فوسفو-AKT1-T308+AKT2-T309+AKT3-T305 أضداد أرنب متعددة النسيلة - P31749 / P31751 / Q9Y243

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين AKT1 (كيناز السيرين/ثريونين-بروتين RAC-alpha)

• AKT1 (PKBα، RAC-PK-alpha) هو كيناز سيرين/ثريونين يعبر عنه في كل مكان، يشكل مع AKT2 وAKT3 عائلة كيناز AKT المركزية في إشارات PI3K، التي تتحكم في التمثيل الغذائي، التكاثر، البقاء، النمو، وتكوين الأوعية الدموية. مراجع ذات صلة: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• من خلال فسفرة العديد من الركائز، يتوسط AKT1 امتصاص الجلوكوز المحفز بالأنسولين (TBC1D4) وتخليق الجليكوجين (GSK3A/GSK3B). مراجع ذات صلة: PMID:11994271
• يعزز بقاء الخلية عن طريق فسفرة MAP3K5/ASK1 عند السيرين-83، مما يثبط موت الخلية المبرمج، ويقود إشارات mTORC1 عبر فسفرة TSC2 وDEPDC5. مراجع ذات صلة: PMID:11154276 PMID:12150915 PMID:12172553 PMID:31548394 PMID:33594058
• ينظم AKT1 عوامل النسخ FOXO1/3/4 وCREB1، مؤثرًا على التعبير الجيني المؤيد للبقاء والنسخ المعتمد على NF-κB. مراجع ذات صلة: PMID:10358075 PMID:9829964
• داخل الخلية، ينتقل AKT1 بين السيتوبلازم، النواة، غشاء الخلية، والميتوكوندريا، حيث ينظم امتصاص الكالسيوم الميتوكوندري وغيرها من الوظائف الخاصة بالعضيات.
• تحدث فسفرات التنشيط الرئيسية عند ثريونين-308 (أو المكافئ ثريونين-309 في AKT2، ثريونين-305 في AKT3) في حلقة التنشيط والسيرين-473 في النمط الكاره للماء، والتي يتم تحفيزها بواسطة منبهات عوامل النمو.
• غالبًا ما يكون AKT1 مضطربًا في السرطانات (مثل سرطان البروستاتا والثدي) ويعمل كجين أولي للسرطان، حيث ترتبط مستويات الفسفرة المرتفعة بتطور المرض.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• استخدم مثبطات الفوسفاتاز أثناء تحضير العينة للحفاظ على إشارة الفسفرة؛ تحقق من خصوصية الفسفور عن طريق المقارنة مع أضداد AKT الكلية أو عن طريق معالجة الفوسفاتاز.
• المستضد المناعي هو ببتيد فوسفوريلي اصطناعي حول ثريونين-308 من AKT1 البشري؛ من المتوقع أن يكتشف الضد AKT1 وAKT2 وAKT3 المفسفرة في المواقع المكافئة عند اختباره في الأنواع المناسبة.
• في لطخة ويسترن، توقع ظهور نطاقات متعددة تتوافق مع الأشكال المختلفة لـ AKT (~48-55 كيلو دالتون)؛ تأكد من هوية النطاق باستخدام ضوابط نوعية للشكل أو siRNA إذا لزم الأمر.
• في مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)، فكر في إعداد زوج من الأضداد محدد للفسفور/ضد AKT الكلي لتطبيع كمية البروتين المحمل.
• حسن تخفيف الجسم المضاد الأولي لنوع عينتك المحدد؛ تخفيفات البداية المقترحة لـ WB هي عادةً 1:500 إلى 1:2000، ولكن يجب تحديدها عمليًا.

كاميل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر كاميل بيو لمصنعي التشخيص والمختبرات البحثية وصولاً مبسطًا إلى مجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المخبري، بما في ذلك الأضداد المحددة للفسفور والمتحقق منها مثل هذا الضد الأرنبي المتعدد النسيلة ضد AKT1/2/3 الفسفوري في T308/T309/T305. سواء كنت تحتاج إلى كميات كبيرة من الأضداد وحيدة النسيلة أو متعددة النسيلة، أو أزواج أضداد متطابقة، أو كواشف مساعدة لتحليل مسارات إشارات الفسفور، فإن نموذجنا الشامل للتوريد يغطي كل خطوة من المفهوم إلى التطبيق السريري. بالنسبة للأهداف الصعبة في أبحاث إشارات الكيناز أو علم الأورام، يمكن لفريق الخبراء في كاميل بيو توريد أو تطوير مواد خام مخصصة لتلبية متطلبات فحصك المحددة.