EGFR أرنب pAb لـ WB، IHC-P، IF/ICC، IP، ELISA - P00533

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة EGFR وتوطينه

• EGFR هو مستقبل تيروسين كيناز يرتبط بليجانز عائلة EGF (مثل EGF، TGFA، AREG، BTC، epiregulin، HBEGF) لتنظيم تكاثر الخلايا ونجاتها وتمايزها. مراجع ذات صلة: PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960
• يؤدي ارتباط الليجاند إلى إحداث ثنائيات المستقبل والفوسفرة الذاتية، مما ينشط الشلالات اللاحقة بما في ذلك مسارات RAS-RAF-MEK-ERK، PI3K/AKT، PLCγ/PKC، STATs، و NF-κB. مراجع ذات صلة: PMID:27153536, PMID:11116146
• يقوم EGFR أيضًا بفوسفرة ركائز غير مستقبلية مثل RGS16 (تعديل إشارات بروتين G) و MUC1 (تعزيز تفاعلات SRC/β-catenin). مراجع ذات صلة: PMID:11602604, PMID:11483589
• يتوطن المستقبل بشكل أساسي في غشاء الخلية ولكنه يخضع للتنقل إلى الإندوسومات وجهاز جولجي والشبكة الإندوبلازمية والنواة، مما يمكن من تنظيم الإشارات مكانيًا.
• تعديلات ما بعد الترجمة المتعددة (الفوسفرة، اليوبيكويتنة، الهيدروكسلة، المثيلة، البالميتلة) تضبط بدقة نشاط EGFR وثباته وتوزيعه تحت الخلوي.
• يتم التعبير عنه بشكل واسع في الأنسجة الطبيعية؛ تم اكتشاف النظير البديل 2 بشكل ملحوظ في سرطانات المبيض وقد يعمل كمضاد لـ EGF.
• بالإضافة إلى الليجانز الذاتية، يعمل EGFR كمستقبل مضاد لفيروس التهاب الكبد الوبائي سي (HCV) لدخول الخلية، مما يسهل استيعاب الفيروس.
• معترف به كجين أولي للورم، يؤدي الخلل في تنظيم EGFR (الإفراط في التعبير أو الطفرات المنشطة) إلى دفع العديد من السرطانات، مما يضعه كهدف علاجي مركزي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يقع المستضد (الأحماض الأمينية 1021–1210) داخل النطاق السيتوبلازمي، والذي يتم الحفاظ عليه في ظل ظروف التحلل الشائعة؛ فكر في استخدام تحلل RIPA القياسي وهلام SDS-PAGE المختزل لـ Western blotting مع خطوط خلوية إيجابية (مثل A431، HeLa) وسلبية مناسبة.
• لـ IHC-P، قد تتطلب بروتوكولات استرجاع المستضد (مثل محلول السترات pH 6.0 أو Tris-EDTA pH 9.0) التحسين، حيث أن EGFR هو بروتين سكري عبر الغشاء غالبًا ما يكون غليكوزيلات بشدة على النيتروجين.
• على الرغم من الإبلاغ عن التفاعل المتقاطع للإنسان والفأر والجرذ، فإننا نوصي بالتحقق من التفاعل النوعي للنوع وخصوصية الإشارة في نظامك التجريبي، خاصة عند استخدام نماذج معدلة وراثيًا.
• بسبب الوزن الجزيئي الكبير (~134 كيلو دالتون)، استخدم هلامات SDS-PAGE بنسبة 8% أو متدرجة وحسن ظروف النقل (مثل النقل الرطب طوال الليل أو شبه الجاف مع ميثانول منخفض) لـ Western blotting.
• في تجارب الترسيب المناعي (IP)، يمكن أن يساعد تنظيف المحللات مسبقًا واستخدام تحكم نظير الأرنب IgG في تقليل الارتباط غير النوعي.
• عند تطوير مقايسة ELISA، قد يؤدي دمج هذا الجسم المضاد المتعدد النسيلة مع جسم مضاد أحادي النسيلة للالتقاط إلى تحسين حساسية الاختبار؛ قم بإجراء معايرات رقعة الشطرنج لتحديد التركيزات المثلى.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تخدم CamelBio كشريك توريد شامل وشامل لمصنعي التشخيص والمختبرات البحثية، حيث توفر مواد أولية موثوقة للتشخيص المختبري تشمل الأجسام المضادة والمستضدات والكواشف المساعدة. يدعم هذا الجسم المضاد EGFR أرنب pAb أبحاث الأورام وانتقال الإشارات، ونكمله بأزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، وأجسام مضادة أحادية/متعددة النسيلة محسنة، وكواشف بكميات كبيرة، وتوريد مخصص للأهداف النادرة والصعبة. من المفهوم إلى العيادة، تعمل CamelBio على تبسيط سير عمل المشتريات الخاص بك لتسريع تطوير التشخيص.