PAK1 الأجسام المضادة وحيدة النسيلة الأرنبية لـ WB، IF/ICC، ELISA - Q13153

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة PAK1 وموقعه الخلوي

• يتم ترميزه بواسطة الجين PAK1، PAK1 (كيناز 1 المنشط بـ p21) هو كيناز سيرين/ثريونين بروتيني يُعرف أيضًا باسم alpha-PAK و p65-PAK و PAKalpha. ينتمي إلى عائلة كينازات PAK التي تعمل كمنفذات للبروتينات الصغيرة GTPases CDC42 و RAC1.
• يعمل PAK1 كعقدة إشارات حرجة أسفل الإنتغرينات والكينازات المستقبلية للحمض الأميني، وينظم عمليات خلوية متنوعة تشمل ديناميكيات الهيكل الخلوي، الالتصاق الخلوي، الهجرة، التكاثر، الموت المبرمج، الانقسام الخلوي، والنقل المنظم بالحويصلات (PubMed:10551809، PubMed:11896197، PubMed:12876277). المراجع ذات الصلة: PMID:10551809 PMID:11896197 PMID:12876277
• عند التنشيط بواسطة CDC42 المرتبط بـ GTP و RAC1، يربط PAK1 بروتينات GTPase من عائلة Rho بمسار كيناز JNK MAP ويفسفرة الأهداف النهائية مثل MAP2K1 و RAF1 و LIMK1، مما يؤثر على التعبير الجيني وإعادة تشكيل الأكتين (PubMed:8805275، PubMed:9528787، PubMed:11733498، PubMed:23633677). المراجع ذات الصلة: PMID:8805275 PMID:9528787 PMID:11733498 PMID:23633677
• يتمركز PAK1 في عدة أجزاء خلوية فرعية تشمل السيتوبلازم، الالتصاقات البؤرية، اللاميليبوديا، التجاعيد الغشائية، الغزوات الخلوية، البلازما النووية، والمراكز الجسمية، وهو ما يتوافق مع أدواره المتعددة في حركة الخلايا، الالتصاق، والإشارات النووية.
• يلعب الكيناز دورًا في إعادة تنظيم الهيكل الخلوي الأكتيني ومجمعات الالتصاق البؤري، حيث يفسفرة مباشرة المنظمين مثل سلسلة الميوسين الخفيفة وكوفيلين لتعديل انقباض الأكتوميوسين وشكل الخلية (PubMed:9032240، PubMed:9395435). المراجع ذات الصلة: PMID:9032240 PMID:9395435
• في الخلايا العصبية، يعتبر PAK1 أساسيًا لتكوين العمود الشجري، نمو المشابك العصبية المنبهة، والنقل المثبط GABAergic، جزئيًا من خلال تثبيت الأكتين الليفي وفسفرة السلسلة الخفيفة المنظمة للميوسين II.
• تم ربط PAK1 بالسرطان: يتم فرط التعبير عنه في خلايا وأنسجة سرطان المعدة (PubMed:25766321)، ويعزز هجرة الخلايا وغزوها، ويفسفرة الركائز المشاركة في إعادة تشكيل الكروماتين (MORC2، PubMed:23260667) والانتقال الظهاري إلى الوسيطي (SNAI1، PubMed:15833848). المراجع ذات الصلة: PMID:25766321 PMID:23260667 PMID:15833848
• بالإضافة إلى ذلك، يشارك PAK1 في إفراز الأنسولين (PubMed:22669945)، الاستجابة لتلف الحمض النووي، وديناميكيات الحبيبات الإجهادية (PubMed:20417602). المراجع ذات الصلة: PMID:22669945 PMID:20417602

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد اصطناعي يغطي الأحماض الأمينية 1-100 من PAK1 البشري، وهو ما يتوافق مع منطقة الطرف N. من المرجح أن تكون هذه المنطقة محفوظة لدى الإنسان والفأر والجرذ، وهو ما يتوافق مع التفاعل المتبادل المبلغ عنه.
• في النقل الغربي (WB)، الوزن الجزيئي المتوقع لـ PAK1 يبلغ حوالي 61 كيلو دالتون؛ ومع ذلك، قد تؤدي التعديلات بعد الترجمة أو المتغيرات المقسمة إلى ظهور نطاقات إضافية. استخدم ظروف اختزال مناسبة وقم بالتحقق باستخدام ضوابط إيجابية معروفة (مثل محلل خلايا HeLa أو MCF-7).
• في التألق المناعي (IF/ICC)، يُظهر PAK1 توزيعًا فرعيًا خلويًا ديناميكيًا، حيث يظهر في الالتصاقات البؤرية والتجاعيد الغشائية والنواة حسب نوع الخلية والتحفيز. قد يكون التثبيت بالبارافورمالدهيد والنفاذ بالتريتون X-100 أو الميثانول مناسبًا، ولكن يُنصح بالتحسين وفقًا لخط الخلية والظروف الخاصة بك.
• بالنسبة لـ ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد في التنسيقات المباشرة أو غير المباشرة. فكر في استخدام ببتيد المستضد المناعي كضابط إيجابي لتحديد حساسية الفحص ونوعيته.
• لم يتم اختبار هذا الجسم المضاد في تطبيقات أخرى؛ إذا تم استخدامه لـ IP أو ChIP أو الحظر الوظيفي، يُنصح بإجراء تحقق شامل في نظام العينات ذي الصلة.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المواد

تدعم CamelBio مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث ومطوري التشخيص في المختبر (IVD) بحلول شاملة للمواد الخام – بدءًا من أزواج الأجسام المضادة المُتحقق من صلاحيتها والأجسام المضادة وحيدة/متعددة النسيلة المحسنة إلى الكواشف المساعدة بكميات كبيرة. سواء كان عملك يركز على إشارات PAK1 في السرطان أو علم الأعصاب أو المسارات الأيضية، فإن منصتنا الشامل تبسط عملية الشراء وتسرع جداول المشاريع. لتطوير أجسام مضادة مخصصة أو إنتاج بروتينات مؤتلفة أو الحصول على أهداف نادرة، فإن فريق CamelBio جاهز للمساعدة بخيارات إمداد مرنة مصممة خصيصًا لاحتياجاتك السريرية أو احتياجات البحث والتطوير.