جسم مضاد وحيد النسيلة أرنبي ضد هيستون H3-K9 أحادي الميثيل (Q16695/P68431) للتطبيقات WB و IHC و ChIP و ELISA

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H3 وموقعه الخلوي

يعتبر هيستون H3 المكون الأساسي للنيوكليوسوم، الوحدة المتكررة الأساسية للكروماتين. تلتف النيوكليوسومات حول الحمض النووي وتكثفه، وبالتالي تنظم إمكانية الوصول إليه في عمليات النسخ والتضاعف والإصلاح. يشترك كل من هيستون H3.1 المعياري المعتمد على التضاعف (UniProt P68431) والنمط البديل الخاص بالخصية H3.1t (UniProt Q16695) في نهايات N طرفية محفوظة للغاية، تحدث فيها التعديلات التنظيمية الرئيسية.

تخضع النهاية N الطرفية لهيستون H3 لمجموعة متنوعة من التعديلات ما بعد الترجمة (PTMs)، تشمل المثيلة والأسيتلة والفسفرة والسيترولينة وغيرها. تشكل هذه التعديلات "شفرة الهيستون"، التي تحكم بنية الكروماتين وتعبير الجينات. تعتبر مثيلة ليسين 9 (K9؛ تقابل الموضع 10 في السلائف الكاملة) علامة وراثية لاجينية حرجة. يرتبط شكل H3K9 أحادي الميثيل (H3K9me1) بإسكات النسخ وتكوين الكروماتين المغاير، ويمكن أن يكون ركيزة للمزيد من المثيلة بواسطة الميثيل ترانسفيرازات المحددة.

تم إنتاج هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة الأرنبي ضد ببتيد اصطناعي أحادي الميثيل حول الموقع K9 لهيستون H3.1 البشري (P68431)، مما يتيح الكشف المحدد عن H3K9me1. لا يتعرف على الأشكال غير الميثيلة أو المختلفة في المثيلة (مثل H3K9me2/me3)، كما تم التأكيد عليه من خلال تصميم المستضد المناعي.

الموقع تحت الخلوي: يوجد هيستون H3 بشكل أساسي في النوى ويرتبط بالكروموسومات. خصوصية الأنسجة: يتم التعبير عن أنماط H3.1 المعيارية في معظم الخلايا المنقسمة، بينما يتم التعبير عن النمط البديل H3.1t (Q16695) بشكل خاص في خلايا الخصية.

المراجع ذات الصلة: PMID:11242053; PMID:16267050; PMID:17194708.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد اصطناعي أحادي الميثيل حول الموقع K9؛ يجب التحقق من خصوصية الجسم المضاد لـ H3K9me1 باستخدام فحوصات التنافس الببتيدي مع ببتيدات K9 غير المعدلة وأحادية وثنائية وثلاثية الميثيل كضوابط سلبية وإيجابية.
• في لطخة ويسترن (WB) واللطخة النقطية (DB)، يتوقع ظهور نطاق/بقعة عند كتلة 16 كيلو دالتون تقريبًا. تأكد من استخراج الهيستون بشكل صحيح وتوحيد التحميل باستخدام جسم مضاد لهيستون H3 الكلي.
• بالنسبة للكيمياء المناعية المناعية (IHC-P) والمناعة الفلورية (IF/ICC)، قم بتحسين ظروف استرجاع المستضد والحظر لكل نوع من الأنسجة/الخلايا للحصول على تلطيخ نووي محدد.
• يمكن استخدام ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP) بهذا الجسم المضاد لرسم التوزيع الجينومي لـ H3K9me1؛ تتطلب عملية الربط المتقاطع وكمية الجسم المضاد تحسينًا تجريبيًا. ضع في اعتبارك إجراء ChIP تسلسلي لتأكيد خصوصية المثيلة الأحادية.
• من المتوقع أن يتفاعل الجسم المضاد تفاعلًا متقاطعًا مع نطاق واسع من الأنواع بسبب الحفظ العالي لتسلسل النهاية N الطرفية لـ H3؛ يوصى بالتحقق من الصلاحية في نظام العينة ذي الصلة (مثل الفأر والجرذ).
• في ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد ككاشف التقاط أو الكشف لتقدير كمية H3K9me1 في الهيستونات المستخرجة أو النيوكليوسومات.

CamelBio: جسرك الشامل الواحد للتوريد

تمكّن CamelBio مصنعي التشخيص والمختبرات ومعاهد البحث من خلال وصول سلس وشامل إلى المواد الخام التشخيصية عالية الجودة والخدمات التقنية — بدءًا من الفكرة الأولية وحتى التطبيق السريري. يدعم هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة الأرنبي ضد هيستون H3-K9 أحادي الميثيل أبحاث علم الوراثة اللاجينية وتطوير الفحوصات. بالإضافة إلى هذا المنتج، تقدم CamelBio أزواج أجسام مضادة تم التحقق من صلاحيتها، وأجسام مضادة متعددة النسيلة وحيدة النسيلة محسنة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة، وخدمات توريد متخصصة للأهداف الوراثية اللاجينية النادرة. اشترك مع CamelBio لتبسيط سلسلة التوريد وتسريع مشاريعك التشخيصية.