جسم مضاد وحيد النسيلة ضد الفينكولين لـ WB و IF-P و ELISA - P18206

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة الفينكولين وموقعه الخلوي

• الفينكولين هو بروتين مرتبط بالأكتين محفوظ جدًا يربط بين الإنتجرينات والكاذرينات والهيكل الخلوي الأكتيني، ويلعب أدوارًا رئيسية في كل من الالتصاق بين الخلية والمطرس وبين الخلايا بعضها ببعض.
• يتشكل النمط الإيزو المحدد للعضلات، المعروف باسم الميتافينكولين (MV)، عن طريق الربط البديل ويحتوي على إكسون إضافي؛ ويتم التعبير عنه بشكل أساسي في العضلات القلبية والهيكلية.
• يتمركز الفينكولين في الالتصاقات البؤرية بين الخلية والمطرس، وصلات الالتصاق بين الخلايا، والمنطقة المحيطة بالنواة، بالإضافة إلى الهياكل المتخصصة مثل البودوزومات وغمد الليف العضلي.
• يخضع البروتين لتعديدات تعديلات ما بعد الترجمة، بما في ذلك الفسفرة والأسيتلة والبالميتوية، التي تنظم تنشيطه وتفاعلاته البروتينية واستهدافه للغشاء الخلوي.
• يعمل الفينكولين كمستشعر ميكانيكي؛ التغيرات التوترية في التركيب البنائي تكشف عن مواقع ارتباط خفية للتالين والأكتين الخيطي، مما يقوي معقدات الالتصاق.
• باعتباره مكونًا رئيسيًا في معقد الكاذرين-كاتينين، ينظم الفينكولين التعبير السطحي لكاذرين E ويعزز الاستشعار الميكانيكي في وصلات الالتصاق، مما يؤثر على تكوين الأنسجة وتوازنها.
• تماشياً مع أدوارها الأساسية في الالتصاق ونقل الإشارات الميكانيكية، ترتبط الطفرات في جين VCL باعتلال عضلة القلب التمددي (CMD1W) واعتلال عضلة القلب الضخامي (CMH15).
• بالإضافة إلى ذلك، يشارك الفينكولين في مورفولوجيا الخلية وهجرتها وغزوها، كما يتضح من تجنيده إلى البودوزومات وتأثيره على ديناميكيات الصفيحة الحرشفية.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد اصطناعي يتوافق مع منطقة الطرف الكربوني (الأحماض الأمينية 800-900) لفينكولين الإنسان؛ هذه المنطقة محفوظة لدى الإنسان والفأر والجرذ، وهو ما يفسر التفاعل المتقاطع المبلغ عنه.
• في النشاف الغربي (Western blotting)، يهاجر الفينكولين عند وزن جزيئي ظاهر يبلغ حوالي 124 كيلو دالتون؛ استخدم نسب هلام مناسبة (مثل 8% SDS-PAGE) وتحقق من كفاءة النقل باستخدام تلطيخ البروتين الكلي.
• في المناعة الفلورية (IF-P)، ضع في اعتبارك ظروف التثبيت والنفاذ التي تحافظ على بنية الالتصاقات البؤرية وصلات الالتصاق (مثل 4% PFA متبوعًا بـ 0.1% تريتون X-100). يمكن أن يؤكد التلوين المشترك مع علامات الباكسيلين أو الأكتين الخيطي على الموقع.
• عند إجراء اختبار ELISA، قم بمعايرة الجسم المضاد مقابل ببتيد المستضد المناعي والبروتين الأصلي لتحديد التركيزات المثلى؛ يمكن تقييم الامتصاص المتقاطع إذا لوحظ خلفية عالية في المصفوفات المعقدة.
• بما أن الفينكولين بروتين منتشر في كل مكان، فإن تضمين ضوابط تحميل مناسبة (مثل GAPDH وβ-أكتين) أمر ضروري للتحليلات الكمية.
• بالنسبة للدراسات التي تشمل الأنسجة العضلية، لاحظ أن الجسم المضاد قد يتعرف على كل من نمطي الفينكولين والميتافينكولين الإيزو؛ يهاجر الأخير عند وزن أعلى قليلاً يبلغ حوالي 150 كيلو دالتون.

CamelBio: جسرك الشامل لشراء المستلزمات البيولوجية

تقدم CamelBio حلاً شاملاً متكاملاً للمواد الخام للتشخيص في المختبر، حيث يربط بين مصنعي التشخيص والمختبرات البحثية بأكثر من 200 ألف منتج. للباحثين المتخصصين في التصاق الخلايا والبيولوجيا الميكانيكية واضطرابات الهيكل الخلوي، نوفر أجسامًا مضادة وحيدة النسيلة مصادق عليها وبروتينات مؤتلفة وكواشف مساعدة لتسريع مسار عملك. استفد من خبرتنا في التوريد المخصص والتوريد بالجملة لتلبية متطلبات مشروعك المحددة.