الأجسام المضادة الأرنب متعددة النسائل المضادة لـ STIM1® للاستخدام في WB، وIHC-P، وIP، وELISA - Q13586

مواصفات ومعايير المنتج الأساسية

الخلفية البيولوجية: وظيفة STIM1 وتوطينه

• يعمل STIM1 كمستشعر لأيونات الكالسيوم (Ca²⁺) يتحكم في قناتين رئيسيتين داخليتين لتصحيح أيونات الكالسيوم في غشاء البلازما: قنوات الكالسيوم المنشطة بالإفراز (CRAC) والقنوات الانتقائية للكالسيوم المنظمة بحمض الأراكيدونيك (ARC)، مما يلعبه دورًا محوريًا في توازن الكالسيوم. مراجع ذات صلة: PMID:15866891 PMID:16005298 PMID:16208375

• عند استنفاد مخازن الكالسيوم في الشبكة الإندوبلازمية (ER)، يتجمع STIM1 في أوليغوميرات وينتقل من غشاء الشبكة الإندوبلازمية إلى مناطق التقاء الشبكة الإندوبلازمية وغشاء البلازما، حيث ينشط مباشرة الوحدات الفرعية لقنوات CRAC وهي ORAI1 وORAI2 وORAI3 لتوليد دخول مستدام ومتذبذب لأيونات الكالسيوم. مراجع ذات صلة: PMID:16537481 PMID:32415068

• يتورط STIM1 في تكوين المينا، مما يسلط الضوء على دوره في عمليات التكلس الخاصة بالأنسجة. مراجع ذات صلة: PMID:24621671

• ينظم البروتين سلبًا استجابة الإنترفيرون من النوع الأول عن طريق احتجاز محول الإشارة STING في الشبكة الإندوبلازمية، مما يمنع تنشيطه وإشارات المناعة اللاحقة. مراجع ذات صلة: PMID:30643259

• يتم التعبير عن STIM1 بشكل واسع في خلايا بشرية أولية مختلفة وسلالات خلايا ورمية، مما يؤكد دوره الأساسي في فسيولوجيا الخلية.

• على المستوى تحت الخلوي، يتوضع STIM1 في غشاء الخلية، وغشاء الشبكة الإندوبلازمية، والسيتوبلازم، والهيكل الخلوي، والشبكة الساركوبلازمية، وهو ما يتوافق مع وظيفته الديناميكية في التنقل.

• تشمل التعديلات ما بعد الترجعة الارتباط بالجليكوزيل من النوع N والفوسفرة، والتي قد تنظم ثباته ونشاطه. يحتوي البروتين على ببتيد إشارة، ولفيفة عبر غشائية واحدة، ومجال ملفوف حلزونيًا في السيتوبلازم.

• يولد التضفير البديل عدة متشاكلات (أيزوفورمات)، والتي قد تظهر تعبيرًا خاصًا بنسيج معين أو خصائص وظيفية مميزة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يمتد المستضد المناعي على الأحماض الأمينية 530–685، وهي منطقة تقع ضمن القطعة الطرفية C السيتوبلازمية لـ STIM1. قد يفضل هذا التصميم كشف البروتين كامل الطول وبعض المتغيرات الناتجة عن التضفير البديل، ولكنه قد يفوت المتشاكلات التي تفتقر إلى هذه المنطقة. تحقق من ذلك في خط الخلية المستهدف أو النسيج الخاص بك.

• لطخة ويسترن، من المتوقع ظهور شريط رئيسي قرب 77 كيلو دالتون، على الرغم من أن شرائط إضافية قد تظهر بسبب الارتباط بالجليكوزيل أو التضفير البديل. استخدم ضوابط تحميل مناسبة وتأكد من النوعية باستخدام ضوابط سلبية (مثل إسكات الجين بواسطة siRNA أو حذفه بواسطة CRISPR إذا كان متاحًا).

• في الكيمياء النسيجية المناعية (IHC-P)، تحتاج طريقة استرجاع المستضد وتخفيف الجسم المضاد إلى التحسين، حيث أن التوطين داخل الخلوي لـ STIM1 قد يتطلب النفاذية. قم بتضمين ضوابط نظيرة النوع المناسبة وتحقق من صبغ النسيج بأنسجة إيجابية وسلبية معروفة.

• للترسيب المناعي (IP)، قم بحضانة الجسم المضاد مسبقًا مع حبيبات البروتين A/G للالتقاط الفعال، وفكر في الربط المتقاطع لمنع تداخل السلاسل الثقيلة/الخفيفة في لطخة ويسترن اللاحقة. تأكد من الترسيب المشترك لشركاء التفاعل المعروفين مثل ORAI1.

• لاختبار ELISA، قم بمعايرة الجسم المضاد ضد المستضد المناعي أو مستخلص الخلية لتحديد الظروف المثلى للتغطية والكشف. قم بإقرانه بجسم مضاد للكشف متطابق أو جسم مضاد ثانوي مترافق لإعدادات مقايسة ELISA الساندويتش.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

CamelBio هو بوابتك المتكاملة للحصول على مواد أولية عالية الجودة للتشخيص المختبري، حيث نربط مصنعي التشخيصات والمختبرات والمعاهد البحثية بمحاليل حاسمة لأبحاث إشارات الكالسيوم وقنوات الأيونات. إلى جانب هذا الجسم المضاد لـ STIM1، نقدم أزواج أجسام مضادة معتمدة، وأجسام مضادة أحادية النسيلة مهجنة محسنة، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة لتبسيط تطوير مقايساتك. تتيح لك شبكة التوريد الخاصة بنا الوصول السريع إلى المواد الأولية ذات الأهداف النادرة، لدعم مشاريعك من الفكرة إلى التطبيق السريري.