Phospho-AKT1-T450 + AKT2-T451 + AKT3-T447 Rabbit mAb للـ WB، IHC-P، ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين عائلة AKT

• تتألف عائلة AKT من ثلاثة كينازات بروتينية سيرين/ثريونين وثيقة الصلة: AKT1 (PKB alpha، P31749)، وAKT2 (PKB beta، P31751)، وAKT3 (PKB gamma، Q9Y243)، والمشفرة بواسطة الجينات AKT1، وAKT2، وAKT3 على التوالي. تشترك في تشابه عالٍ في التسلسل وأدوار بيولوجية متداخلة ولكن مميزة.
• تنظم كينازات AKT عمليات خلوية متنوعة بما في ذلك التمثيل الغذائي، والتكاثر، وبقاء الخلية، والنمو، وتكوين الأوعية الدموية من خلال فسفرة مجموعة واسعة من الركائز اللاحقة (أكثر من 100 تم الإبلاغ عنها).
  مراجع ذات صلة: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• عند التنشيط بواسطة عوامل النمو وإشارات PI3K، يتوسط AKT امتصاص الجلوكوز الناتج عن الأنسولين عبر نقل SLC2A4/GLUT4، ويعزز تخليق الجليكوجين عن طريق تثبيط GSK3، ويحفز تخليق البروتين من خلال تنشيط مسار mTORC1.
  مراجع ذات صلة: PMID:11994271, PMID:12150915, PMID:12172553
• يعزز AKT بقاء الخلية عن طريق فسفرة وتعطيل العوامل المؤيدة لموت الخلايا المبرمج مثل MAP3K5/ASK1 وBAD، وعن طريق تنشيط عوامل النسخ مثل CREB1 التي تدفع التعبير الجيني المضاد لموت الخلايا المبرمج.
  مراجع ذات صلة: PMID:11154276, PMID:9829964, PMID:10926925
• يشمل التوطين تحت الخلوي السيتوبلازم، والنواة، وغشاء الخلية، والحيز بين الغشاء الميتوكوندري، مما يعكس أدواره الإشاراتية الواسعة في الاستجابات الخلوية المقسمة.
• التعديلات ما بعد الترجمة، وخاصة الفسفرة، حاسمة لنشاط AKT؛ حيث أن بقايا رئيسيتان (Thr-308 وSer-473 في AKT1) أساسيتان للتنشيط الكامل، بينما قد تؤثر الفسفرة في النمط الدوراني (Thr-450 في AKT1، المكافئ لـ Thr-451 في AKT2 وThr-447 في AKT3) على استقرار الكيناز وتفاعلات البروتين.
• يتم التعبير عن AKT1 على نطاق واسع، ويرتبط التعبير المتغير والفسفرة بحالات مرضية بما في ذلك السرطان؛ غالبًا ما تُلاحظ مستويات مرتفعة من الفوسفو-AKT في سرطانات الثدي والبروستاتا.
• الكلمات الرئيسية المرتبطة بـ AKT1 (UniProt P31749) تشمل موت الخلايا المبرمج، واستقلاب الكربوهيدرات، وغشاء الخلية، والسيتوبلازم، والكيناز، والنواة، والبروتين الفسفوري، والجين الأولي للسرطان، وكيناز البروتين سيرين/ثريونين، وتنظيم الترجمة.

إرشادات ونصائح تقنية للتجارب

• المستضد المناعي هو ببتيد مُفسفر اصطناعي يغطي منطقة Thr-450 من AKT1 البشري؛ من المتوقع أن يتعرف الجسم المضاد على AKT1، وAKT2، وAKT3 عند فسفرتها في المواقع المكافئة على التوالي (T450/T451/T447).
• لعمل البقع الغربية، قم بإعداد المحاليل الخلوية بمثبطات الفوسفاتاز للحفاظ على الفسفرة؛ النطاقات المتوقعة حول 48-55 كيلو دالتون اعتمادًا على النظير. قم بتضمين ضوابط إيجابية مناسبة (مثل الخلايا المحفزة بعامل النمو) وضوابط سلبية (عينات غير معالجة أو معالجة بالفوسفاتاز).
• فكر في استخدام عينات معالجة بالفوسفاتاز أو تحكم بحجب الببتيد غير الفسفوري لتأكيد خصوصية الفسفرة للإشارة.
• في الكيمياء الهيستولوجية المناعية (IHC-P)، قم بتحسين ظروف استرجاع المستضد وتضمين ضوابط أنسجة إيجابية/سلبية للتحقق من صبغ التلوين؛ قد تكون إشارات خصوصية الفسفرة حساسة للتثبيت والمعالجة.
• لـ ELISA، قم بإقرانها بكواشف الالتقاط/الكشف المناسبة وتحقق من صحة الاختبار باستخدام تركيزات معروفة من الببتيد المُفسفر أو المحاليل الخلوية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص ومعاهد البحث وصولاً شاملاً إلى المواد الخام للفحوصات التشخيصية المعتمدة، بما في ذلك هذا الجسم المضاد للفوسفو-AKT لأبحاث نقل الإشارة. كشريك مخصص من شركة إلى شركة، نورد أجسامًا مضادة أحادية/متعددة النسيلة محسنة، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة، وندعم توريد الأهداف النادرة لتسريع تطوير فحوصاتكم من المفهوم إلى العيادة.