جسم مضاد وحيد النسيلة أرنبي للفوسفو-eIF4EBP1 (S65) للتطبيق في النشاف الغربي (WB) واختبار الإليزا - Q13541

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة بروتين eIF4EBP1 وتوطينه

• بروتين eIF4EBP1 (بروتين ربط عامل بدء الترجمة حقيقية النواة 4E رقم 1)، المعروف أيضاً باسم PHAS-I، يعمل كمثبط رئيسي لبدء الترجمة المعتمدة على القبعة من خلال الارتباط بعامل بدء الترجمة حقيقية النواة 4E (eIF4E).
• في حالته قليلة الفسفرة، يتنافس بروتين eIF4EBP1 مع eIF4G (eIF4G1 و eIF4G3) على الارتباط بـ eIF4E، وبالتالي يمنع تجميع مركب eIF4F ويثبط بدء الترجمة.
• تؤدي الفسفرة الزائدة لبروتين eIF4EBP1، التي يتم التوسط فيها غالباً عن طريق مسار mTORC1، إلى انفصاله عن eIF4E، مما يسمح بتكوين مركب eIF4F وتنشيط الترجمة.
• يدمج بروتين eIF4EBP1 الإشارات القادمة من الهرمونات وعوامل النمو والمغذيات عبر مسارات الإشارات MAP kinase و mTOR للتحكم في تخليق البروتين ونمو الخلية.
• إنه بروتين فسفري يحتوي على مواقع فسفرة متعددة، بما في ذلك السيرين 65، التي تعدل تقاربه إلى eIF4E وقدرته على تنظيم الترجمة.
• على المستوى تحت الخلوي، يتواجد بروتين eIF4EBP1 في كل من السيتوبلازم والنواة، وهو ما يتوافق مع أدواره في التحكم في الترجمة وربما في النقل بين النواة والسيتوبلازم.
• يخضع البروتين لتعديلات ما بعد الترجمة عن طريق الأستلة والاقتران بالبروتينات الشبيهة باليوبيكويتين (Ubl) بالإضافة إلى الفسفرة، مما يسلط الضوء على آليات تنظيمية معقدة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• نظرًا لأن هذا الجسم المضاد يستهدف موقعاً فسفرياً محدداً (السيرين 65)، قم بتأكيد خصوصية الكشف عن طريق معالجة محلل الخلايا بـ لامدا فوسفاتيز أو عن طريق مقارنة الإشارات بين النمط البري والطفرات الناقصة للفسفرة.
• بالنسبة للنشاف الغربي، استخدم الإجراءات القياسية ولكن تأكد من أن محاليل التحلل تحتوي على مثبطات الفوسفاتيز للحفاظ على حالات الفسفرة. قد يساعد استخدام عامل حظر مثل الألبومين المصل البقري (BSA) في تقليل الارتباط غير النوعي الشائع للأجسام المضادة النوعية للفسفرة.
• في اختبار الإليزا، فكر في الطلاء بالببتيد المستضد المناعي كمراقب إيجابي وقم بتضمين ببتيد غير مفسفر للتحقق من الخصوصية للفسفرة.
• تنشيط mTORC1 (مثل عن طريق التحفيز بالأنسولين أو المصل) يزيد من فسفرة السيرين 65، بينما تثبيطه (مثل عن طريق الراباميسين) يقلل منها؛ قم بتضمين ضوابط تحفيز أو تثبيط مناسبة في تجاربك.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص وفرق البحث مجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، بما في ذلك أزواج الأجسام المضادة المثبتة، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة. بالنسبة للمشاريع التي تستهدف eIF4EBP1 وتنظيم الترجمة، نقدم أدوات كشف نوعية للفسفرة ويمكننا توفير مواد خام نادرة أو مخصصة لتلبية احتياجات التطوير الخاصة بك. شارك معنا لجسر الفجوة بين المفهوم والمرحلة السريرية باستخدام كواشف موثوقة وعالية الجودة.