[تم التحقق من KO] جسم مضاد متعدد النسائل من الأرنب مضاد لـ IDH1 للاستخدام في WB وIF/ICC وIP وELISA - O75874

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة IDH1 وتوضعه

• يشفّر IDH1 إنزيم نازعة هيدروجين الإيزوسيترات السيتوبلازمي المعتمد على NADP (IDH1)، المعروف أيضًا باسم IDPc أو نازعة كربوكسيل الأوكسالوسكسينات، والذي يحفّز نزع الكربوكسيل التأكسدي للإيزوسيترات إلى ألفا-كيتوغلوتارات مع الإنتاج المتزامن لـ NADPH (PubMed:10521434, PubMed:19935646).
  المراجع ذات الصلة: PMID:10521434 PMID:19935646
• يتطلب الإنزيم أيونات فلزية ثنائية التكافؤ مثل Mg²⁺ أو Mn²⁺ كعوامل مساعدة، وينتمي إلى عائلة نازعات هيدروجين الإيزوسيترات/الإيزوبروبيل مالات، مع أدوار رئيسية في دورة حمض ثلاثي الكربوكسيل واستتباب الأكسدة والاختزال الخلوي.
• يتموضع IDH1 بشكل أساسي في السيتوبلازم والعصارة الخلوية، ويوجد أيضًا في البيروكسيسومات، حيث قد يزوّد التفاعلات البيروكسيسومية بـ NADPH، مثل نشاط إنزيم ثنائي أكسجيناز الفيتانوييل-CoA.
• من خلال إنتاج NADPH، يدعم IDH1 التخليق الحيوي الاختزالي، بما في ذلك تخليق الدهون، ويساعد في الحفاظ على البيئة الاختزالية الخلوية في مواجهة الإجهاد التأكسدي.
• يخضع البروتين لتعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأستلة والفسفرة، والتي قد تعدّل نشاطه الإنزيمي وتوزيعه داخل الخلية.
• قد يعمل IDH1 ككريستالين ظهاري قرني، مما قد يساهم في الحفاظ على شفافية القرنية (بالتشابه).
• يبلغ الوزن الجزيئي المحسوب للوحدة الأحادية الناضجة من IDH1 نحو 46.7 kDa، وهو ما يتوافق مع الحزمة المرصودة حول 47 kDa في لطخة ويسترن.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يشمل المستضد المناعي بروتين IDH1 البشري كامل الطول (aa 1–414)، مما يشير إلى أن الجسم المضاد يمكنه التعرف على البنى الأصلية والممسوخة. في لطخة ويسترن، يُتوقع ظهور حزمة قريبة من 47 kDa؛ ويجب التحقق باستخدام ضوابط موجبة وسالبة مناسبة، إذ إن هذا الجسم المضاد تم التحقق منه باستخدام KO.
• في الترسيب المناعي (IP)، استخدم بروتوكولًا قياسيًا مع محاليل خلوية من أنسجة أو خطوط خلوية تعبّر عن IDH1. أكّد الالتقاط باستخدام لطخة ويسترن بجسم مضاد مختلف أو باستخدام قياس الطيف الكتلي.
• في التألق المناعي/الكيمياء الخلوية المناعية (IF/ICC)، توقّع نمط تلوين سيتوبلازمي غالبًا مع احتمال ظهور نقاط بيروكسيسومية. أدرج ظروف تثبيت ونفاذية مناسبة، وتحقق من النوعية باستخدام خلايا ضابطة معطّلة لـ IDH1 إن توفرت.
• يتفاعل هذا الجسم المضاد أيضًا مع IDH1 لدى الفأر والجرذ، مما يجعله مناسبًا للدراسات على النماذج القوارض. احرص دائمًا على التحقق من مستويات التعبير في النسيج أو النظام الخلوي المحدد قيد الدراسة.
• بالنسبة إلى ELISA، فكّر في إقرانه بجسم مضاد للكشف مطابق أو استخدام الجسم المضاد نفسه للالتقاط والكشف ضمن صيغة شطيرة، مع ضمان الحد الأدنى من التفاعل المتبادل مع متماكبات نازعة هيدروجين الإيزوسيترات الأخرى (مثل IDH2 وIDH3).

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تقدم CamelBio مجموعة شاملة من المواد الخام للتشخيص المخبري IVD، بما في ذلك الأجسام المضادة المعتمدة، وأزواج المستضدات، والكواشف المساعدة، لتبسيط تطوير منتجاتك التشخيصية. وبتركيزها على الإنزيمات الأيضية مثل IDH1، نوفر حلول توريد موثوقة للأجسام المضادة متعددة النسائل وحيدة النسيلة، والكواشف السائبة، والمواد النادرة المستهدفة، لدعم مشروعك من الفكرة إلى العيادة. تواصل معنا لاستكشاف كيفية مساهمة منصتنا الشاملة في تسريع أبحاث وتصنيع منتجات IVD الخاصة بك.