جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد لـ CD8a الخاص بالإنسان/القرد، مترافق مع PE/Cyanine7، لقياس التدفق الخلوي - P01732

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة CD8a وتوطينه

• ينتج جين CD8A سلسلة ألفا من بروتين CD8 السكري السطحي للخلية التائية، وهو معامل مساعد حاسم في المناعة التكيفية. يوجد إما على شكل ثنائي غير متجانس ألفا/بيتا مرتبط بروابط ثنائي الكبريتيد، أو على شكل ثنائي متماثل ألفا/ألفا.
• تعمل سلسلة ألفا من CD8 كمعامل مساعد لجزيئات معقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الأولى، حيث تتفاعل في نفس الوقت مع مستقبلات الخلية التائية (TCR) ومعقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الأولى على الخلايا المقدمة للمستضد. يؤدي هذا إلى تجنيد كيناز Src المسمى LCK، مما يحفز مسارات الإشارات اللاحقة التي تؤدي إلى تنشيط الخلايا الليمفاوية التائية السامة للخلايا، وإنتاج السيتوكينات، وقتل الخلايا المستهدفة.
• في الخلايا القاتلة الطبيعية (NK)، توفر ثنائيات CD8A المتماثلة آلية بقاء وتسهل الاقتران مع الخلايا المستهدفة المتعددة وتحللها. كما تعزز بقاء الخلايا الليمفاوية المنشطة وتمايزها إلى خلايا تائية CD8 ذاكرة.
• يتم التوطين تحت الخلوي بشكل أساسي في غشاء الخلية كبروتين غشائي من النوع الأول ذو عبور واحد. كما يتم إنتاج شكل مفرز قابل للذوبان عن طريق التضفير البديل.
• خصوصية النسيج: في الخلايا التائية المشتقة من الغدة الصعترية، يتكون CD8 عادةً من ثنائي غير متجانس ألفا/بيتا. توجد ثنائيات CD8A المتماثلة في مجموعات فرعية من الخلايا القاتلة الطبيعية، وخلايا تائية ذاكرة، والخلايا الليمفاوية داخل الظهارة، والخلايا الوحيدة، والخلايا التغصنية. يتم تنظيم التعبير عنه في الخلايا التغصنية البلازمية الشكل عند التحفيز الفيروسي.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة عملية الارتباط بالسكريات، والتي تفسر الوزن الجزيئي المرصود الأعلى من المتوقع (غير المعدل ~26 كيلو دالتون؛ الأشكال الناضجة عند 21 و 25 و 30 كيلو دالتون)، وعملية النخزين (Palmitoylation)، والتي ترسو البروتين في مناطق الدهون الرافعية (Lipid rafts).

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي المستخدم لتوليد هذا الجسم المضاد هو بروتين مؤتلف يتوافق مع الأحماض الأمينية 22-182، والذي يشمل المجال خارج الخلوي لـ CD8A. هذه المنطقة حاسمة للتفاعل مع معقد التوافق النسيجي الكبير من الفئة الأولى وهي معرضة على سطح الخلية، مما يجعلها هدفًا مثاليًا لتطبيقات قياس التدفق الخلوي.
• لقياس التدفق الخلوي (FC)، قم بمعايرة الجسم المضاد لتحديد التركيز الأمثل لعينتك المحددة. قم بتضمين أجسام مضادة تحكم متساوية النظير مناسبة مترافقة مع نفس الصبغة الفلورية (PE/Cyanine7) لتقييم الارتباط غير النوعي.
• نظرًا لأن PE/Cyanine7 هو صبغة تانديم، تجنب التعرض الطويل للضوء والمواد المثبتة التي قد تسبب تدهور الصبغة. ضع في اعتبارك استخدام عينة تحكم للتعويض عند إجراء لوحات متعددة الألوان لتصحيح التداخل الطيفي.
• تحقق من أداء الجسم المضاد باستخدام مجاميع خلوية إيجابية وسلبية معروفة: على سبيل المثال، الخلايا التائية من الدم المحيطي البشري (CD8+ إيجابية) مقابل الخلايا البائية (سلبية) أو خطوط خلوية مناسبة.
• إذا كنت تكتشف CD8A داخل الخلايا (على سبيل المثال، في الخلايا التائية المنشطة أو المقيمة في الأنسجة)، قم بتحسين ظروف التثبيت والتنفيد التي تحفظ الحاتمة والصبغة الفلورية.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

كشريك مخصص لمواد التشخيص المخبري الأولية، تقدم CamelBio لمعامل البحث والتشخيص وصولاً سلسًا إلى الكواشف الحرجة مثل هذا الجسم المضاد أحادي النسيلة المضاد لـ CD8a لبيولوجيا الخلايا التائية وتوصيف المناعة. نقدم أزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، وأجسام مضادة أحادية ومتعددة النسيلة محسنة، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة، ودعمًا متخصصًا لتوريد المواد الأولية ذات الأهداف النادرة - لتغطية سير عملك بالكامل من المفهوم إلى العيادة من خلال نقطة اتصال واحدة.