الجسم المضاد وحيد النسيلة للأرنب ضد PKC alpha للاستخدام في IF/ICC وELISA - P17252

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوضع النوع alpha من بروتين كيناز C

• النوع alpha من بروتين كيناز C ‏(PKCα)، الذي يشفّره جين PRKCA (الأسماء المستعارة: PKCA، PRKACA)، هو كيناز سيرين/ثريونين بروتيني يُفعّل بواسطة الكالسيوم ويعتمد على الدهون الفوسفورية وثنائي أسيل الغليسرول (DAG). وينتمي إلى عائلة كينازات PKC التي تؤدي أدوارًا رئيسية في مسارات نقل الإشارة المتنوعة.
• يشارك PKCα في التنظيم الإيجابي والسلبي لتكاثر الخلايا، والاستماتة، والتمايز، والهجرة، والالتصاق، ونشوء الأورام، وتضخم القلب، وتكوّن الأوعية، ووظيفة الصفائح الدموية، والالتهاب. كما يفسفر مباشرةً أهدافًا مثل RAF1 وBCL2 وCSPG4 وTNNT2/CTNT، وينشّط سلاسل إشارات MAPK/ERK وRAP1GAP.
• في بيولوجيا السرطان، يُعبَّر عن PKCα بمستويات مرتفعة في أورام مختلفة، بما في ذلك الأورام الدبقية وسرطانات الثدي، حيث يمكن أن يعمل كمحفز للورم. ويُظهر وظائف مضادة للاستماتة من خلال تثبيط تنشيط IGFBP3 بوساطة p53 وفسفرة BCL2. وفي خلايا الورم الدبقي، يعزز نمو الخلايا عبر RAF1/MAPK/ERK.
• ينظم PKCα ديناميكيات الهيكل الخلوي وهجرة الخلايا. فعلى سبيل المثال، يفسفر CSPG4، مما يحفز تكوّن الصفائح اللاميبودية واستقطاب الخلايا. وأثناء هجرة خلايا T ‏CD4+ المستحثة بالكيموكينات، يفسفر PKCα البروتين DOCK8، مما يؤدي إلى تنشيط CDC42 وتعزيز الحركة. المراجع ذات الصلة: PMID:28028151
• يتسم التوضع داخل الخلوي لـ PKCα بالديناميكية؛ إذ ينتقل بين السيتوبلازم، وغشاء الخلية، وغشاء الميتوكوندريا، والنواة، اعتمادًا على التحفيز. وتُعد هذه الحركة ضرورية لوظائفه في نقل الإشارة ضمن عمليات مثل تمايز البلاعم والتئام الجروح.
• في الجهاز القلبي الوعائي، ينظم PKCα تقلص عضلة القلب سلبيًا من خلال فسفرة التروبونين T القلبي (TNNT2/CTNT)، مما يقلل نشاط ATPase للأكتوميوسين وحساسية الكالسيوم. كما يعزز تضخم القلب عبر إشارات MAPK/ERK، وهو ضروري لتكوّن الأوعية، إذ يتوسط هجرة الخلايا البطانية والإشارات المعتمدة على VEGFA.
• يخضع PKCα لتعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الفسفرة والأسيتلة، والتي تعدّل نشاطه وتفاعلاته. كما أنه جين أولي مسبب للسرطان ومدخل ضمن البروتيوم المرجعي (كلمات UniProt المفتاحية: الأسيتلة، الاستماتة، الارتباط بـ ATP، الكالسيوم، التصاق الخلايا، غشاء الخلية، السيتوبلازم، التسلسل البروتيني المباشر، الكيناز، الغشاء، الارتباط بالمعادن، الميتوكوندريا، الارتباط بالنيوكليوتيدات، النواة، البروتين الفسفوري، تحديد البروتيوميات، الجين الأولي المسبب للسرطان، البروتيوم المرجعي، التكرار، كيناز السيرين/الثريونين البروتيني، الترانسفيراز، الزنك، إصبع الزنك).
• يفسفر PKCα البروتين KLHL3 استجابةً للأنجيوتنسين II، مما يؤثر في إشارات WNK4 واتزان الأيونات. كما ينشّط LRRK1، الذي يفسفر بدوره بروتينات RAB لتنظيم النقل داخل الخلايا. المراجع ذات الصلة: PMID:25313067 PMID:36040231

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• المستضد المناعي المستخدم هو بروتين PKC alpha بشري مؤتلف. وعادةً ما ينتج عن هذا التصميم أجسام مضادة تتعرف على التكوينات الطبيعية للبروتين. بالنسبة إلى IF/ICC، يُنصح بتحسين ظروف التثبيت والنفاذية للحفاظ على التوضع داخل الخلوي للهدف (السيتوبلازم، والغشاء، والنواة).
• بالنسبة إلى ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد للكشف عن PKCα في محاليل الخلايا أو عينات البروتين المنقى. ويُنصح بدمجه مع نظام كشف مناسب والتحقق منه في نظام العينات ذي الصلة لضمان النوعية.
• غالبًا ما يتضمن تنشيط PKCα انتقاله؛ لذلك، في تجارب IF/ICC، قد يكشف التحفيز بمنبهات مثل PMA عن أنماط إعادة توزيع ديناميكية. يجب دائمًا تضمين الضوابط المناسبة.
• تم الإبلاغ عن التفاعل المتصالب مع الإنسان؛ لذا يجب التحقق من التفاعل مع الأنواع الأخرى عند الحاجة.

CamelBio: بوابتك الشاملة للتوريد

توفر CamelBio لمصنّعي التشخيص والمختبرات ومعاهد الأبحاث وصولًا شاملًا إلى المواد الخام لتشخيص المختبرات الطبية (IVD)، والخدمات التقنية، والاستشارات. ويُعد هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة ضد PKC alpha جزءًا من محفظتنا الواسعة من كواشف الأجسام المضادة المعتمدة لتطبيقات أبحاث الإشارات الخلوية والسرطان. سواء كنت بحاجة إلى أزواج أجسام مضادة محسّنة، أو أجسام مضادة وحيدة النسيلة/متعددة النسائل، أو كواشف مساعدة بكميات كبيرة، أو توريد مواد خام لأهداف نادرة، تدعم CamelBio تطويرك من الفكرة إلى العيادة.