جسم مضاد أحادي النسيلة من الأرنب ضد TFEB مُتحقَّق منه بتجربة إسكات الجين (KD) لتطبيقات WB وIHC-P وELISA وChIP - P19484

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة TFEB وتوضعه

• ينتمي TFEB (عامل النسخ EB)، المعروف أيضًا باسم البروتين 35 الحلزوني الأساسي-الحلقي من الفئة E (bHLHe35)، إلى الفئة الفرعية MiT/TFE من عوامل النسخ ذات الحلزون الأساسي-الحلقي وسحاب الليوسين (bHLH-Zip)، والتي تشمل MITF وTFE3.
• يعمل كمنظّم رئيسي لتكوّن الليسوسومات والالتهام الذاتي، وذلك من خلال الارتباط بزخارف التعبير والتنظيم الليسوسومي المنسّق (CLEAR) (5′-GTCACGTGAC-3′) في محفزات الجينات الليسوسومية وجينات الالتهام الذاتي. المراجع ذات الصلة: PMID:19556463، PMID:22692423
• يخضع نشاط TFEB لتنظيم محكم عبر الفسفرة الحساسة للمغذيات: في ظروف التغذية، تؤدي الفسفرة بوساطة mTOR على بقايا سيرين متعددة إلى احتجاز TFEB في السيتوسول؛ بينما يؤدي التجويع أو الإجهاد الليسوسومي إلى تثبيط mTOR، مما يسبب نزع الفسفرة السريع وانتقاله إلى النواة. المراجع ذات الصلة: PMID:21617040، PMID:22343943، PMID:22576015
• في النواة، يتثنّى TFEB مع نفسه أو مع أعضاء آخرين من عائلة MiT/TFE لتنشيط نسخ الجينات المستهدفة المشاركة في الالتهام الذاتي، واستقلاب الدهون، واستتباب الطاقة، والدفاع المناعي. المراجع ذات الصلة: PMID:1748288، PMID:29146937
• بالإضافة إلى ذلك، يؤدي TFEB دورًا في المناعة التكيفية من خلال تنظيم تعبير CD40L في الخلايا التائية، وفي المناعة الفطرية المضادة للبكتيريا من خلال الألكلة بوساطة الإيتاكونيت، التي تعزز توضعه النووي وتكوّن الليسوسومات. المراجع ذات الصلة: PMID:35662396
• يتسم التوضع تحت الخلوي بالديناميكية: إذ يكون TFEB موجودًا أساسًا في السيتوبلازم عند فسفرته، وينتقل إلى النواة عند تنشيطه؛ كما يمكنه الارتباط بغشاء الليسوسوم.

الإرشادات التجريبية والنصائح التقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع الأحماض الأمينية 50–173 من TFEB البشري (NP_009093.1). تقع هذه المنطقة ضمن مجال التنشيط النسخي الطرفي N، وهو محفوظ نسبيًا بين الإنسان والفأر والجرذ، مما يدعم التفاعل التصالبي المُبلغ عنه. بالنسبة إلى الأنواع غير المدرجة، يُوصى بإجراء محاذاة للتسلسلات.
• في اللطخة الغربية، قد يظهر TFEB على شكل حزمة مزدوجة بين 44 و53 كيلو دالتون بسبب اختلاف الفسفرة أو التضفير البديل؛ ويمكن أن يساعد استخدام مثبطات الفوسفاتاز الطازجة في محلول التحلل على الحفاظ على الأشكال الإسوية المفسفرة. تم التحقق من خصوصية الجسم المضاد في تجربة إسكات الجين (KD Validated).
• في الكيمياء المناعية النسيجية (IHC-P)، ينبغي تحسين ظروف استرجاع المستضد وفقًا لنوع النسيج المستخدم. وقد تُلاحظ صبغة نووية وسيتوبلازمية تبعًا لحالة تنشيط TFEB.
• بالنسبة إلى ChIP، يجب تحسين ظروف التشابك والقص وفقًا لنوع الخلية؛ وينبغي أن يُثري الجسم المضاد بكفاءة مناطق المحفز التي تحتوي على تسلسلات CLEAR أو E-box.
• يجب إجراء ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل محاليل تحلل الخلايا المعطّلة جينيًا لـ TFEB، ومواقع جينات مستهدفة معروفة) عند إعداد الاختبارات.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تُعد CamelBio شريكك المتكامل لتوريد المواد الخام للتشخيص المخبري (IVD)، إذ تدعم سير عمل التطوير بأكمله بدءًا من أبحاث المراحل المبكرة وصولًا إلى التطبيق السريري. ويدعم هذا الجسم المضاد ضد TFEB، الذي يستهدف عقدة رئيسية في بيولوجيا الالتهام الذاتي والليسوسومات، عرضنا الشامل من أزواج الأجسام المضادة المُتحقَّق منها، والأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسائل، والكواشف المساعدة بالجملة، وخدمات التوريد المخصصة للأهداف المتخصصة. تواصل معنا لمعرفة كيف يمكننا تسريع تطوير اختباراتك التشخيصية باستخدام مواد خام موثوقة وعالية الجودة.