مضاد أحادي النسيلة أرنبي للفوسفو-سماد2 (S245/S250/S255) للتلطيح الغربي واختبار الإنزيم المرتبط بالمناعة - Q15796

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين بروتين SMAD2

• SMAD2 (المتماثل الأم لـ Mothers against decapentaplegic 2) هو بروتين SMAD منظم بالمستقبلات (R-SMAD) يعمل كمحول إشارات داخل الخلايا ومعدل نسخي لعامل نمو الخلايا المحول TGF-beta وكينازات مستقبلات الأكتيفين من النوع الأول.
• بعد عملية الفسفرة عند شكل SXS في نهايته الكربونية (بقايا السيرين 465 و 467)، يشكل SMAD2 مركباً مع SMAD4 وينتقل إلى النواة حيث يرتبط بعنصر الاستجابة لـ TGF-beta (TRE) في محفزات الجينات المستهدفة لتنظيم النسخ الجيني.
• ينظم SMAD2 بشكل إيجابي نشاط كيناز PDPK1 عن طريق تحفيز انفصاله عن البروتين المثبط 14-3-3 YWHAQ.
• تم ربطه بدوره كمثبط للورم في سرطان القولون والمستقيم. المراجع ذات الصلة: PMID:8752209
• على المستوى تحت الخلوي، يتنقل SMAD2 بين السيتوبلازم والنواة، بما يتوافق مع دوره في نقل الإشارات.
• يتم التعبير عن البروتين بمستويات عالية في العضلات الهيكلية، والخلايا البطانية، والقلب، والمشيمة.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الفسفرة، والأستلة، واليوبيكوتين، التي تنظم نشاطه، واستقراره، وتفاعلاته.
• ينتج عن الربط البديل تعدد الأشكال للبروتين، ويحتوي على مجال ارتباط أيون الزنك (مجال MH1) يتوسط ارتباطه بالحمض النووي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تم إنتاج هذا الجسم المضاد ضد ببتيد فوسفوري؛ لذا يجب أن تحتوي مخازن تحلل العينات على مثبطات الفوسفاتاز (مثل أورثوفانادات الصوديوم، فلوريد الصوديوم) للحفاظ على حالة الفسفرة أثناء التحضير.
• بالنسبة للتلطيح الغربي، يُنصح بتشغيل محللات الخلايا غير المعالجة والمحفزة بـ TGF-β/الأكتيفين معاً لتأكيد تحول النطاقات المعتمد على التنشيط.
• التخفيف الابتدائي الموصى به للتلطيح الغربي هو 1:500–1:2000، ولكن يجب تحديد التركيز الأمثل تجريبياً في نظام العينات الخاص بك.
• في اختبار ELISA، قد يقلل استخدام عازلة الحجب ذات النشاط المنخفض للفوسفاتاز من الإشارة الخلفية؛ يُنصح باستخدام فحص تنافسي بالببتيد الفوسفوري للتحقق من النوعية.
• بصفته جسماً مضاداً أحادي النسيلة أرنبياً، استخدم جسماً مضاداً ثانوياً ضد الغلوبولين المناعي أرنب (H+L) مقترناً بـ HRP أو AP للكشف.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تتعاون CamelBio مع مصنعي التشخيص والمعاهد البحثية لتقديم محفظة شاملة من المواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD)، بما في ذلك أزواج الأجسام المضادة الموثقة، والأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة. بالنسبة للمشاريع التي تستهدف مسار إشارات TGF-beta أو كشف الفوسفو-SMAD2، تقدم CamelBio دعماً مخصصاً للمصادر لتسريع تطوير الاختبار الخاص بك من الفكرة إلى المرحلة السريرية.