جسم مضاد متعدد النسائل أرانبي مُحقق بالخروج الجيني ضد HMGB1 لتطبيقات WB و IHC-P و ELISA - P09429

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

خلفية بيولوجية: وظيفة HMGB1 وموقعه الخلوي

• HMGB1 (بروتين مجموعة الحركة العالية B1)، المشفر بواسطة جين HMGB1، هو بروتين مرتبط بالكروماتين غير هيستوني منتشر في كل مكان، يُفرز بنشاط أو يُطلق بشكل سلبي ليعمل كنمط جزيئي مرتبط بالخطر (DAMP) وكيموكين/سايتوكين.
• في النواة، يرتبط HMGB1 بشكل تفضيلي بهياكل الحمض النووي غير التقليدية (الحمض النووي أحادي السلسلة، الصليبي، الملتف المفرط، والحمض النووي Z) ويثني الحمض النووي لتسهيل إعادة تشكيل الكروماتين وزيادة وصول عوامل النسخ (PubMed:20123072). يشارك في مسارات إصلاح الحمض النووي المتعددة، بما في ذلك إصلاح الاستئصال النوكليوتيدي، وإصلاح عدم التطابق، وإصلاح الاستئصال القاعدي (PubMed:15014079, PubMed:16143102, PubMed:17803946, PubMed:19360789, PubMed:19446504). المراجع ذات الصلة: PMID:20123072 PMID:15014079 PMID:16143102 PMID:17803946 PMID:19360789 PMID:19446504
• في السيتوبلازم، يعزز HMGB1 الالتهام الذاتي عن طريق تعطيل تفاعل BECN1:BCL2 بشكل تنافسي (PubMed:20819940) ويشارك في الالتهام الذاتي الناجم عن الإجهاد التأكسدي (PubMed:21395369). المراجع ذات الصلة: PMID:20819940 PMID:21395369
• خارج الخلية، تحدد حالة الأكسدة والاختزال لـ HMGB1 وظيفته: يعمل HMGB1 المخفض بالكامل ككيموكين، والشكل ثنائي الكبريتيد كسايتوكين محفز للالتهاب، والشكل السلفونيل يعزز التحمل المناعي (PubMed:23446148, PubMed:23519706, PubMed:23994764). يتفاعل مع مستقبلات سطحية متعددة، بما في ذلك AGER/RAGE و TLR2 و TLR4، للحث على إطلاق السايتوكينات وتجنيد الخلايا المناعية (PubMed:12765338, PubMed:18354232, PubMed:19264983, PubMed:15607795, PubMed:20547845). المراجع ذات الصلة: PMID:23446148 PMID:23519706 PMID:23994764 PMID:12765338 PMID:18354232 PMID:19264983 PMID:15607795 PMID:20547845
• يسهل HMGB1 دخول فيروس SARS-CoV و SARS-CoV-2 عن طريق تنظيم تعبير مستقبلات الفيروس ACE2 و CTSL من خلال تعديل الكروماتين (PubMed:33147444) وهو مطلوب لحدوث شبكية الشبكة الإندوبلازمية الناجمة عن بروتين ORF3A لفيروس SARS-CoV-2 (PubMed:35239449). المراجع ذات الصلة: PMID:33147444 PMID:35239449
• التعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الأستلة، الفسفرة، ADP-ريبوزلة، والأكسدة، تنظم بشكل ديناميكي الموقع تحت الخلوي، ألفة الارتباط بالحمض النووي، والأنشطة المناعية لـ HMGB1.
• يتم التعبير عن HMGB1 في جميع الأنسجة وقد تم الكشف عنه في الصفائح الدموية (PubMed:11154118). المراجع ذات الصلة: PMID:11154118

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يغطي المستضد المناعي الأحماض الأمينية من 69 إلى 168، بما في ذلك صندوق HMG B المحافظ وجزء من الذيل الحمضي C. هذه المنطقة محافظة بدرجة عالية بين الإنسان والفأر والجرذ، مما يدعم التفاعل المتبادل للجسم المضاد.
• بالنسبة للنشاف الغربي، من المتوقع ظهور نطاق عند حوالي 25 كيلو دالتون؛ لاحظ أن التعديلات ما بعد الترجمة قد تسبب انزياحات طفيفة. تم إجراء التحقق بالخروج الجيني؛ يُنصح بتضمين ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة.
• بالنسبة لـ IHC-P، قد يكون استرجاع المستضد ضروريًا. قم بتحسين ظروف التلوين باستخدام ضوابط نسيجية إيجابية معروفة (مثل الأنسجة التي تعبر عن HMGB1 بكميات عالية كالأعضاء اللمفاوية أو الأورام).
• في تقنية ELISA، يمكن استخدام الجسم المضاد للالتقاط أو الكشف؛ ومع ذلك، يجب التحقق من توافق الاقتران مع جسم مضاد للكشف مطابق لتنسيق الاختبار المحدد.
• نظرًا لأن HMGB1 هو DAMP يمكن إطلاقه من الخلايا التالفة، تجنب التحلل الخلوي المفرط أو تلف الأنسجة أثناء تحضير العينات لتقليل الخلفية إلى الحد الأدنى.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المواد الخام

تدعم CamelBio مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث من خلال خدمات شاملة لشراء المواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD). لأبحاث الالتهاب المرتبط بـ HMGB1 والسرطان والأمراض المعدية، نقدم أزواج أجسام مضادة محققة، وأجسام مضادة أحادية النسائل ومتعددة النسائل محسنة، ومواد مساعدة بكميات كبيرة، مما يمكّن تطوير اختباراتك من المفهوم إلى المرحلة السريرية.