جسم مضاد أرانب متعدد النسيلة لـ CAST للتحليل بـ WB و ELISA - P20810

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة كالپاستاتين وموقعه الخلوي

• كالپاستاتين (CAST) هو مثبط داخلي منشط محدد للكالپاين، وهو عائلة من البروتياز السيستيني المعتمد على الكالسيوم (EC 3.4.22.-) يشارك في إعادة تشكيل الهيكل الخلوي، نقل الإشارات، والموت الخلوي المبرمج.
• من خلال الارتباط الوثيق وتثبيط الكالپاين، ينظم كالپاستاتين نشاط البروتياز في الأنسجة العضلية، ويلعب دورًا حاسمًا في تطرية اللحوم بعد الذبح وربما في التحكم في تحلل بروتينات العضلات في الخلايا الحية.
• يخضع جين CAST لربط بديل مكثف، مما ينتج عنه أشكالًا متعددة للبروتين تختلف في التوزيع الأنسجي وقدرات التثبيط.
• يحتوي كالپاستاتين على أربعة مجالات تثبيط متكررة (مجالات L)، كل منها قادر على تثبيط الكالپاين بشكل مستقل، بالإضافة إلى مجال طرفي N وذيل طرفي C؛ هذا البنية متعددة التكرار هي أساس تثبيطه القوي والتعاوني للبروتياز.
• تشمل التعديلات ما بعد الترجمة الأستلة، الفسفرة، اليوبيكويتين، وتشكيل الروابط الأيزوببتيدية، والتي قد تعدل استقرار البروتين، موقعه، وكفاءة التثبيط.
• تم الكشف عن تعبير كالپاستاتين في مجموعة واسعة من الأنسجة، مع وجود مميز في الحيوانات المنوية (كمكون BS-17) وارتباط مرضي بتقرن الجلد الراحي الأخمصي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد اصطناعي يمتد من الأحماض الأمينية 510 إلى 610 من بروتين CAST البشري؛ قد يتأثر تفاعل الجسم المضاد بالأشكال المختلفة للبروتين أو التعديلات ما بعد الترجمة في هذه المنطقة.
• بالنسبة للتلطخ الغربي (Western blot)، ضع في اعتبارك تحسين تركيز الجسم المضاد الأولي (مثل 1:500–1:2000) واستخدام ضوابط إيجابية مناسبة مثل محللات خلايا هيلا، HEK293، أو العضلات الهيكلية، حيث يتم التعبير عن كالپاستاتين بشكل داخلي فيها.
• الجسم المضاد يتفاعل بشكل متبادل مع الفأر والجرذ؛ تحقق من أنماط النطاقات في هذه الأنواع، حيث قد يختلف الوزن الجزيئي قليلاً بسبب اختلاف الأشكال البروتينية.
• بالنسبة لـ ELISA، قم بمعايرة الجسم المضاد مقابل ببتيد المستضد المناعي أو البروتين المؤتلف الكامل لتحديد تراكيز العمل؛ استخدم خطوات حجب وغسل مناسبة لتقليل الخلفية.
• نظرًا لأنه جسم مضاد متعدد النسيلة، فإنه قد يكشف عن أشكال متعددة من كالپاستاتين؛ أكد النوعية من خلال تجارب التثبيط بالـ siRNA أو التعبير الزائد في النماذج الخلوية ذات الصلة.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تدعم CamelBio الشركات المصنعة للتشخيص، المختبرات، والمعاهد البحثية من خلال وصول شامل إلى المواد الخام المعتمدة للتشخيص المناعي في المختبر (IVD)، مما يبسط عملية التطوير من الفكرة إلى العيادة السريرية. لأبحاث كالپاستاتين، نقدم أجسام مضادة أرانب متعددة النسيلة مثل هذا الجسم المضاد CAST Rabbit pAb، بالإضافة إلى أزواج مستضدات مطابقة، بروتينات مؤتلفة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة. اتصل بفريقنا للحصول على أجسام مضادة وحيدة/متعددة النسيلة مخصصة، وأهداف مثبطات البروتياز التي يصعب العثور عليها، أو مجموعات كاملة لتطوير الفحوصات المناعية.