مضاد متعدد الأنسجة WNK1 لـ WB و IF/ICC و ELISA - Q9H4A3

المواصفات والمعاملات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة WNK1 وموقعه الخلوي

• WNK1 هو سيرين/ثريونين بروتين كيناز يعد مكونًا أساسيًا في سلسلة كيناز WNK1-SPAK/OSR1، وينظم ضغط الدم وتوازن الأيونات. تحت الإجهاد فرط التوتر الخلوي، يعمل كمستشعر للازدحام الجزيئي، ويخضع للفصل الطوري السائل-السائل لإنشاء حجرة بدون غشاء تركز فيها WNK1 مع ركائزها OXSR1/OSR1 و STK39/SPAK، مما يعزز فسفرة وتنشيطهما. المراجع ذات الصلة: PMID:15883153, PMID:17190791, PMID:31656913, PMID:36318922
• يقوم OXSR1/OSR1 و STK39/SPAK المنشطان بالفسفرة وتنشيط ناقلات Na-K-Cl المشتركة (SLC12A1/NKCC2, SLC12A2/NKCC1) مع تثبيط ناقلات K-Cl المشتركة (SLC12A5/KCC2, SLC12A6/KCC3)، مما يعزز تدفق الأيونات وزيادة حجم الخلية المنظم. المراجع ذات الصلة: PMID:16263722, PMID:21321328, PMID:19665974
• بخلاف نقل الأيونات، ينظم WNK1 تكوين الأوعية الدموية في الخلايا البطانية من خلال تنشيط مسار SPAK/OSR1، مما يساهم في الانجذاب الكيميائي والتكاثر الخلوي. المراجع ذات الصلة: PMID:25362046
• يقوم WNK1 بفسفرة ركائز تشمل PCF11 (ينظم تصدير الرنا المرسال من النواة) و NEDD4L، ويعمل كمنظم سلبي للالتهام الذاتي. كما له وظائف سقالة مستقلة عن نشاط الكيناز، مثل تثبيت مركب بروتين غشاء الشبكة الإندوبلازمية وتنظيم قناة الصوديوم الظهارية ENaC عبر تنشيط SGK1. المراجع ذات الصلة: PMID:29196535, PMID:27911840, PMID:33964204, PMID:36373794
• WNK1 ضروري لعملية الانفصال في الانقسام الخلوي وقد يشارك في إعادة تنظيم الهيكل الخلوي الأكتيني. المراجع ذات الصلة: PMID:21220314, PMID:10660600
• يتم التعبير عنه على نطاق واسع بأعلى مستوياته في الخصية والقلب والكلى والعضلات الهيكلية؛ ويوجد شكل إيزو معيب في نشاط الكيناز خاص بالكلى يعمل كمنظم سالب المهيمن على الكيناز كامل الطول. على المستوى تحت الخلوي، يتواجد WNK1 في السيتوبلازم والنواة والمغزل الانقسامي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتكون المستضد المناعي من الأحماض الأمينية الطرفية N من 1 إلى 210 من WNK1 البشري؛ ولا تتداخل هذه المنطقة مع مجال الكيناز (الأحماض الأمينية 221–491)، مما يتيح الكشف عن كل من الأشكال الإيزو كاملة الطول والأشكال الإيزو المحتملة المعيبة في نشاط الكيناز.
• بالنسبة للنشاف الغربي، لاحظ الوزن الجزيئي الكبير المتوقع (~251 كيلو دالتون)؛ استخدم هلام فصل كهربي للأجسام المضادة SDS-PAGE منخفض النسبة المئوية (مثل 6%) ونقل رطب بوقت ممتد لضمان النقل الفعال.
• في التألق المناعي / الكيمياء المناعية الخلوية، يتواجد WNK1 في السيتوبلازم والنواة والمغزل الانقسامي؛ يجب التحقق من صحة التثبيت والنفاذ المناسب لنوع الخلية والحجرة المحددة التي تهتم بها.
• بصفته مضادًا متعدد الأنسجة، قد يحدث تباين بين الدفعات؛ قم بتضمين ضوابط إيجابية (مثل خلايا HeLa و HEK293) وضوابط سلبية في كل تجربة لتأكيد التفاعلية.
• بالنسبة لـ ELISA، فكر في استخدام تنسيق شطيرة مع مضاد التقاط المصدق عليه إذا كنت بحاجة إلى كشف كمي.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المواد

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث حلًا شاملاً لتوريد المواد الخام للتشخيص خارج الجسم، يدعم جميع المراحل من المفهوم إلى التجارب السريرية. يندرج مضاد WNK1 متعدد الأنسجة ضمن محفظتنا الواسعة التي تستهدف الكينازات الرئيسية ومنظمات نقل الأيونات لأبحاث المؤشرات الحيوية لأمراض القلب والأوعية الدموية والكلى. من خلال شبكة التوريد لدينا، نقدم أزواج أضداد مصدقة، وأضداد كتلية أحادية / متعددة الأنسجة بالكميات الكبيرة، والمواد المساعدة، وخدمات توريد المواد الخام للأهداف النادرة، لتسريع تطوير اختباراتك.