مضاد متعدد النسيلة ضد Smad4 للتطبيقات WB و IF/ICC و IHC-P و ELISA - Q13485

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة Smad4 وموقعه الخلوي

• SMAD4 هو الوسيط المشترك (co-SMAD) لنقل الإشارات لعائلة TGF-β الفائقة. يشكل مركبًا ثلاثي وحدات غير متجانسة مع بروتينات SMAD المنظمة بواسطة المستقبلات (مثل SMAD2/3) في النواة، وهو أمر أساسي للتنظيم النسخي الذي يوسيطه TGF-β.
  المراجع ذات الصلة:
  PMID:25514493
• يعمل كمنشط نسخي مساعد: يسهل SMAD4 ارتباط الحمض النووي لمركب SMAD2/SMAD4/FAST-1 ويوفر مجال تنشيط للنسخ الذي يقوده SMAD1 أو SMAD2. كما يشارك في مركب عامل النسخ AP-1 (SMAD3/SMAD4/JUN/FOS) لتحفيز استجابات TGF-β بشكل تآزري.
• يعمل كمثبط للورم؛ يعد فقدان أو تعطيل SMAD4 حدثًا متكررًا في سرطان الأقنية البنكرياسية وسرطان القولون والمستقيم وغيره من الأورام الخبيثة، مما يؤكد دوره في التحكم في النمو.
• في فيزيولوجيا العضلات، يعمل SMAD4 كمفتاح عقدي: عندما يتم تجنيده بواسطة الميوستاتين (MSTN)، يعزز الضمور عبر إشارات SMAD2/4؛ وعند تحريره، ينتقل إلى تضخم العضلات بوساطة BMP عبر SMAD1/5/8 (بحسب التشابه).
• ينظم SMAD4 بشكل إيجابي نشاط كيناز PDPK1 من خلال تعزيز انفصاله عن البروتين المثبط 14-3-3 YWHAQ.
• يوجد في كل من السيتوبلازم والنواة؛ ويتم تحفيز انتقاله إلى النواة عند تنشيط TGF-β أو BMP، حيث يتراكم في المركبات النشطة نسخيًا.
• يحتوي على مجال MH1 الطرفي N لربط الحمض النووي بعناصر الارتباط SBE (التسلسل 5'-GTCT/AGAC-3') ومجال MH2 الطرفي C للتفاعل مع المستقبلات وتكوين الأوليغومرات والتنشيط النسخي. يخضع البروتين للاستيلation والفسفرة واليوبيكيتينة.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع مجال MH2 الطرفي C (الأحماض الأمينية 320–552)، وهو مجال محفوظ بدرجة عالية بين الإنسان والفأر والجرذ، بما يتوافق مع التفاعل المتبادل المذكور. يوصى بإجراء محاذاة التسلسل للأنواع الجديدة.
• بالنسبة للتلطخ الغربي (WB)، من المتوقع ظهور نطاق عند كتلة 60 كيلو دالتون تقريبًا. استخدم ضوابط تحميل مناسبة وتحقق من النوعية في محللات الخلايا المعالجة بـ TGF-β مقارنة بالغير معالجة.
• بالنسبة للمناعة الفلورية / الكيمياء المناعية الخلوية (IF/ICC) والكيمياء المناعية النسيجية (IHC-P)، قد تظهر تلطيخًا نوويًا أو سيتوبلازميًا اعتمادًا على سياق الإشارات. قم بتضمين ضوابط سلبية مناسبة (مثل خطوط الخلايا المضروبة الجين أو الببتيد الحاجز) للتحقق من خصوصية الإشارة.
• بالنسبة لتطبيقات ELISA، قم بتحسين ظروف المستضد المطلي والكشف. يمكن اقتران هذا الضداد بأضداد أحادية النسيلة تستهدف حلقات مختلفة لتطوير أنظمة ELISA معقمة لقياس كمية SMAD4.
• نظرًا لطبيعة الضداد متعدد النسيلة، يجب التحقق من الاتساق بين الدفعات في الفحوصات الكمية الحرجة. فكر في استخدام تقنية الأضداد المؤتلفة إذا كان التكرار هو الاهتمام الرئيسي.

CamelBio: جسرك الشامل للحصول على الكواشف البيولوجية

توفر CamelBio للباحثين ومصنعي التشخيص وصولًا موثوقًا إلى كواشف مسارات الإشارات الحرجة مثل أضداد Smad4. بدءًا من أزواج الأضداد الموثقة وحتى الكواشف الإضافية بكميات كبيرة، تدعم محفظتنا تطوير فحوصات قوية لتحليل مسار TGF-β/BMP وأبحاث السرطان. كما نقدم خدمات توريد مخصصة للأهداف النادرة، مما يتيح التقدم السلس من الفكرة إلى المرحلة السريرية.