جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة Phospho-POLR2A CTD-T4 للاستخدام في WB، IP، ELISA، ChIP - P24928

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين POLR2A

• يُشفر الجين POLR2A الوحدة الفرعية الأكبر لبوليميراز الحمض النووي الريبوزي الثاني (Pol II)، وهو بروتين يزن حوالي 217 كيلو دالتون يعمل كنواة تحفيزية لتخليق الحمض النووي الريبوزي المعتمد على الحمض النووي، وهو أساسي لإنتاج الحمض النووي الريبوزي المرسال والحمض النووي الريبوزي غير المشفر. مراجع ذات صلة: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596
• يتكون المجال الطرفي C (CTD) لبروتين POLR2A من 52 تكرارًا متتابعًا للببتيد السباعي (YSPTSPS) الذي يخضع لعملية فسفرة ديناميكية، بشكل أساسي عند السيرين 2 والسيرين 5، لتنظيم بدء النسخ واستطالة النصوص وإنهائها، بالإضافة إلى معالجة الحمض النووي الريبوزي المصاحبة للنسخ. مراجع ذات صلة: PMID:24207025, PMID:26124092
• يحتوي بروتين POLR2A على تسلسل DxDGD الذي ينسق أيونات المغنيسيوم (Mg2+) الضرورية لإضافة النيوكليوتيدات، ويمتلك أيضًا نشاط نوكلياز خارجي 3'-5' لتصحيح الأخطاء، مما يضمن دقة نسخية عالية. مراجع ذات صلة: PMID:8381534, PMID:9852112
• يتوطن بروتين POLR2A بشكل أساسي في النواة وعلى الكروموسومات، كما تم اكتشافه في السيتوبلازم، مما يعكس تنقله الديناميكي وأدواره المتعددة.
• تعديلات ما بعد الترجمة بما في ذلك فسفرة السيرين/ثريونين، وأسيلة اللايسين، ومثيلة اللايسين، ويوبيكويتينة، تنظم نشاط بوليميراز II وثباته.
• يؤدي التضفير البديل إلى إنتاج أشكال متعددة من البروتين، وترتبط الطفرات في جين POLR2A باضطرابات النمو العصبي، مما يسلط الضوء على أهميته السريرية.
• يعمل أيضًا كبوليميراز حمض نووي ريبوزي معتمد على الحمض النووي الريبوزي، مما يطيل نصوص الحمض النووي الريبوزي غير المشفر، ويعمل كإنزيم تضاعف لفيروس التهاب الكبد الدلتا أثناء العدوى.

إرشادات ونصائح تقنية للتجارب

• نظرًا لأن المستضد المناعي هو ببتيد محدد للفسفرة يتوافق مع الموقع T4 من تكرارات المجال الطرفي C (CTD) لبروتين POLR2A، قم بالتحقق من خصوصية الجسم المضاد باستخدام تنافس الببتيد غير المفسفر أو مستخلصات الخلايا المعالجة بالفوسفاتاز لتأكيد الاعتماد على الفسفرة.
• لاختبار اللطخة الغربية (WB)، ونظرًا للحجم الكبير للبروتين (~217 كيلو دالتون)، ضع في الاعتبار استخدام هلامات SDS-PAGE ذات نسبة منخفضة (مثل 6-8٪) وأوقات نقل مطولة لضمان نقل فعال لبروتين POLR2A كامل الطول.
• قد يتطلب تطبيق ChIP تحسين ظروف الربط المتقاطع وتفتيت الكروماتين؛ اختبر طرق تفتيت مختلفة (مثل التفتيت بالموجات فوق الصوتية أو الهضم الإنزيمي) لتحقيق شظايا كروماتين بحجم 200-500 زوج قاعدي.
• في تجارب الترسيب المناعي (IP) و ELISA، قم بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة، مثل مستخلصات من خطوط خلايا معروفة بالتعبير عن POLR2A (مثل HeLa، HEK293) والمتحولات المعيبة في الفسفرة إذا كانت متاحة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تبسط CamelBio عملية شراء المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD) من خلال توفير وصول شامل إلى أجسام مضادة عالية الجودة ومواد كيميائية مساعدة، بما في ذلك هذا الجسم المضاد Phospho-POLR2A لأبحاث النسخ والكروماتين. تغطي مجموعتنا الواسعة أزواج الأجسام المضادة المفحوصة، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والكواشف بكميات كبيرة، وتوريد أهداف نادرة - مما يمكن مصنعي التشخيص والمختبرات البحثية من المفهوم إلى العيادة. شراكة مع CamelBio للحصول على حلول توريد موثوقة وقابلة للتطوير مصممة خصيصًا لمسار التطوير الخاص بك.