جسم مضاد أحادي النسيلة الأرانب متعدد الأنسجة ضد هيستون أحادي الميثيل H4-R3 | P62805 | لـ WB و IHC-P و IF/ICC و ELISA

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H4 وموقعه الخلوي

هيستون H4 هو مكون أساسي للنيوكليوسوم، الذي يلتف حوله حوالي 147 زوج قاعدي من الحمض النووي الجيني. وباعتباره جزءًا من الأوكتامر الهيستوني، يلعب أدوارًا أساسية في تنظيم النسخ المتماثل للحمض النووي والإصلاح واستقرار الكروموسومات. إن التعديل الديناميكي بعد الترجمة للهستونات، الذي يُطلق عليه مجتمعة "الشفرة الهيستونية"، يتحكم في بنية الكروماتين والتعبير الجيني. المراجع ذات الصلة: UniProt P62805

يقع هيستون H4 بشكل أساسي في النواة ويرتبط بالكروموسومات طوال دورة الخلية. وقد لوحظ وجود الهيستون H4 الأسيتيل بشكل خاص في نواة خلايا الحيوانات المنوية في المرحلة 11، مما يشير إلى دوره في ضغط الكروماتين أثناء تكوين الحيوانات المنوية. المراجع ذات الصلة: UniProt P62805

يتعرض الذيل N الطرفي لهيستون H4 لتعديلات مكثفة بعد الترجمة، تشمل الأسيتلة، الميثلة، الفسفرة، تحويل السيترولين، وأنواع مختلفة من عمليات الأسيلة. يعتبر الأرجينين 3 (R3؛ الذي يتوافق مع R4 في البروتين المعالج بعد إزالة الميثيونين البادئ) بقايا أساسية يمكن أن تكون أحادية الميثيل، ثنائية الميثيل غير المتماثلة (بواسطة PRMT1)، ثنائية الميثيل المتماثلة (بواسطة PRMT5/PRMT7)، أو تتحول إلى سيترولين. يتعرف هذا الجسم المضاد تحديدًا على الشكل أحادي الميثيل لهيستون H4 عند الأرجينين 3. المراجع ذات الصلة: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777, PMID:16567635

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تصميم المولد المناعي: تم إنتاج الجسم المضاد ضد ببتيد اصطناعي أحادي الميثيل يتوافق مع الأرجينين 3 لهيستون H4 البشري (NP_003529.1). عند تقييم النوعية، ضع في اعتبارك فحوصات التنافس الببتيدي أو لطخات النقاط باستخدام ببتيدات معدلة بشكل مختلف لتأكيد التعرف الانتقائي لأحادي الميثيل على الأرجينين 3 غير المعدل أو ثنائي الميثيل.
• النقل اللوني الغربي (WB): يبلغ الوزن الجزيئي المتوقع لهيستون H4 حوالي 11 كيلو دالتون؛ يوصى باستخدام هلامات الفصل الكهربائي بالهلام SDS-PAGE عالية النسبة (15% أو متدرجة) للحصول على دقة فصل مثالية. عادة ما تعطي المستخرجات النووية أو الهستونات المستخرجة بالحمض إشارات أقوى. نظرًا للصغر الحجم، تحقق من كفاءة النقل واستخدم أغشية مناسبة (مثل PVDF 0.2 ميكرومتر).
• الكيمياء المناعية النسيجية (IHC-P) والكيمياء المناعية الخلوية/الفحص المناعي بالفلورة (IF/ICC): من المتوقع الحصول على نمط تلطيخ نووي سائد. يجب تحسين استرجاع المستضد (مثل محلول سترات، الرقم الهيدروجيني 6.0) للمقاطع المضمنة بالبارافين، ونفاذية المنظف للخلايا. إن تفاعل الجسم المضاد المتبادل مع أنسجة الفأر والجرذ يجعله مناسبًا لدراسة التعديلات الهيستونية في أنظمة نموذجية متنوعة.
• ELISA: يمكن استخدام الببتيد أحادي الميثيل كمستضد مطلي في ELISA المباشر أو التنافسي لتقدير تقارب ارتباط الجسم المضاد ونوعيته. يجب معايرة عوامل التخفيف بناءً على تنسيق الفحص.
• التفاعل المتبادل بين الأنواع: من المعروف أن الجسم المضاد يتعرف على هيستون H4 لدى الإنسان والفأر والجرذ، ويتوقع تفاعله مع نطاق واسع من الأنواع الأخرى بسبب الحفظ الشديد لتسلسل هيستون H4. بالنسبة للأنواع غير المختبرة، تحقق من تماثل تسلسل الببتيد في منطقة المولد المناعي.
• اعتبارات الأجسام المضادة متعددة الأنسيلة: باعتباره جسم مضاد أرانب متعدد الأنسيلة، قد يحدث تباين بين الدفعات في العيار والخلفية. قم بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة وأعد التحقق من صحة كل دفعة جديدة تحت ظروفك التجريبية.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تعمل CamelBio كجسر شامل ومتكامل للمصادر للمواد الخام للتشخيص خارج الجسم الحي، حيث يربط مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث بالكواشف عالية الجودة والموصوفة بدقة. نحن نقدم جسم مضاد أرانب pAb ضد هيستون أحادي الميثيل H4-R3 إلى جانب محفظة واسعة من أزواج الأجسام المضادة الموثقة، والأجسام المضادة أحادية/متعددة الأنسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمات الحصول على أهداف وراثية لاجينية نادرة حسب الطلب. سواء كنت تقوم بتطوير فحوصات الواسمات الحيوية أو توسيع نطاق الإنتاج، فإن سلسلة الإمداد المتكاملة والاستشارات الخبيرة في CamelBio تدعم كل مرحلة من مراحل الفكرة حتى العيادة.