مضاد WIPI1 متعدد النسائل من الأرنب لـ WB و ELISA - Q5MNZ9

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة WIPI1 وتوطينه

• هوية البروتين والعائلة: ينتمي WIPI1 (بروتين تفاعلي مع فوسفوإينوسيتيد يحتوي على تكرار نطاق WD 1)، والذي يشار إليه أيضاً ببروتين Atg18 المتجانس أو WIPI 49 kDa، إلى عائلة WIPI من بروتينات تكرار WD40 التي تتفاعل مع فوسفوإينوسيتيدات. هذه التكرارات ضرورية لارتباطه بالدهون ووظائفه الالتهامية الذاتية.
• الوظيفة الأساسية في الالتهام الذاتي: يعد WIPI1 مكوناً رئيسياً في آلية الالتهام الذاتي، وهو مسؤول عن تكوين الجسيمات الالتهامية التي تنقل الحمولة السيتوبلازمية إلى الجسيمات الحالة للتحلل. يرتبط بفوسفاتيديل إينوسيتول 3-فوسفات (PtdIns3P) ويتم تجنيده إلى الشبكة الإندوبلازمية لبدء تجميع العائلة (PubMed:15602573, PubMed:20114074, PubMed:20484055). مراجع ذات صلة:
  • PMID:15602573
  • PMID:20114074
  • PMID:20484055
• تحديد المسار: يعمل WIPI1 في اتجاه مجرى النهر لـ ULK1 و PI3-kinases، حيث يكتشف PtdIns3P المتولد على أغشية الشبكة الإندوبلازمية. ثم يساعد WIPI2 في تجنيد معقد ATG12-ATG5-ATG16L1، والذي يقود بشكل مباشر استطالة غشاء الجسيم الالتهامي الناشئ. هذه الوظيفة حاسمة لكل من الالتهام الذاتي الناتج عن الجوع والكالسيوم وللالتهام الذاتي للميتوكوندريا (PubMed:28561066). مراجع ذات صلة:
  • PMID:28561066
• نقل الدهون وتكوين المعقد: بالتعاون مع WDR45/WIPI4، يعزز WIPI1 ارتباط بروتينات ATG2 (ATG2A أو ATG2B) بأغشية غنية بـ PI3P، وبالتالي يعزز نقل الدهون لتوسيع الجسيم الالتهامي (PubMed:31271352). مراجع ذات صلة:
  • PMID:31271352
• الالتهام الذاتي للغرباء والدفاع المضاد للميكروبات: يشارك WIPI1 في الالتهام الذاتي الانتقائي لل مسببات الأمراض، مثل Staphylococcus aureus، من خلال ابتلاع البكتيريا في حويصلات شبيهة بالجسيمات الالتهامية إيجابية WIPI1 مخصصة للتدمير الليزوزومي (PubMed:22829830). مراجع ذات صلة:
  • PMID:22829830
• أدوار غير التهامية ذاتية: بخلاف الالتهام الذاتي الكنسي، ينظم WIPI1 نضج الميلانوسومات والنسخ للإنزيمات الميلانينية، وهي عملية مستقلة عن مسارات الجوع (PubMed:21317285). قد يكون متورطاً أيضاً في نقل مستقبل مانوز-6-فوسفات (PubMed:15020712). مراجع ذات صلة:
  • PMID:21317285
  • PMID:15020712
• توزيع الأنسجة والتوطين داخل الخلايا: يتم التعبير عن WIPI1 بشكل شائع، مع أعلى مستويات في العضلات الهيكلية والقلب والخصية والبنكرياس والمشيمة، ويتم تنظيمه للأعلى في العديد من خطوط الخلايا الورمية. يتوطن في شبكة جولجي العابرة والجسيمات الداخلية والحويصلات المغطاة بالكلاثرين والهياكل قبل الالتهامية، بالإضافة إلى ارتباطه بالهيكل الخلوي.

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• تصميم المستضد: يغطي المستضد الأحماض الأمينية 187-446 من WIPI1 البشري، وهي منطقة تحتوي على تكرارات WD40 متعددة. هذا الجزء المركزي محفوظ عبر الأنواع، مما يتوافق مع التفاعل المتصالح الملاحظ مع الفأر والجرذ.
• الترحيل الغربي (WB): بالنظر للتعبير العالي لـ WIPI1 في العضلات والقلب والخصية، فإن مستخلصات الأنسجة من هذه المصادر مناسبة على الأرجح كعناصر تحكم إيجابية. الوزن الجزيئي المتوقع هو ~49 kDa، ولكن قد تظهر نطاقات إضافية بسبب التوصيل البديل أو التعديلات ما بعد الترجمة. يُنصح بتضمين خطوة الحجب والتحقق من الخصوصية باستخدام عناصر تحكم siRNA أو knockout.
• تطبيق ELISA: يمكن استخدام هذا المضاد في تنسيقات ELISA غير المباشرة. لتطوير ELISA الشطيري، فكر في إقرانه بمضاد وحيد النسيلة للالتقاط خاص بموقع محدد غير متداخل. تحقق من الصحة باستخدام بروتين WIPI1 المعاد تركيبه (مثل المستضد) أو مستخلصات الخلايا من الخلايا ذات التعبير العالي.
• التفاعل المتصالب واتساق الأنواع: التفاعل المتصالح المبلغ عنه مع الإنسان والفأر والجرذ يعني أن المواقع المستهدفة المعترف بها محفوظة. ومع ذلك، يوصى بإجراء تجارب ترحيل غربية تجريبية مع مستخلصات من الأنواع الثلاثة للتأكد من التفاعل وأنماط النطاقات.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تكرس CamelBio تمكين مصنعي التشخيصات والباحثين بمحفظة كاملة من المواد الخام لـ IVD، بدءاً من أزواج الأضداد التي تم التحقق من صحتها وحتى الكواشف المساعدة. يدعم مضاد WIPI1 متعدد النسائل الخاص بنا أبحاث الالتهام الذاتي وتطوير المقايسات، ونحن نقدم خدمات تكميلية مثل الإنتاج أحادي النسيلة المخصص وتوريد الكواشف بالجملة لتبسيط سير العمل الخاص بك. سواء كنت بحاجة إلى أداء متسابق من دفعة إلى دفعة أو مساعدة في التوسيع، فإن CamelBio تسد الفجوة بين المفهوم والتطبيق السريري.