جسم مضاد متعدد النسيلة أرانبي ضد ديميثيل-eEF1A-K55 (P68104/Q05639) لاستخدام في نقل اللطخة الغربية (WB) والاختبار الإنزيمي المرتبط (ELISA)

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين بروتين eEF1A

• يتواجد بروتين eEF1A (عامل الاستطالة الأوكاريوتي 1A) في شكلين متساويين: eEF1A1 (الجين EEF1A1، معرف الجين: 1915) و eEF1A2 (الجين EEF1A2، معرف الجين: 1917)، وكلاهما من عوامل الاستطالة الترجمية المحفوظة بدرجة عالية. وهي تحفز الارتباط المعتمد على GTP للأمينوأسيل تي الرنا إلى الموقع A للريبوسوم أثناء استطالة تخليق البروتين PMID:26593721, PMID:26651998, PMID:36123449, PMID:36264623, PMID:36638793.
• إلى جانب الترجمة، يعزز eEF1A1 تجميع الأكتين لتنظيم الهيكل الخلوي، وفي خلايا المساعدة التائية 1، يشكل مركبًا مع بروتيني TXK و PARP1 لتنظيم نسخ جين IFNG بشكل إيجابي PMID:17177976. يعد EEF1A1 أيضًا ضروريًا لترجمة البروتينات الفيروسية أثناء عدوى فيروس SARS-CoV-2 PMID:33495306.
• يتم التعبير عن EEF1A1 على نطاق واسع، بينما يوجد EEF1A2 بشكل أساسي في الدماغ والقلب والعضلات الهيكلية. على مستوى العضيات الخلوية، يتوطن EEF1A1 في السيتوبلازم والنواة والنوية وغشاء الخلية؛ بينما يتوطن EEF1A2 في غشاء الشبكة الإندوبلازمية PMID:19158340, PMID:8650580, PMID:26497934, PMID:36697828.
• يعتبر اللايسين 55 (K55) موقع مثيلة ثنائية محفوظ (N6,N6-دايميثيللايسين) في كل من eEF1A1 و eEF1A2، كما تم تحديده بواسطة البروتيوميات PMID:30143613, PMID:30612740. في eEF1A2، يمكن أن يخضع K55 أيضًا للمثيلة الثلاثية. قد تنظم هذه التعديلات تفاعلات البروتين ودقة الترجمة.
• ترتبط الطفرات في EEF1A2 باضطرابات النمو العصبي مثل الصرع والإعاقة الذهنية، مما يؤكد الأهمية الطبية الحيوية لتنظيم eEF1A2.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• تم إنتاج هذا الجسم المضاد ضد ببتيد K55 ثنائي المثيلة من eEF1A؛ يجب أن يتعرف بشكل خاص على شكل ثنائي المثيلة K55. قم بتأكيد النوعية من خلال منافسة الببتيد (ثنائي المثيلة مقابل غير المعدل) أو عن طريق معالجة العينات بإنزيم نزع المثيلة.
• بالنسبة لنقل اللطخة الغربية، يهاجر eEF1A1 (~50.1 كيلو دالتون) و eEF1A2 (~50.5 كيلو دالتون) عند حوالي 50 كيلو دالتون. استخدم ظروف قياسية للفصل الكهربائي هلامي دوديكيل كبريتات الصوديوم والنقل. قم بالتحقق في الخطوط الخلوية البشرية (مثل HeLa لـ EEF1A1، SH-SY5Y لـ EEF1A2).
• في الاختبار الإنزيمي المرتبط، قم بالطلاء بالببتيد ثنائي المثيلة أو ليزات الخلايا؛ وقم بتضمين ضوابط غير مثيلة لتقييم التفاعل المتقاطع.
• نظرًا لدور eEF1A في الترجمة وعلم الأورام البيولوجي والتكاثر الفيروسي، يمكن لهذا الجسم المضاد أن يساعد في دراسات التنظيم المعتمد على المثيلة في ظل ظروف فسيولوجية ومرضية مختلفة.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على المصادر

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث إمكانية الوصول الموثوق إلى المواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD). بالنسبة للمشاريع التي تتضمن عوامل الاستطالة الترجمية أو الكشف الخاص بالمثيلة، نقدم أزواج أجسام مضادة موثقة، وأجسام مضادة أحادية/متعددة النسيلة محسنة، ومواد مساعدة بكميات كبيرة. كما يسهل فريقنا الحصول على الأهداف النادرة مثل ديميثيل-eEF1A-K55، ودعم سير عملك من التطوير إلى التطبيق السريري.