[مُحقق بواسطة KO] الجسم المضاد الأحادي النسيلة الأرنبي المضاد لكاسباز 8 للتطبيقات WB و ELISA - Q14790

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة كاسباز 8 وموقعه الخلوي

• كاسباز 8 (يسمى أيضًا FLICE و MACH و MCH5) هو كاسباز مبتدئ يبلغ وزنه 55 كيلو دالتون من عائلة البروتياز الحمضية السيستينية الأسبارتية، ويُنتج في أشكال متعددة متعددة النسيلة عبر الربط البديل للنسيل؛ الشكل الكامل الطول النسيلة 1 نشيط تحفيزيًا بينما قد تعمل الأشكال الأقصر كمواد مثبطة سائدة سلبية.
• باعتباره المبتدئ الرئيسي للاستماتة الخارجية، يتم تجنيد كاسباز 8 عبر المحول FADD إلى معقدات مستقبلات الموت (DISC) عند تحفيز FAS أو TNFRSF1A، مما يؤدي إلى تكوين ثنائيه، والانقسام الذاتي التحفيزي، والتنشيط اللاحق لكاسبازات المُنفذة المصب (CASP3/7) و BID لتنفيذ موت الخلية. المراجع ذات الصلة: PMID:8681376, PMID:8681377, PMID:9184224
• إلى جانب الاستماتة، ينظم كاسباز 8 الموت النخرّي بشكل سلبي عن طريق انقسام RIPK1 عند الموضع Asp-324، مما يثبط نشاط كيناز RIPK1 ويمنع الإشارات النخرية والالتهابية المحفزة بواسطة TNF. المراجع ذات الصلة: PMID:31827280, PMID:31827281
• كاسباز 8 يتوسط أيضًا الموت المُتوهج (البيروبتوز) عن طريق انقسام وتنشيط جاسمدرين C (GSDMC) وجاسمدرين D (GSDMD)، ويطلق نطاقاتها الطرفية N المكونة للمسام التي تسبب تمزق الغشاء الخلوي وموت الخلية الالتهابي. المراجع ذات الصلة: PMID:32929201, PMID:34012073
• يتمركز بشكل أساسي في السيتوبلازم ولكن يمكن العثور عليه في النواة وفي خيوط اللاميلوبوديا؛ الفسفرة عند الموضع Tyr-380، بغض النظر عن نشاطه التحللي البروتيني، يعزز هجرة الخلايا. المراجع ذات الصلة: PMID:18216014, PMID:27109099
• يتم التعبير عن كاسباز 8 على نطاق واسع، مع أعلى مستويات الرنا المرسال في الكريات البيض المحيطية بالدم، والطحال، والغدة الصعترية، والكبد، مع تعبير منخفض جدًا في الدماغ، والخصية، والعضلات الهيكلية.
• بالإضافة إلى ذلك، يقوم كاسباز 8 بانقسام PARP1 و PARP2 أثناء الاستماتة، وقد يشارك في مسارات موت الخلايا السامية التي يتوسطها الجرانزيم B. المراجع ذات الصلة: PMID:8681376, PMID:8755496

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتطابق المستضد المناعي مع بقايا الأحماض الأمينية من 200 إلى 300 ضمن المجال التحفيزي لكاسباز 8 البشري؛ هذه المنطقة موجودة في البروإنزيم الكامل الطول والوحدة التحفيزية الكبيرة، لذلك قد يكشف الجسم المضاد كلا الشكلين غير المعالج والمنقسم.
• بالنسبة للنشاف الغربي، نفذ فصل SDS-PAGE في ظل ظروف اختزال؛ توقع وجود حزمة رئيسية عند ~55 كيلو دالتون (الشكل الكامل الطول)، وحزم أصغر تمثل الأجزاء النشطة p18/p10 اعتمادًا على المعالجة الخلوية. قم دائمًا بتضمين علامات الوزن الجزيئي.
• يُذكر أن هذا الجسم المضاد محقق بواسطة KO؛ نوصي باستخدام محلول ليزات خلايا منقولة جينياً كاسباز 8 كنوع سلبي لتأكيد خصوصية الحزم في نظامك التجريبي.
• بالنسبة لتطبيقات ELISA، نفذ معايرة متقاطعة لتحديد التركيزات المثلى للمستضد المغلف والجسم المضاد؛ قم بالتحقق من الصحة مقابل معيار معروف إذا كان متاحًا.
• عند دراسة تنشيط كاسباز 8، عالج الخلايا بمحفزات مناسبة (مثل TNF-α + سيكلوهيكسيميد للاستماتة، أو TNF-α + zVAD + مُحاكي Smac للموت النخرّي) وراقب حركية الانقسام للتمييز بين أنماط موت الخلية المختلفة.
• تم الإبلاغ عن التفاعل المتبادل فقط للبشر؛ إذا كنت تستخدمه مع أنواع أخرى، قم بمحاذاة تسلسل الببتيد المناعي مع كاسباز 8 للكائن المستهدف لتقييم التفاعل المحتمل.

CamelBio: جسرك الشامل لتوفير المنتجات

تتخصص CamelBio في تزويد مصنعي التشخيص والمختبرات ومعاهد البحوث بمجموعة كاملة من المواد الخام التشخيصية IVD والدعم الفني. يُعد هذا الجسم المضاد الأحادي النسيلة المضاد لكاسباز 8 مثالًا على التزامنا بتقديم أدوات محققة لأبحاث الاستماتة وموت الخلية. إلى جانب الأجسام المضادة الفردية، نقدم وصولًا شاملاً لأزواج الأجسام المضادة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وتوفير منتجات للأهداف النادرة — مما يساعدك على سد الفجوة بين الفكرة والتطبيق السريري بسلاسة.