جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة مضاد لمستقبل TGF بيتا الثاني (TGFBR2) للاستخدام في WB، IHC-P، IF/ICC، ELISA - P37173

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين مستقبل TGF-beta من النوع الثاني

• هوية المستقبل وبنائه: مستقبل TGF-beta من النوع الثاني (TGFBR2) هو كيناز سيرين/ثريونين عبر الغشاء من النوع الأول ذو المسار الواحد، ويعمل كمستقبل عالي التقارب لسيتوكينات TGF-beta (TGFB1، TGFB2، وTGFB3). يتم ترميزه بواسطة جين TGFBR2 على الكروموسوم البشري 3، حيث ينتج التضفير البديل أشكالًا متعددة، بعضها مرتبط بسرطان القولون والمستقيم الوراثي غير السلائلي، وتمدد الأوعية الدموية الأبهري، والتحام الدروز الباكر للجمجمة.
• إشارات SMAD التقليدية المعتمدة: عند ارتباط الربيطة، يقترن TGFBR2 بمستقبلين من النوع الأول (TGFBR1) لتشكيل معقد رباعي غير متجانس. يقوم مجال الكيناز النشط باستمرار في TGFBR2 بفسفرة TGFBR1، والذي بدوره ينشط SMAD2 وSMAD3. تشكل بروتينات SMAD المفسفرة معقدًا مع SMAD4 وتنتقل إلى النواة لتنظيم نسخ الجينات المستهدفة لـ TGF-beta، مما يتحكم في توقف دورة الخلية، والموت الخلوي المبرمج، والتمايز، وإنتاج المصفوفة خارج الخلية.
• الإشارات غير التقليدية: بالإضافة إلى مسار SMAD التقليدي، يشارك TGFBR2 في مسارات مستقلة عن SMAD، بما في ذلك مسارات كيناز MAP، وPI3K/AKT، وبروتينات GTPase الشبيهة بـ Rho، لتعديل هجرة الخلايا، وتكاثرها، وبقائها.
• ارتباط الربيطة والتقارب: يرتبط TGFBR2 بـ TGFB1، وTGFB2، وTGFB3 في نطاق التقارب البيكومولاري دون الحاجة إلى مستقبلات مساعدة، مما يسهل الخطوة الأولية في نقل إشارة TGF-beta.
• التوطين تحت الخلوي: يتوطن TGFBR2 بشكل أساسي في غشاء الخلية وفي مناطق الغشاء المتخصصة (rafts)، مع وجود دليل على شكل مفرز يتم اكتشافه في البيئات خارج الخلية، بما يتوافق مع دوره في التواصل بين الخلايا.
• التعديلات ما بعد الترجمة: المستقبل هو بروتين سكري يحتوي على روابط ثنائية الكبريت داخل الجزيئية متعددة ضرورية لبنائه الثلاثي. يخضع للفسفرة في بقايا السيرين والثريونين داخل مجال الكيناز والذيل السيتوبلازمي، مما يعدل نشاطه والإشارات اللاحقة.
• ملخص الكلمات المفتاحية: يسجل UniProt إشاراته إلى مشاركته في الموت الخلوي المبرمج، وتنظيم النمو، والتمايز، والارتباطات المرضية بما في ذلك تمدد الأوعية الدموية الأبهري، والتحام الدروز الباكر للجمجمة، وسرطان القولون والمستقيم الوراثي غير السلائلي.

التوجيهات التجريبية والنصائح الفنية

• تصميم المستضد المناعي: تم إنتاج الجسم المضاد ضد بروتين مؤتلف يشمل الأحماض الأمينية 23-280 من TGFBR2 البشري، والذي يغطي مجال الربط للربائط خارج الخلية الطرفي N. هذه المنطقة محفوظة نسبيًا عبر الإنسان والفأر والجرذ، مما يفسر التفاعل المتقاطع الملاحظ؛ ومع ذلك، قد تؤثر أنماط الارتباط بالسكريات الذاتية على إمكانية الوصول إلى الحاتمة المحددة في العينات الأصلية.
• اعتبارات لطخة ويسترن (WB): الوزن الجزيئي المتوقع لـ TGFBR2 هو حوالي 65 كيلو دالتون؛ ومع ذلك، بسبب الارتباط بالسكريات، قد تلاحظ تغيرًا في شريط البروتين. استخدم ظروف اختزال للحصول على دقة واضحة. تحقق من الصحة في محاليل التحكم الإيجابية (مثل HeLa، A549) المعروفة بتعبيرها عن TGFBR2.
• نصائح للكيمياء النسيجية المناعية (IHC-P): بالنسبة للشرائط المضمنة بالبارافين، قم بتحسين استرجاع المستضد (مثل محلول سيترات pH 6.0 أو EDTA pH 9.0) وفكر في اختبار تركيزات متعددة من الجسم المضاد الأولي (النطاق النموذجي 1:50–1:500). من المتوقع ظهور تلطيخ غشائي؛ قد يساعد تضمين مثبط للفوسفاتيز في محاليل الحجب في الحفاظ على الحواتم المعتمدة على الفسفرة.
• توجيهات للومضان مناعي (IF/ICC): نظرًا لأن TGFBR2 هو مستقبل عبر الغشاء، فإن النفاذية باستخدام Triton X-100 أو السابونين ضرورية للكشف عن الحواتم داخل الخلوية. يوصى بالتلوين المشترك مع علامات الغشاء أو العضيات لتأكيد التوطين. قد يتعرف الجسم المضاد أيضًا على الشكل المفرز، لذا يُنصح بالتثبيت الدقيق لتجنب الخلفية خارج الخلية.
• استخدام ELISA: يمكن استكشاف هذا الجسم المضاد متعدد النسيلة ككاشف تثبيت أو كشف في صيغ ELISA الساندويتش. قم بإجراء معايرة متقاطعة لتحديد التركيزات المثلى للتغطية (1–10 ميكروغرام/مل) والكشف، وتحقق من الصحة باستخدام معايير بروتين TGFBR2 المؤتلف.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

تقدم CamelBio تجربة مبسطة مع مورد واحد لصانعي التشخيصات والمختبرات البحثية التي تبحث عن مواد أولية عالية الجودة لدراسات إشارات TGF-beta، والتليف، وتطوير مقايسات علم الأورام. نحن نوفر أزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، وأجسام مضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسيلة محسنة مثل جسم TGFBR2 المضاد للأرنب متعدد النسيلة هذا، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة، وتوريد مواد أولية مخصصة. سواء كنت تقوم بتوسيع نطاق مقايسة مناعية موجودة أو تطوير لوحة جديدة للكشف عن المؤشرات الحيوية، تخدمك CamelBio كشريك متكامل من الفكرة إلى العيادة.