الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الأرنبية لفوسفو-PKC ألفا-T410+PKC دلتا-T410 للتلطيخ الغربي (WB) واختبار الإليزا - P17252 / Q05655

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وموضع بروتيني PKC ألفا و PKC دلتا

• PRKCA (PKC ألفا) هو كيناز بروتيني سيرين/ثريونين منشط بالكالسيوم، يعتمد على الفوسفوليبيد و DAG، ينتمي لعائلة PKC التي تضم أيضاً PRKCD (PKC دلتا). ينظم تكاثر الخلايا، الاستماتة، التمايز، الهجرة والالتصاق، ويتم التعبير عنه بكميات عالية في أنواع مختلفة من السرطانات، ويعمل كمحفز للورم.
• يُفوسفر PRKCA ركائز أساسية مثل RAF1 و BCL2 و TNNT2، وبالتالي يُعدل مسار إشارات MAPK/ERK والاستماتة. على سبيل المثال، فسفرة BCL2 تعزز بقاء الخلايا في خلايا سرطان الدم.
• يلعب PRKCA دوراً حاسماً في حركة الخلايا: عند حدوث إصابة، ينتقل إلى الحواف الصفيحية (lamellipodia) ويُفسفر CSPG4، مما يحفز إعادة ترتيب الهيكل الخلوي والهجرة الموجهة.
• يوجد هذا الكيناز في السيتوبلازم، غشاء الخلية، غشاء الميتوكوندريا والنواة، كما أن انتقاله بفعل المحفزات ضروري لوظائفه المحددة حسب السياق.
• تُعد فسفرة حلقة التنشيط (الموقع T410 في PKC دلتا، وهو مكافئ في PKC ألفا) ضرورية لنشاط الكيناز. هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة يتعرف تحديداً على PKC ألفا و PKC دلتا المفسفرين في الموقع T410.
• في الجهاز القلبي الوعائي، ينظم PRKCA سلباً انقباض عضلة القلب ويعزز تكوين الأوعية وتضخم خلايا عضلة القلب، وذلك جزئياً من خلال مسار إشارات MAPK1/3، مما يربطه بفشل القلب.
• يُفسفر PRKCA بروتين DOCK8 للتحكم في CDC42 أثناء هجرة خلايا T (PubMed:28028151)، ويُفسفر KLHL3 في عملية نقل الأيونات في الكلى (PubMed:25313067). كما ينشط LRRK1 لتنظيم نقل بروتينات RAB (PubMed:36040231). المراجع ذات الصلة:
  • PMID:28028151
  • PMID:25313067
  • PMID:36040231

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• كان المستضد المناعي عبارة عن ببتيد فوسفوري اصطناعي يتوافق مع البقايا الموجودة حول الموقع T410 للبروتين PRKCZ البشري، والذي يشترك في التشابه مع تسلسل حلقة التنشيط لكل من PKC ألفا و PKC دلتا. يجب على المستخدمين التحقق من أن الجسم المضاد يتعرف على البروتينات الفوسفورية المتوقعة في نظامهم التجريبي.
• تشمل التطبيقات الموصى بها WB و ELISA. بالنسبة لـ WB، الأوزان الجزيئية المتوقعة هي 76 كيلو دالتون (PKC ألفا) و 77 كيلو دالتون (PKC دلتا). استخدم ضوابط إيجابية مناسبة (مثل الخلايا المنشطة بـ PMA) وضوابط سلبية (معالجة بالفوسفاتيز أو غير منشطة).
• لتأكيد النوعية الفوسفورية المحددة، يُنصح بإجراء معالجة بالفوسفاتيز للمحاليل الخلوية قبل تحليل WB.
• بالنسبة لـ ELISA، اتبع البروتوكولات القياسية للأجسام المضادة الفوسفورية وقم بتحسين ظروف الطلاء والكشف لتحقيق الحساسية المطلوبة.
• نظراً لأن الجسم المضاد وحيد النسيلة من الأرنب، فإنه يوفر قابلية تكرار عالية واتساقاً بين الدفعات المختلفة، مما يجعله مناسباً للدراسات الكمية.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المواد

تقدم CamelBio لشركات التصنيع التشخيصي والمؤسسات البحثية حلاً شاملاً متكاملًا للحصول على المواد الخام للتشخيص المختبري IVD. يدعم هذا الجسم المضاد المضاد لفوسفو-PKC ألفا/دلتا أبحاث الإشارات السرطانية، أمراض القلب والأوعية الدموية والالتهابات. بالإضافة إلى هذا المنتج، نقدم أزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، بروتينات معاد التركيب محسنة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة، مما يضمن التوسع السلس من مرحلة الاكتشاف إلى التطبيقات السريرية.