مضاد ثلاثي ميثيل-هستون H3-K9 (Q16695/P68431) أحادي النسيلة من الأرنب لدراسة التخلق

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين هستون H3

• الوظيفة: هستون H3 هو مكون أساسي للجسيم النووي، حيث يلف ويضغط الحمض النووي في الكروماتين لتنظيم النسخ، وإصلاح الحمض النووي، والتضاعف، واستقرار الكروموسومات. تعدلات ما بعد الترجمة للهستونات، المعروفة باسم "كود الهستون"، تعدل بنية الكروماتين والتعبير الجيني.
• التوطين داخل الخلية: يتوطن بشكل أساسي في النواة ويرتبط بالكروموسومات طوال دورة الخلية.
• النوعية النسيجية: متغير هستون H3 المسمى H3.1t (Q16695) يُعبر عنه تحديداً في خلايا الخصية، بينما يُعبر عن H3.1 القياسي (P68431) في جميع الأنسجة بشكل واسع.
• التعديلات ما بعد الترجمة: يخضع هستون H3 لمجموعة واسعة من التعديلات التساهمية، حيث يعتبر اللايسين 9 موقعاً تنظيمياً رئيسياً. يمكن أن يخضع اللايسين 9 للسترولين (تحويل الأرجينين إلى سترولين) PMID:15345777 PMID:16567635 وأرجينين ثنائي الميثيل متماثل. بالإضافة إلى ذلك، فإن ثلاثية الميثيل للايسين 9 (H3K9me3) هي علامة كروماتين كابتة موصوفة جيداً. يكشف هذا الجسم المضاد تحديداً عن هستون H3 المثلي بميثيل في اللايسين 9. مراجع ذات صلة: PMID:15345777, PMID:16567635

التوجيه التجريبي ونصائح تقنية

• تصميم المستضد: تم إنتاج الجسم المضاد ضد ببتيد اصطناعي ثلاثي المثيل يشمل اللايسين 9 من هستون H3 البشري. عند استخدام هذا الجسم المضاد، فكر في التحقق من خصوصيته عن طريق الاختبار مقابل ببتيد H3 غير معدل أو ببتيدات تحمل تعديلات بديلة (مثل أحادي الميثيل، ثنائي الميثيل، أسيتيل) لتأكيد الانتقائية للحالة ثلاثية المثيلة.
• الوتيرن بلوت (WB) والوتيرن بلوت النقطي (DB): بالنسبة لـ WB، استخدم بروتوكولات استخلاص الهستون القياسية (الاستخلاص الحمضي أو عالي الملوحة) لإثراء البروتينات القاعدية. تأكد من الحظر المناسب وتخفيف الجسم المضاد لتقليل الارتباط غير النوعي. بالنسبة لـ DB، تحقق من التفاعل المتقاطع مع تعديلات الهستون الأخرى إذا لزم الأمر.
• المناعة المناعية/المناعة الخلوية (IF/ICC): قم بتحسين ظروف الاختراق والتثبيت للحفاظ على شكل النواة وإمكانية الوصول للمستضد. التلوين المشترك مع DAPI يمكن أن يساعد في تأكيد التوطين النووي.
• ELISA: استخدم للفحص عالي الإنتاجية؛ فكر في طلاء الأطباق ببتيدات مثيلة مقابل غير مثيلة لتقييم الخصوصية.
• ترسيب مناعة الكروماتين (ChIP, ChIP-seq) و CUT&Tag: هذا الجسم المضاد مناسب لإثراء الكروماتين الموسوم بـ H3K9me3 القائم على ChIP. يمكن استخدام ChIP بالتوصيل المتقاطع (X-ChIP) أو ChIP الأصلي (N-ChIP)؛ تحقق من مواقع الجينوم التحكمية الإيجابية والسلبية (مثل الكروماتين المتغاير مقابل المروجات النشطة). بالنسبة لـ CUT&Tag، اتبع البروتوكولات المنشورة للتطبيقات منخفضة المدخلات أو الخلية الواحدة. تحقق من صحة الجسم المضاد في نظام العينة ذي الصلة قبل التجارب واسعة النطاق.

كاميل بايو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

توفر كاميل بايو لمصنعي التشخيص، والمختبرات، ومعاهد البحث وصولاً شاملاً في نقطة واحدة إلى المواد الخام لتشخيص المختبر (IVD)، والخدمات التقنية، والاستشارات—تغطي كل مرحلة من المفهوم إلى العيادة. لأبحاث التخلق والكروماتين، نقدم أزواجاً من الأجسام المضادة الموثقة، وأجساماً مضادة أحادية/متعددة النسيلة محسنة بما في ذلك هذا المنتج المضاد لثلاثي ميثيل-هستون H3-K9، والمواد الكيميائية المساعدة بالجملة. تمتد خبرتنا في التوريد إلى المواد الخام للأهداف النادرة، مما يمكن تطوير IVD من اكتشاف المؤشرات الحيوية وحتى الإنتاج التجاري.