جسم مضاد وحيد النسيلة أرنبي ضد هيستون H3-K18 أحادي الميثيل (Q16695/P68431) لتفاعل ChIP وCUT&Tag | دابلة ويسترن، النمط النسيجي المناعي بالبارافين، التألق المناعي، المقايسة الإنزيمية المناعية

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة هيستون H3 وموقعه الخلوي

الهيستونات هي المكونات البروتينية الرئيسية للكروماتين، وتعمل كبكرات تلتف حولها الحمض النووي. يشكل هيستون H3 مع H2A و H2B و H4 لب النيوكليوسوم. تعمل هذه النيوكليوسومات على ضغط الحمض النووي وتنظيم إمكانية الوصول إليه للنسخ الجيني والاستنساخ والإصلاح والحفاظ على استقرار الكروموسومات. يتعرض الذيل النهائي N لهيستون H3 للعديد من التعديلات ما بعد الترجمة (PTMs)، بما في ذلك الميثلة والأسيتلة والفسفرة وغيرها، والتي تشكل مجتمعة "رمز الهيستون" وتنسق ديناميكيات الكروماتين والتعبير الجيني.

يعتبر اللايسين 18 (K18) في هيستون H3 (الموافق للموقع 19 في السلائف) بقايا أساسية يمكن أن تخضع لأحادية الميثلة. هذا التعديل، جنباً إلى جنب مع التعديلات الأخرى ما بعد الترجمة في هذا الموقع، يؤثر على ارتباط البروتينات المنفذة وينظم بنية الكروماتين. في حين ترتبط أسيتلة K18 غالباً بتنشيط النسخ الجيني، يمكن أن يكون لحالات الميثلة تأثيرات تعتمد على السياق. تم ربط أحادية الميثلة لـ H3K18 بتنظيم التعبير الجيني والحفاظ على وظيفة الكروماتين السليمة.

المراجع ذات الصلة: PMID:16267050, PMID:16627869, PMID:17194708.

تمثل مدخلات SWISS Q16695 (Histone H3.1t) و P68431 (Histone H3.1) نوعين مختلفين من متغيرات هيستون H3 البشري. يتم التعبير عن Q16695 بشكل أساسي في خلايا الخصية، حيث يحل محل H3.1 المعياري أثناء تكوين الحيوانات المنوية. P68431 هو هيستون يعتمد على الاستنساخ يتم التعبير عنه في الخلايا الجسدية وينتشر على نطاق واسع. كلا النوعين يقعان في النواة والكروموسومات.

المراجع ذات الصلة: UniProt Q16695, UniProt P68431.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تم إنتاج الجسم المضاد باستخدام ببتيد اصطناعي أحادي الميثيل حول موقع K18. لضمان الخصوصية للشكل أحادي الميثيل، يُنصح بإجراء فحص منافسة الببتيد باستخدام الببتيدات غير المعدلة أو المثنوية/ثلاثية الميثيل المقابلة أثناء التحقق الأولي من الصلاحية.
• بالنسبة لدابلة ويسترن (WB)، يوصى باستخدام مستخلصات الهيستون من خلايا الإنسان أو الفأر أو الجرذ كمادة بدائية. من المتوقع ظهور نطاق محدد بحوالي 15 كيلو دالتون. قم بتشغيل ضوابط مناسبة، بما في ذلك الجسم المضاد H3 الكلي، لتأكيد تحميل متساوٍ.
• في تجارب ترسيب الكروماتين المناعي (ChIP) وتجارب CUT&Tag، يعتبر معايرة الجسم المضاد أمراً حاسماً. ينصح بإدراج مناطق جينومية ضابطة إيجابية معروف أنها تحتوي على أحادية الميثلة H3K18 (إذا كانت متاحة) ومواضع ضابطة سلبية. قد تؤثر ظروف الارتباط المتقاطع على إمكانية الوصول إلى الحاتمة المستضدية؛ لذا ضع في اعتبارك كل من بروتوكولات ChIP الأصلية والمترابطة المتقاطعة.
• بالنسبة لتطبيقات النمط النسيجي المناعي (IHC-P) والتألق المناعي (IF/ICC)، قد تحتاج ظروف استرجاع المستضد إلى التحسين. يوصى باستخدام عينات الأنسجة أو الخلايا التي توثق مستويات H3K18me1 لتأسيس خصوصية التلوين.
• يمكن استخدام تطبيقات المقايسة الإنزيمية المناعية (ELISA) والنقط الرقائقي (DB) للفحص السريع لعيار الجسم المضاد وخصوصيته ضد الببتيدات المختلفة في حالات الميثلة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل لك

تلتزم CamelBio بدعم مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث والمعاهد من خلال توفير وصول شامل من مكان واحد إلى المواد الخام الأساسية للتشخيص في المختبر (IVD). يمثل هذا الجسم المضاد وحيد النسيلة الأرنبي ضد MonoMethyl-Histone H3-K18 مثالاً على عروضنا في مجال أبحاث علم الوراثة اللاجينية، حيث تعتبر الكواشف الدقيقة والمحددة أساسية. بالإضافة إلى الأجسام المضادة المنفردة، تشمل خبرة CamelBio في التوريد أزواج الأجسام المضادة المُحققة للمناعة الفحوصات المناعية، والأجسام المضادة وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة والمصممة خصيصاً لتطبيقك، والمواد الخام المساعدة بالكميات الكبيرة، والدعم في شراء المواد الخام للأهداف النادرة أو الناشئة. نهدف إلى تبسيط خط أنابيب التطوير الخاص بك من الفكرة إلى العيادة، مما يضمن توريداً فعالاً وموثوقاً.