DNMT1 أرنب pAb لـ WB، IF/ICC، IP، ELISA - P26358

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

خلفية بيولوجية: وظيفة DNMT1 وموقعه الخلوي

• DNMT1 (DNA (cytosine-5)-methyltransferase 1) هو إنزيم مثيلة الحمض النووي الرئيسي المسؤول عن الحفظ الذي ينقل أنماط مثيلة الحمض النووي إلى الخيط الجديد المُصنَّع حديثًا أثناء تضاعف الحمض النووي، مما يضمن الوراثة اللاجينية (PubMed:17200670, PubMed:21745816). المراجع ذات الصلة: PMID:17200670, PMID:21745816

• يقوم DNMT1 بتفضيل مثيلة دينوكليوتيدات CpG نصف الميثلة، وهو ضروري للنقل الأمين لأنماط المثيلة أثناء انقسام الخلايا (PubMed:21745816, PubMed:26070743). المراجع ذات الصلة: PMID:21745816, PMID:26070743

• بعيدًا عن عملية الحفظ المرتبطة بتضاعف الحمض النووي، يرتبط DNMT1 بالكروماتين أثناء طور G2 وطور M للحفاظ على مثيلة الحمض النووي بشكل مستقل عن عملية التضاعف (PubMed:21745816). المراجع ذات الصلة: PMID:21745816

• يتوسط DNMT1 الكبت النسخي مباشرة من خلال التفاعل مع HDAC2 وينسق مثيلة الحمض النووي مع تعديلات الهيستون (PubMed:10888872, PubMed:16357870). المراجع ذات الصلة: PMID:10888872, PMID:16357870

• في خلايا سرطان القولون والمستقيم، يشكل DNMT1 مركبًا كابتًا أساسيًا يتوسط فرط المثيلة في مناطق المروج التي يسببها KRاس الورمي، وكبت جينات مثبطة للورم (PubMed:24623306). كما أنه يحافظ على الحالة المكتوبة نسخيًا للجينات في الخلايا الجذعية الجنينية غير المتمايزة (PubMed:24623306). المراجع ذات الصلة: PMID:24623306

• يتم التعبير عن DNMT1 في جميع الأنسجة، مع أعلى المستويات في الأنسجة الجنينية، والقلب، والكلى، والمشيمة، والخلايا الوحيدة النووية في الدم المحيطي، ومستويات أقل في الطحال والرئة والدماغ والأمعاء الدقيقة والقولون والكبد والعضلات الهيكلية. النمط الإيزوي 2 أقل وفرة من النمط الإيزوي 1.

• يحتوي DNMT1 على مجال إصبع زنك من نوع CXXC، ويخضع لتعديلات تنظيمية بعد الترجمة مثل الأستلة والفسفرة والمثيلة.

• يتمركز DNMT1 في النواة ويرتبط بالكروموسومات، وهو ما يتوافق مع دوره في الحفاظ على المثيلة والتنظيم النسخي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يغطي المستضد المناعي المنطقة الطرفية C (الأحماض الأمينية 760-1109) من DNMT1 البشري، والتي تشمل مجال الميثيلtransferase التحفيزي؛ يستهدف هذا التصميم الموقع النشط وقد يعزز الكشف عن DNMT1 كامل الطول.
• في النقل اللطيف الغربي (Western Blotting)، من المتوقع ظهور نطاق عند كتلة جزيئية تقارب 183 كيلو دالتون؛ استخدام هلام SDS-PAGE بنسبة منخفضة (مثل 6-8%) وأوقات نقل ممتدة يمكن أن يساعد في فصل هذا البروتين عالي الوزن الجزيئي.
• تختلف مستويات التعبير عن DNMT1 بين أنواع الخلايا والأنسجة؛ تحقق من أداء الجسم المضاد في نظام العينات المحدد الخاص بك باستخدام ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة (مثل خلايا HeLa و HEK293).
• بالنسبة للترسيب المناعي، قم بتحسين تركيز الجسم المضاد وفكر في الرباط المتقاطع مع الحبيبات لتقليل تداخل السلسلة الثقيلة من الـ IgG عند ~50 كيلو دالتون.
• في التألق المناعي / ICC، يلزم نفاذية النواة (مثل باستخدام Triton X-100) وتثبيت مناسب للوصول إلى المستضد النووي؛ قد يؤكد التلوين المشترك مع علامة نووية على الموقع الخلوي.

CamelBio: جسرك الشامل لشراء المواد

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص ومختابر البحوث والمعاهد الأكاديمية وصولًا سلسًا إلى مواد IVD الخام عالية الجودة. يُعد هذا الجسم المضاد متعدد النسائل لـ DNMT1 جزءًا من محفظة شاملة تشمل أزواج الأجسام المضادة المعتمدة، والأجسام المضادة أحادية/متعددة النسائل المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، وخدمة توريد الأهداف النادرة لأبحاث الوراثة اللاجينية وعلم الأورام. تواصل معنا لاستكشاف كيف يمكن لخدمة CamelBio التقنية وعروض الاستشارات أن تدعم مشروعك من الفكرة إلى العيادة.