Phospho-eIF4EBP1-T45 Rabbit pAb for Western Blot - Q13541

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة eIF4EBP1 وتوطينه

• عامل بدء ترجمة حقيقيات النوى 4E-binding protein 1 (eIF4EBP1، المعروف أيضاً باسم PHAS-I) هو كابت رئيسي لبدء الترجمة المعتمد على الغطاء. ينتمي إلى عائلة بروتينات ربط eIF4E وينافس eIF4G على الارتباط بـ eIF4E، وبالتالي يمنع تجمع معقد eIF4F.
• تنظم نشاط الكابت لـ eIF4EBP1 حالة فسفرته: يرتبط eIF4EBP1 قليل الفسفرة بـ eIF4E بقوة ويمنع الترجمة، بينما يؤدي الفسفرة المفرطة (مثلاً في Thr45 ومواقع أخرى) إلى فصله عن eIF4E، مما يسمح بتشكيل eIF4F وبدء الترجمة.
• يوسّط eIF4EBP1 تنظيم تخليق البروتين المصب لمحفزات متنوعة، بما في ذلك الهرمونات وعوامل النمو والمغذيات، من خلال مسارات إشارة كيناز MAP وmTORC1. الفسفرة في Thr45 هي حد مبكر وحرج في سلسلة الفسفرة المتتالية متعددة المواقع.
• التوطين داخل الخلوي هو في المقام الأول سيتوبلازمي، لكن يمكن لـ eIF4EBP1 أيضاً الانتقال إلى النواة، حيث قد يكون له أدوار تنظيمية إضافية.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الأسيتلة، واليبيكويتين (تشكل رابطة الأيزوببتيد)، والفسفرة الواسعة في بقايا متعددة. الوزن الجزيئي المحسوب للبروتين غير المعدل هو حوالي 12.5 kDa، مع هجرة لوحظت غالباً حول 13-15 kDa على SDS-PAGE اعتماداً على حالة الفسفرة.
• يُعبر عن eIF4EBP1 على نطاق واسع ويلعب دوراً مركزياً في التحكم في نمو الخلايا وتكاثرها وبقائها. يرتبط خلل تنظيم فسفرته بالسرطان واضطرابات التمثيل الغذائي.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• المستضد المستخدم هو ببتيد فوسفوري اصطنقي يمتد عبر Thr45، مما يشير إلى أن هذا الجسم المضاد مصمم للتعرف بشكل خاص على شكل eIF4EBP1 الفوسفوري في Thr45. من غير المحتمل حدوث تفاعل متقاطع مع eIF4EBP1 غير الفوسفوري أو أعضاء آخرين في العائلة، ولكن يجب تقييم ذلك في أنظمة النموذج ذات الصلة.
• بالنسبة لترسيم ويسترن blot، تأكد من تحضين مستخلصات البروتين في وجود مثبطات الفوسفاتاز للحفاظ على حالة الفسفرة. يتوقع ظهور نطاق عند حوالي 13-15 kDa لـ eIF4EBP1 البشري؛ قد يتحول الوزن الجزيئي الظاهري قليلاً اعتماداً على مستويات الفسفرة الكلية.
• قم بتضمين ضوابط مناسبة للتحقق من خصوصية الجسم المضاد، مثل المستخلصات غير المعالجة مقابل المعالجة بالفوسفاتاز، أو المستخلصات من خلايا ذات نشاط mTORC1 معدل (مثلاً تجويع المصلى/تحفيز الأنسولين).
• لم يتم وصف أداء الجسم المضاد في تطبيقات أخرى (مثل IHC، IF، IP)؛ يوصى بإجراء اختبارات مبدئية إذا تم استخدامه خارج WB.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تتخصص CamelBio في تمكين مصنعي التشخيصات والمؤسسات البحثية بمحفظة شاملة من المواد الخام لـ IVD. يدعم هذا الجسم المضاد المضاد للفوسفو-eIF4EBP1 الأبحاث في التحكم الترجمي وإشارات mTOR، وهي مجالات حاسمة لتشخيصات الأورام والأمراض الأيضية. كشريك توريد متكامل، تقدم CamelBio أزواجاً من الأجسام المضادة تم التحقق منها، وأجساماً مضادة أحادية/متعددة المستنسخات محسنة، ومواد مساعدة بالجملة، ووصولاً مرناً للمواد الخام للأهداف النادرة—مما يبسط سير العمل الخاص بك من المفهوم إلى العيادة.