، PMID:20518820
• على المستوى تحت الخلوي، يتوطن LAMP2 بشكل أساسي في غشاء الجسيمات الحالة، ولكنه يوجد أيضاً في أغشية الجسيمات الداخلية والجسيمات التالفة للذات والغشاء البلازمي، مما يعكس حركته ووظائفه الديناميكية في مسارات الجسيمات الحالة الداخلية والالتهام الذاتي.
• يتم ملاحظة أنماط التعبير الخاصة بالنمط النظيري: يتم التعبير عن LAMP-2A بشكل كبير في المشيمة والرئة والكبد، بينما تظهر LAMP-2B و LAMP-2C توزيعات مميزة عبر أنسجة مثل الطحيم والغدة الزعترية والدماغ والأمعاء الدقيقة. مراجع ذات صلة: PMID:26856698، PMID:7488019
• تجدر الإشارة إلى أن LAMP2 مرتبط بمرض دانون، وهو اضطراب في تخزين الجليكوجين، وتتضمن دراسته كلمات مفتاحية مثل التوصيل البديل والالتهام الذاتي والرابطة ثنائية الكبريتيد والبروتين السكري والحلزون عبر الغشاء.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• يتطابق المستضد مع الأحماض الأمينية 29-375 من LAMP2 البشري، ويغطي نطاقاً داخلياً كبيراً مشتركاً بين جميع الأشكال النظيرة؛ يدعم هذا التغطية الواسعة كشف متغيرات LAMP2 متعددة حيث تسمح به تجانس التسلسل.
• الجسم المضاد مترافق مباشرة مع ، مما يتيح التلوين بخطوة واحدة للمناعة المناعية (IF/ICC) وتدفق الخلايا داخل الخلوية (FC intra) دون الحاجة إلى أجسام مضادة ثانوية.
• بالنسبة لتدفق الخلايا داخل الخلوية، يلزم التثبيت والنفاذية؛ استخدم بروتوكولات قياسية (مثل التثبيت بـ 4% PFA يليه النفاذية باستخدام السابونين أو تريتون X-100) وقم بتحسين أوقات الحضن وتركيزات الأجسام المضادة لنوع الخلايا الخاص بك.
• تحقق من أداء الجسم المضاد في النظام البيولوجي ذي الصلة (إنسان) وضمن ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل الخلايا البرية مقابل الخلايا التي تم فيها إسكات LAMP2) لتأكيد النوعية.
• نظراً لأن LAMP2 غني بالسكريات ويتواجد في أشكال نظيرة متعددة، فقد يختلف الوزن الجزيئي الظاهري في التلطيخ الغربي (Western blot) عن الوزن المتوقع 44-45 كيلو دالتون؛ الاختبار بواسطة WB غير مدرج، لذا إذا لزم الأمر، فكر في إجراء تجارب استكشافية للتحقق من قدرة الكشف.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تعد CamelBio شريك توريد شامل للمواد الخام لتشخيص المختبر (IVD) والخدمات التقنية والدعم الاستشاري من المفهوم إلى العيادة. للباحثين ومطوري التشخيص الذين يركزون على بيولوجيا الجسيمات الحالة أو الالتهام الذاتي أو مسارات العرض المناعي، نحن نقدم أجساماً مضادة وحيدة النسيلة جاهزة للاستخدام مثل هذا المترافق المضاد لـ LAMP2، بالإضافة إلى أزواج من الأجسام المضادة تم التحقق من صحتها، ومواد مساعدة بالجملة، وتوريد مخصص للمواد الخاملة للأهداف النادرة لتسهيل تطوير المقايسات الخاصة بك.