جسم مضاد متعدد النسائل من الأرنب ضد NLRP3 للاستخدام في WB وIF/ICC وELISA - Q8R4B8

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة NLRP3 وتوطينه

• يُعد NLRP3 (البروتين 3 المحتوي على نطاقات NACHT وLRR وPYD، والمعروف أيضًا باسم cryopyrin) مستشعرًا داخل الخلية يشكل المكوّن الأساسي للالتهاب الجسيمي NLRP3، الذي يتوسط التنشيط استجابةً لعيوب سلامة الغشاء، مما يؤدي إلى إفراز IL1B وIL18 وحدوث الموت الخلوي الالتهابي المبرمج. المراجع ذات الصلة: PMID:19362020، PMID:23582325، PMID:26642356

• يبدأ NLRP3 تكوين معقد التهابي جسيمي متعدد الوحدات مع CASP1 وPYCARD/ASC، مما ينشط كاسباز-1 لشطر pro-IL1B وpro-IL18 وgasdermin-D (GSDMD)، وينتج عن ذلك إطلاق السيتوكينات وموت الخلايا الالتهابي المبرمج. المراجع ذات الصلة: PMID:16407889، PMID:18403674، PMID:19362020، PMID:16546100، PMID:17008311، PMID:26642356

• تحفز مجموعة متنوعة من المنبهات المرتبطة بالعوامل الممرضة أو الضرر، بما في ذلك ATP خارج الخلية والنيجيريسين والبلورات (اليورات والكوليسترول) وأميلويد-بيتا والجسيمات (الأسبستوس والسيليكا)، تنشيط NLRP3، وتتقارب جميعها تقريبًا عند تدفق K+ إلى خارج الخلية. المراجع ذات الصلة: PMID:16407888، PMID:16407889، PMID:16407890، PMID:23809161

• يلزم أيضًا تنشيط الالتهاب الجسيمي NLRP3 لإفراز HMGB1، كما ينظم استجابة التئام الجروح الاستتبابية التي توجه هجرة العدلات إلى المواقع النخرية دون إلحاق الضرر بالأنسجة السليمة. المراجع ذات الصلة: PMID:22801494، PMID:20947763

• عند تنشيطه، يُنقل NLRP3 إلى مركز تنظيم الأنابيب الدقيقة (MTOC)، ثم إلى حويصلات شبكة غولجي العابرة المتناثرة (dTGN)، حيث يرتبط بفوسفاتيديل إينوزيتول 4-فوسفات (PtdIns4P) ويجمع الالتهابات الجسيمية النشطة، وهي عملية يُتيحها NEK7. المراجع ذات الصلة: PMID:26814970، PMID:34615873، PMID:34861190، PMID:30487600

• يُعبَّر عن NLRP3 بمستويات مرتفعة في الكريات البيضاء بالدم المحيطي (الخلايا اللمفاوية Th2 والبلعميات)، وبمستويات منخفضة في بانيات العظم، بما يتوافق مع أدواره المناعية والالتهابية. المراجع ذات الصلة: PMID:15302403، PMID:16546100، PMID:26098997، PMID:28847925، PMID:17907925

• وبصرف النظر عن وظيفته كهيكل للالتهاب الجسيمي، يعمل NLRP3 كمنظّم للنسخ في خلايا Th2، إذ يرتبط بالحمض النووي ويعدّل تعبير IL4 وIL5 وIL13 وغيرها من الجينات المهمة لتمايز خلايا Th2 والالتهاب التحسسي. المراجع ذات الصلة: PMID:26098997

• يمتلك NLRP3 نشاطًا جوهريًا كنازًا للـATP، ويخضع للتنظيم بواسطة تعديلات متنوعة بعد الترجمة، بما في ذلك الفسفرة والبالميتويلة واليوبيكويتنة، التي تتحكم في عتبة تنشيطه وتفاعلاته. المراجع ذات الصلة: PMID:34861190

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يشمل المستضد المناعي الأحماض الأمينية 1–93 من NLRP3 الفأري، وهي منطقة تحتوي على نطاق البيرين (PYD). ينبغي مراعاة أن الجسم المضاد قد يكشف عن البروتين كامل الطول وعن الأجزاء المحتوية على PYD؛ لذا يجب التحقق من النوعية في نظام النموذج المستخدم.
• في لطخة ويسترن، يبلغ الوزن الجزيئي المتوقع نحو 118 كيلو دالتون؛ إلا أن التعديلات بعد الترجمة قد تؤدي إلى ظهور حزم إضافية. استخدم ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل محاليل تحلل البلعميات المحفزة بـLPS+ATP)، واضبط نسب الجل بما يناسب البروتينات ذات الوزن الجزيئي المرتفع.
• في التألق المناعي/الكيمياء الخلوية المناعية (IF/ICC)، قد يظهر NLRP3 كتلوين نقطي أو منتشر تبعًا لحالة التنشيط. ينبغي تحسين ظروف التثبيت والنفاذية للحفاظ على توطينه الطبيعي.
• في تطبيقات ELISA، قد يتطلب تنسيق الساندويتش استخدام جسم مضاد آخر نوعي لـNLRP3؛ وقد تكون الطبيعة متعددة النسائل مفيدة في الالتقاط أو الكشف.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنّعي التشخيص والمختبرات البحثية وصولًا شاملًا إلى مواد خام عالية الجودة للتشخيص المخبري (IVD)، بما في ذلك مجموعة واسعة من الأجسام المضادة والمستضدات والكواشف المساعدة. يدعم هذا الجسم المضاد ضد NLRP3 الدراسات الاستقصائية حول إشارات الالتهاب الجسيمي والالتهاب العقيم وتنظيم المناعة. تعاون مع CamelBio للحصول على توريد موثوق ودعم تقني يساعد على تبسيط تطوير اختبارك من الفكرة إلى العيادة.