جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرنب مضاد لـ IgG البشري (Fc) لقياس التدفق الخلوي - P01857

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة IgG (Fc) وموقعه

• الهدف هو المنطقة الثابتة (Fc) من السلسلة الثقيلة للغلوبولين المناعي البشري غاما-1 (IgG1)، التي يشفرها جين IGHG1، وتقابل الأحماض الأمينية 100-330 من البروتين الناضج (UniProt P01857). تتوسط هذه المنطقة الوظائف المؤثرة من خلال التفاعل مع مستقبلات Fc والمتممة.
• تُعد السلاسل الثقيلة للغلوبولينات المناعية أساسية للمناعة التكيفية: إذ يعمل Ig المرتبط بالغشاء كمستقبل للخلايا البائية، بينما تعمل الأجسام المضادة المُفرزة على تحييد مسببات الأمراض. وتُحفز منطقة Fc من IgG1 تحديدًا السمية الخلوية المعتمدة على الأجسام المضادة، والسمية الخلوية المعتمدة على المتممة، والبلعمة (PubMed:17576170، PubMed:20176268، PubMed:22158414). المراجع ذات الصلة: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• يتكون IgG1 من سلسلتين ثقيلتين متطابقتين مرتبطتين بروابط ثنائية الكبريت بسلسلتين خفيفتين؛ وتحتوي كل سلسلة ثقيلة على مجال متغير واحد (تشفّره مقاطع V وD وJ) وثلاثة مجالات ثابتة (CH1 وCH2 وCH3). ويشكّل المجالان CH2 وCH3 جزء Fc الذي يستهدفه هذا الجسم المضاد.
• يقع جين IGHG1 ضمن موضع السلسلة الثقيلة للغلوبولين المناعي على الكروموسوم 14، ويحدث إعادة تركيب تبديل الفئة من IgM/IgD إلى IgG1 في الخلايا البائية المنشطة، مما يسهم في تشكيل مجموعة الأجسام المضادة.
• يُعد IgG1 أكثر أنماط الأجسام المضادة وفرةً في مصل الإنسان، وهو ضروري للمناعة الخلطية طويلة الأمد، ويُستخدم غالبًا كهيكل أساسي للأجسام المضادة العلاجية.
• الموقع داخل الخلوي: تُفرز السلاسل الثقيلة لـ IgG1 على شكل أجسام مضادة أو تُعرض على سطح الخلايا البائية على هيئة غلوبولينات مناعية مرتبطة بالغشاء (شكل عابر للغشاء).
• تشمل التعديلات التالية للترجمة تكوين الروابط ثنائية الكبريت والارتباط بالغليكوزيل N عند مجال CH2 المحفوظ، وهو أمر ضروري لارتباط مستقبلات Fc والاستقرار.
• الكلمات المفتاحية: المناعة التكيفية، مُفرَز، غشاء الخلية، بروتين سكري، مجال الغلوبولين المناعي، رابطة ثنائية الكبريت.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• الجسم المضاد مقترن بـ ، وهو فلوروفور مستقر ضوئيًا بحدود قصوى للاستثارة/الانبعاث تبلغ نحو 590/617 نانومتر، ومتوافق مع أجهزة قياس التدفق الخلوي القياسية. احرص على ضبط إعدادات الجهاز المناسبة وإجراء التعويض.
• في قياس التدفق الخلوي، عاير تركيز الجسم المضاد لتحديد تركيز التلوين الأمثل (عادةً 0.5-5 ميكروغرام لكل 10^6 خلايا) باستخدام خلايا ضابطة إيجابية وسلبية تعبّر عن IgG البشري (مثل الخلايا البائية البشرية أو خطوط الخلايا التي تعبّر عن IgG الغشائي).
• نظرًا إلى أن الجسم المضاد يتعرف على منطقة Fc، فقد يرتبط بـ IgG الحر في المصل أو وسط الزراعة؛ لذلك اغسل الخلايا جيدًا لتقليل الخلفية.
• يمكن استخدام هذه النسيلة للكشف عن IgG السطحي على الخلايا البائية البشرية، أو لتحديد الجسيمات المغطاة بـ IgG أو المعقدات المناعية في البيئات البحثية.
• تجنب التثبيت أو النفاذية القاسية التي قد تغير حاتمة Fc؛ ويكون التثبيت الخفيف بالبارافورمالدهيد (1-4%) متوافقًا عمومًا.
• استخدم كواشف حجب مستقبلات Fc عند تلوين الخلايا ذات التعبير المرتفع عن FcγR لمنع الارتباط غير النوعي.
• ضع في الاعتبار التحقق من التفاعل المتصالب مع الأنماط الفرعية الأخرى من IgG ‏(IgG2 وIgG3 وIgG4) عند الحاجة، نظرًا إلى أن تسلسلات منطقة Fc تتمتع بتجانس مرتفع.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تدعم CamelBio مصنّعي التشخيص ومعاهد الأبحاث والمختبرات من خلال توفير مشتريات شاملة للمواد الخام الخاصة بالتشخيص المختبري (IVD). ويكمل هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة المضاد لـ IgG البشري (Fc) الأبحاث في علم المناعة وهندسة الأجسام المضادة وبيولوجيا الخلايا البائية. بالإضافة إلى الأجسام المضادة الأولية التي تم التحقق من صلاحيتها، يمكن لـ CamelBio توفير أجسام مضادة أحادية النسيلة/متعددة النسيلة محسّنة، وبروتينات مؤتلفة، وكواشف مساندة، مما يسهّل سير العمل بدءًا من التطوير في المراحل المبكرة ووصولًا إلى التطبيق السريري.