Phospho-NF-κB p105-S932 Rabbit mAb للويسترن بلوت، ELISA - P19838

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين NF-κB p105

• ينسخ جين NFKB1 بروتين السلائف p105، الذي تتم معالجته بروتينوليتيكياً لتوليد الوحدة الفرعية النشطة p50 لعامل النسخ NF-κB (PubMed:1423592). مراجع ذات صلة: PMID:1423592
• ترتبط الوحدة الفرعية p50 بـ RELA/p65 لتشكيل ثنائي القسيمات p65-p50، وهو مركب NF-κB الأكثر وفرة، الذي يرتبط بمواقع κB (5'-GGRNNYYCC-3') في محفزات الجينات المستهدفة لتنشيط النسخ (PubMed:1740106, PubMed:7830764). مراجع ذات صلة: PMID:1740106, PMID:7830764
• NF-κB هو عامل نسخ متعدد الوظائف مركزي للاستجابة المناعية والالتهاب والموت الخلوي المبرمج وتكاثر الخلايا، وينظمه بروتينات المثبط IκB ومحفزات متنوعة.
• يحتوي بروتين p105 على مجال تجانس Rel (RHD) في الطرف N وتكرارات أنكيرين في الطرف C؛ يعمل كعامل احتجاز سيتوبلازمي لثنائيات القسيمات NF-κB، معزولاً عنها في حالة غير نشطة.
• عند إشارات التنشيط، تقوم كينازات IκB (IKKs) بفسفرة IκB، مما يؤدي إلى تحلله وإطلاق ثنائيات القسيمات NF-κB، التي تنتقل بعد ذلك إلى النواة لتعديل التعبير الجيني.
• تعمل ثنائيات القسيمات المتماثلة p50 كمثبطات نسخية ما لم ترتبط بـ BCL3، مما يسلط الضوء على مرونة التنظيم الخاصة بكل ثنائي قسيمات في NF-κB.
• التعديلات ما بعد الترجمة بما في ذلك الفسفرة والأسيتلة واليوبيكويتين والتنيتروزيل (S-nitrosylation) تضبط بدقة نشاط NF-κB؛ الفسفرة في بقايا السيرين (مثل S932) تشارك في معالجة وتنشيط p105.
• التوطين تحت الخلوي هو سيتوبلازمي في الغالب لـ p105، بينما تنتقل ثنائيات القسيمات التي تحتوي على p50 النشط بين السيتوبلازم والنواة.

إرشادات ونصائح تقنية للتجارب

• المستضد المناعي هو ببتيد فسفوري اصطناعي يتوافق مع البقايا حول Ser932 من NF-κB p105 البشري. بالنسبة للويسترن بلوت، من المتوقع ظهور شريط رئيسي عند حوالي 105 كيلو دالتون (p105) وربما شريط عند حوالي 50 كيلو دالتون (p50). تحقق من خصوصية الفسفرة عن طريق معالجة المحاليل الخلوية بالفوسفاتاز أو المقارنة مع جسم مضاد غير محدد للفسفرة.
• لتطبيقات ELISA، قم بمعايرة وتحسين تركيز الجسم المضاد باستخدام الببتيد المفسفر أو المحاليل الخلوية للخلايا المحفزة. قم بتضمين خطوات حجب مناسبة لتقليل الارتباط غير النوعي.
• نظرًا للتفاعل المتقاطع للجسم المضاد مع الفأر والجرذ، فكر في استخدام خطوط خلوية ذات صلة (مثل Jurkat، HeLa، RAW 264.7) كعناصر تحكم إيجابية. يمكن أن يؤدي تحريض إشارات NF-κB باستخدام TNF-α أو LPS أو PMA/ionomycin إلى تحسين الكشف.
• قم دائمًا بتضمين علامات الوزن الجزيئي وعناصر التحكم المناسبة لتأكيد النوعية، حيث أن أفراد عائلة NF-κB يتشابهون.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تمكّن CamelBio مصنعي التشخيص والمؤسسات البحثية بمجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المخبري (IVD)، بما في ذلك الأجسام المضادة عالية الجودة المحددة للفسفور مثل هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة NF-κB p105-S932. مع خبرتنا في إشارات الالتهاب والمناعة، نقدم أزواج أجسام مضادة معتمدة، وأجسام مضادة أحادية/متعددة النسيلة بكميات كبيرة، ومواد كيميائية مساعدة لتسريع تطوير اختباراتكم. سواء كنتم بحاجة إلى كواشف محسنة لأهداف راسخة أو دعم في توريد أنواع نادرة محددة، فإن منصتنا الشاملة تصل الفجوة من المفهوم إلى العيادة.