PE أرنب وحيد النسيلة مضاد للإنسان/الفأر Phospho-Zap70-Y319+Syk-Y352 لقياس التدفق الخلوي الداخلي - P43403

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة ZAP70 وتوطينه

• ZAP70 هو كيناز تيروسين وزنه 70 كيلو دالتون ضروري للمناعة التكيفية، ويلعب دورًا مركزيًا في إشارات مستقبل الخلايا التائية (TCR) من خلال فسفرة بروتينات المحول LAT و LCP2 عند التنشيط.
• بعد تفاعل TCR، يتم تجنيد ZAP70 إلى مواقع ITAM الفسفورية لـ CD3E و CD247/CD3Z في الغشاء البلازمي، وهي عملية تخفف من تثبيطه الذاتي وتتطلب فسفرة بوساطة LCK (PubMed:7509083).
  المراجع ذات الصلة: PMID:7509083
• ينظم ZAP70 ديناميكيات تنشيط الخلايا التائية بشكل أكبر من خلال التحكم في إعادة تنظيم الهيكل الخلوي، والالتصاق، والحركة، مما يضمن التوصيل الفعال المناسب للخلايا المقدمة للمستضد.
• كما يشارك في تقليل تنظيم TCR من خلال التوسط في الإدخال الخلوي والتدهور لـ CD247/CD3Z عبر التفاعل مع ليغاز اليوبيكويتين CBL والمحولات SLA/SLA2، وبالتالي تعديل إنهاء الإشارة.
• يُعبر عن ZAP70 في الخلايا التائية، والخلايا القاتلة الطبيعية، والخلايا الصعترية المبكرة، والخلايا البائية الأولية/قبل الأولية، ويساهم في تطور وتنشيط كل من الخلايا التائية والخلايا البائية.
• يحتوي البروتين على مجالين SH2 يرتبطان بشكل خاص بـ ITAMs الفسفورية، ومجال كيناز رابط ATP، ويخضع لتعديلات ما بعد الترجمة تشمل الفسفرة، والأسيتيلة، ويوبيكويتين، كما هو موضح بواسطة كلمات UniProt مثل "Phosphoprotein" و "Ubl conjugation" و "Isopeptide bond" و "Acetylation".
• ينتج التوصيل البديل أشكالاً متعددة من نظائر ZAP70، وترتبط المتغيرات المرتبطة بالمرض بنقص المناعة المشترك الشديد (SCID) بسبب ضعف إشارات TCR.
• موقع المستضد (Y319) هو موقع فسفرة تنظيمي رئيسي في المنطقة البينية B، محفوظ بشكل كبير بين الإنسان والفأر، وفسفرته حاسمة لتنشيط ZAP70؛ وقد يتفاعل الجسم المضاد بشكل متقاطع مع Syk في موضع Y352 المشابه له بسبب التماثل التسلسلي في حلقة التنشيط.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• بسبب الطبيعة الخاصة بالفسفرة لهذا الجسم المضاد، قم بتضمين مثبطات الفوسفاتاز في جميع محاليل التحلل، والتثبيت، والصباغة للحفاظ على مستويات الفسفرة أثناء معالجة العينة.
• تحقق من خصوصية الجسم المضاد عن طريق مقارنة الإشارات في الخلايا المحفزة مقابل غير المحفزة، أو عن طريق معالجة العينات بفوسفاتاز لامدا قبل الصباغة.
• تم التحقق من صحة الجسم المضاد لقياس التدفق الخلوي الداخلي (FC intra)؛ تأكد من بروتوكولات التثبيت والنفاذية المحسنة (مثل استخدام نفاذية قائمة على الميثانول أو السابونين) للحصول على أفضل النتائج.
• لدراسات إشارات الخلايا التائية، فكر في استخدام ضوابط إيجابية معروفة مثل خلايا Jurkat المحفزة بمضاد CD3/CD28 أو خلايا PBMC البشرية الأولية، وضوابط سلبية مثل الخلايا التائية الساكنة أو الخلايا البائية الناقصة Syk إذا كنت تقيم التفاعل المتقاطع.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تخدم CamelBio كجسرك الشامل المتكامل لتوريد المواد الخام لـ IVD، وتغطي كل خطوة من المفهوم إلى العيادة. لأبحاث إشارات كيناز ZAP70 و Syk، نحن نقدم محفظة شاملة من الأجسام المضادة الخاصة بالفسفرة والبروتين الكلي التي تم التحقق منها، ومستضدات إعادة التركيب، ومواد كيميائية مساعدة بالجملة، والوصول إلى مواد خام لأهداف نادرة. شارك معنا لتبسيط تطوير التشخيص الخاص بك باستخدام مكونات المقايسات المناعية عالية الجودة وموثوقة والدعم التقني.