جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة ضد TRIM32 لـ WB، ELISA - Q13049

مواصفات ومعلمات المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين TRIM32

• TRIM32 (بروتين يحتوي على النمط الثلاثي 32) هو ليجاز يوبيكويتين-بروتين E3 بوزن 72 كيلو دالتون، مشفر بواسطة جين TRIM32، المعروف أيضًا باسم HT2A، BBS11، TATIP، LGMD2H، و LGMDR8. ينتمي إلى عائلة TRIM التي تتميز بمجالات إصبع رينج (RING)، وصندوق B (B-box)، ومجالات ملفوفة على شكل ملف (coiled-coil).
• كليغاز يوبيكويتين E3، يقوم TRIM32 بتوسيط عملية تعدد اليوبيكويتين المرتبطة بـ 'لايسين-48' و'لايسين-63' لمختلف الركائز. على سبيل المثال، يعزز الارتباط باليوبيكويتين من نوع 'لايسين-63' لبروتين STING1، مما يسهل تفاعل STING1-TBK1 وتحريض IFN-β المصاحب. مراجع ذات صلة: PMID:22745133
• ينظم TRIM32 الالتهام الذاتي بشكل إيجابي من خلال آليات متعددة: فهو يشكل سلاسل متعددة من اليوبيكويتين مرتبطة بـ 'لايسين-63' غير مرتبطة (unanchored) لتفعيل ULK1 في مركب مع AMBRA1، وتحت الإجهاد الأيضي، يقوم TRIM32 المفسفر بواسطة CHK2 بربط اليوبيكويتين لبروتين ATG7 عند 'لايسين-45' لبدء الالتهام الذاتي. مراجع ذات صلة: PMID:31123703, PMID:37943659
• في المناعة الفطرية، يظهر TRIM32 وظائف تنظيمية إيجابية وسلبية. فهو يحفز التحلل الذاتي (autophagic degradation) لبروتين TICAM1 (TRIF) لتخفيف الاستجابات الالتهابية بوساطة TLR3/4، بينما في العدوى البكتيرية، يعزز التخلص من المتفطرة السلية (Mycobacterium tuberculosis) بوساطة الالتهام الذاتي في البلاعم. مراجع ذات صلة: PMID:28898289, PMID:37543647
• يتوضع TRIM32 في السيتوبلازم، والميتوكوندريا، والشبكة الإندوبلازمية، ويعبر عنه في الطحال، والغدة الصعترية، والبروستاتا، والخصية، والمبيض، والأمعاء، والقولون، والعضلات الهيكلية، بما يتوافق مع دوره في وظائف المناعة والعضلات.
• ترتبط الطفرات في جين TRIM32 بأمراض بشرية تشمل متلازمة بارديت-بيدل (BBS11)، والحثل العضلي الحزامي الطرفي من النوع 2H (LGMD2H/LGMDR8)، والإعاقة الذهنية، مما يبرز أهميته في التطور واستتباب الأنسجة.
• يتعرض البروتين لتعديلات ما بعد الترجمة مثل الأسيتلة والفسفرة؛ تعتبر الفسفرة بوساطة CHK2 في بقايا السيرين تحت الإجهاد الأيضي أمرًا بالغ الأهمية لوظيفة الالتهام الذاتي الخاصة به. مراجع ذات صلة: PMID:37943659
• تم تحديد TRIM32 في الأصل كبروتين متفاعل مع Tat (Tat-interacting protein) وقد يتوسط النشاط البيولوجي لبروتين Tat لفيروس نقص المناعة البشرية-1 في الجسم الحي، كما يتفاعل أيضًا مع بروتينات Tat لفيروس نقص المناعة البشرية-2 و EIAV. مراجع ذات صلة: PMID:7778269

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع الأحماض الأمينية 1-280 الطرفية N لبروتين TRIM32 البشري، والتي تشمل مجالات RING و B-box. هذه المنطقة محفوظة نسبيًا؛ لذلك من المتوقع أن يتفاعل الجسم المضاد مع بروتين TRIM32 للفأر والجرذ كما هو موضح. بالنسبة لاختبار البقع الغربية (Western blotting)، من المتوقع ظهور شريط رئيسي قرب 72 كيلو دالتون في محاليل تحلل الأنسجة من الإنسان أو الفأر أو الجرذ مثل العضلات الهيكلية أو الدماغ أو الطحال. يُنظر في استخدام ضوابط إيجابية وسلبية مناسبة للتحقق من النوعية.
• لتطبيقات ELISA، قد توفر الطبيعة متعددة النسيلة لهذا الجسم المضاد حساسية معززة للالتقاط أو الكشف. ومع ذلك، نوصي بتحسين ظروف الطلاء (coating) والكشف في نموذج الاختبار الخاص بك، والتحقق من الأداء باستخدام البروتين المؤتلف أو عينات إيجابية معروفة.
• نظرًا لتورط TRIM32 في الالتهام الذاتي وإشارات المناعة، فإن معالجة الخلايا بمحفزات محددة (مثل الإجهاد الأيضي، العدوى الفيروسية) قد تغير مستويات التعبير أو التعديلات ما بعد الترجمة، مما قد يؤثر على الكشف. ضع هذه المتغيرات في الاعتبار عند تصميم التجارب.

كاميل بيو: جسر التوريد الشامل الخاص بك

كاميل بيو هي شريكك الشامل لتوريد المواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، داعمًا لمصنعي التشخيص، والمختبرات البحثية، والمطورين السريريين من المفهوم إلى العيادة. نقدم محفظة شاملة تشمل أزواج الأجسام المضادة المصدق عليها، والأجسام المضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والكواشف المساعدة بكميات كبيرة، والبحث المخصص عن الأهداف النادرة. لمشاريع TRIM32 ذات الصلة - التي تشمل علم المناعة، وعلم الأعصاب، والحثل العضلي، وتشخيص الأمراض النادرة - تضمن سلسلة التوريد والاستشارات الفنية لدينا حصولك على المواد المناسبة في كل مرحلة.