[تم التحقق بواسطة KO] مضاد متعدد النسائل للأرنب ضد PML لـ WB، IHC-P، ELISA - P29590

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة PML وتوطينه

• يُشفر بجين PML، ويعرف بروتين PML أيضاً باسم E3 SUMO-protein ligase PML، وبروتين سرطان الدم النخاعي المعتل (Promyelocytic leukemia protein)، وبروتين الإصبع الحلقي 71 (RING finger protein 71)، وبروتين يحتوي على ثلاثة أجزاء من الموتيف 19 (TRIM19). ينتمي إلى عائلة TRIM ويحتوي على نطاق إصبع حلقي (RING finger domain)، وصندوق B، ومنطقة ملتفة-ملتفة (coiled-coil region)، ونطاق C-terminal يخضع للتوصيل البديل، مما يولد أشكالاً متسلسلة (isoforms) متعددة بوظائف مميزة.
• يعمل كبروتين السقالة الأساسي لأجسام PML النووية (PML-NBs)، وهي بنى نووية فرعية ديناميكية تنظم قمع الأورام، والتحكم في النسخ، وموت الخلايا المبرمج، والشيخوخة، واستجابات تلف الحمض النووي، والدفاع المضاد للفيروسات من خلال تجنيد وتعديل العديد من بروتينات الشركاء عبر تفاعلات تتوسطها SUMO.
• يثبط تصدير mRNA النووي الذي يتوسطه EIF4E عن طريق تقليل ارتباط EIF4E بغطاء m7G 5' لـ mRNA المستهدف، وبالتالي التحكم في التعبير الجيني على المستوى ما بعد النسخ. المراجع ذات الصلة: PMID:11500381 PMID:11575918 PMID:18391071
• يعمل كإنزيم ربط E3 لبروتين SUMO يحفز اقتران SUMO ببروتينات الركيزة، بما في ذلك البروتينات الفيروسية المبكرة الفورية، ويظهر نشاط sumoylation قوي يعتمد على الأشكال المتسلسلة (خاصة PML-3 و PML-6). المراجع ذات الصلة: PMID:20972456 PMID:28250117
• تظهر أشكال متسلسلة متعددة (PML-1 إلى PML-14) توطينات خلوية فرعية مميزة: الأشكال النووية (مثل PML-4) تتوطن في PML-NBs والسيتوبلازم النووي، بينما ترتبط الأشكال السيتوبلازمية (مثل PML-14) بالشبكة الإندوبلازمية وأغشية الإندوسوم المبكر، مما يتيح إشارات تعتمد على السياق في مسار TGF-beta والمسارات الأخرى.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الرئيسية SUMOylation (ضرورية لتشكيل PML-NB)، والفسفرة، والأسيتلة، التي تعدل استقراره، وتفاعلاته، ووظائفه القامعة للأورام.
• يظهر نشاطاً مضاداً للفيروسات واسعاً ضد كل من فيروسات الحمض النووي والحمض النووي الريبي (مثل فيروسات الهربس، والكلب، والإنفلونزا، والتهاب الكبد C) من خلال آليات خاصة بالأشكال المتسلسلة مثل احتجاز القفيصة الفيروسية، وتثبيط تخليق mRNA/البروتين الفيروسي، وإحداث موت الخلايا المبرمج في الخلايا المصابة.
• يلعب دوراً محورياً في شيخوخة الخلايا وموت الخلايا المبرمج من خلال التنظيم الإيجابي لاستقرار ونشاط p53/TP53، وقمع نسخ TBX2 عبر معقد RBL2/E2F4، مما يربط PML بتوقف النمو الدائم.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد مع الأحماض الأمينية 300-600 من PML البشري (الشكل المتسلسل 1)، وهي منطقة مركزية من المتوقع أن تكتشف أشكالاً متسلسلة متعددة؛ فكر في التحقق من التفاعل في نظام النموذج الخاص بك بسبب التوصيل البديل.
• للوتسترن (Western blot)، الوزن الجزيئي المتوقع هو حوالي 98 kDa، لكن الأشكال المتسلسلة والأنواع المعدلة بـ SUMOylated قد تظهر بأوزان جزيئية أعلى؛ يُنصح باستخدام سلم بروتيني عالي الجودة وتحسين ظروف النقل.
• تم التحقق من صحة هذا المضاد لتأكيد KO (الإقصاء)؛ تأكد من تضمين مستخلصات تحكم KO مناسبة في تجارب WB لتأكيد خصوصية النطاق.
• بالنسبة لـ IHC-P، يجب تحسين ظروف استرجاع المستضد (مثل مخزن السترات pH 6.0 أو EDTA pH 9.0)، ويُنصح بالتحقق من أنماط التلوين مقابل توزيع PML-NB المعروف في الأنسجة.
• في تطبيقات ELISA، فكر في استخدام المستضد المعاد التركيب كتحكم إيجابي لإنشاء الحساسية والمدى الخطي.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر CamelBio لمصنعي التشخيصات والمختبرات البحثية وصولاً مبسطاً إلى محفظة شاملة من المواد الخام لتشخيصات المختبر (IVD)، بما في ذلك أزواج الأضداد التي تم التحقق من صحتها، وأضداد أحادية النسائل ومتعددة النسائل محسنة، ومواد كيميائية مساعدة بالجملة، وتوريد متخصص للأهداف النادرة. لأبحاث علم الأورام وعلم الفيروسات المركزة على PML، نحن نورد أضداداً عالية الجودة ومواد كيميائية ذات صلة لدعم تطوير المقايسات ودراسات المؤشرات الحيوية، ونعمل كجسر موثوق به من المفهوم إلى التطبيق السريري.