جسم مضاد متعدد النسائل ضد 3CLpro لفيروس كورونا المستجد المسبب لكوفيد-19 لتقنيات النقل الفطري (WB)، التألق المناعي/التألق المناعي الخلوي (IF/ICC)، والمقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA) - P0DTC2

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين 3CLpro لفيروس كورونا المستجد

• البروتين السكري الشائك (S) هو بروتين اندماج فيروسي من الفئة الأولى يتوسط دخول فيروس كورونا المستجد إلى الخلايا المضيفة. يتم تصنيعه كسلائف أولية ثم ينقم بروتينيًا إلى وحدتين فرعيتين S1 و S2.
• تحتوي الوحدة الفرعية S1 على مجال ارتباط المستقبلات (RBD) الذي يرتبط بمستقبل ACE2 البشري (إنزيم تحويل الأنجيوتنسين 2) لتسهيل الارتباط الفيروسي بالخلايا المضيفة. المراجع ذات الصلة: PMID:32142651 PMID:32155444 PMID:33607086
• تستخدم مسارات الدخول البديلة البروتين النيروبيلين 1 (NRP1) و NRP2 والإنتيجرينات أو ASGR1، الأمر الذي قد يساهم في انحياز الأنسجة، خاصة في الخلايا الظهارية الشمية التي تعبر عن مستويات منخفضة من ACE2. المراجع ذات الصلة: PMID:33082294 PMID:33082293 PMID:35150743 PMID:34837059
• تتوسط الوحدة الفرعية S2 اندماج الأغشية عبر إعادة ترتيب توافقي يعتمد على المفصلات، حيث تنتقل من حالة ما قبل الاندماج إلى حالة دبوسية ما بعد الاندماج، وتتطلب الانشقاق في موقع S2' بواسطة البروتيازات المضيفة مثل TMPRSS2 أو الكاثيبسين L. المراجع ذات الصلة: PMID:32142651 PMID:32703818 PMID:34159616 PMID:34561887
• يحتوي مجال الساق في البروتين S على ثلاث مفصلات، مما يوفر لرأس ارتباط المستقبلات حركة اتجاهية ملحوظة، الأمر الذي قد يسهل التهرب المناعي. المراجع ذات الصلة: PMID:32817270
• يشمل التوطين تحت الخلوي غلاف الفيروس، وغشاء الحيز الوسيط بين الشبكة الإندوبلازمية وجهاز جولجي في المضيف (ERGIC)، وغشاء الخلية المضيفة، وهو ما يتوافق مع أدواره في التجميع والخروج والدخول.
• البروتين عالي الغليكوزيلation ويحتوي على روابط ثاني كبريتيد محفوظة ومناطق ملفوفة ومجالات عبر الغشاء؛ كما أنه يظهر خصائص مستضد فائق ويساهم في التهرب المناعي.
• يبلغ وزنه الجزيئي حوالي 141 كيلو دالتون، وهو هدف رئيسي للأجسام المضادة المحايدة، والفحوصات التشخيصية، وتطوير اللقاحات.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• نظرًا لأن المناعة المستحثة هي جزء مؤتلف من 3CLpro (الأحماض الأمينية 1-306)، استخدم ضوابط إيجابية مناسبة مثل محللات الخلايا المصابة بفيروس كورونا المستجد أو 3CLpro المؤتلف المنقى للتحقق من النوعية.
• بالنسبة للنقل الفطري (Western blotting)، فكر في تحسين ظروف الحجب وتخفيف الجسم المضاد؛ من المتوقع ظهور نطاق عند كتلة 34 كيلو دالتون تقريبًا (الشكل الكامل لـ 3CLpro)، لكن المورد يذكر نطاقًا عند 141 كيلو دالتون (يرجح أنه يقابل بروتين سبايك). تحقق من النطاق المكتشف باستخدام علامات الوزن الجزيئي ومستضدات ضابطة مناسبة.
• في تجارب التألق المناعي/المناعة الخلوية (IF/ICC)، قم بتضمين خطوات النفاذية للكشف عن البروتياز داخل الخلايا واستخدام التلوين المضاد بعلامات العضيات لتقييم التوطين تحت الخلوي.
• بالنسبة للمقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم (ELISA)، تسمح الطبيعة متعددة النسائل باستخدامه كجسم مضاد التقاط وكشف في تنسيقات الساندويتش. قم بالاقتران مع أجسام مضادة أحادية النسائل ضد مستضدات مميزة لتحسين النوعية ونسبة الإشارة إلى الضوضاء.
• ضع في اعتبارك التفاعل المتبادل المحتمل مع 3CLpro من فيروسات كورونا الأخرى؛ قد يساعد محاذاة التسلسل وفحوصات التثبيط التنافسي في تأكيد النوعية.
• قم دائمًا بالتحقق من صلاحية الجسم المضاد في نظامك التجريبي المحدد، لأن الأداء قد يختلف باختلاف نوع العينة وطرق التثبيت.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تعمل CamelBio كشريك مصادر شامل للمواد الخام للتشخيص المختبري (IVD)، حيث تربط بين مصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث بأزواج أجسام مضادة موثقة، وأجسام مضادة أحادية ومتعددة النسائل محسنة، ومواد مساعدة بكميات كبيرة. تشمل محفظتنا منتجات الأهداف النادرة مثل جسم مضاد SARS-CoV-2 3CLpro، المصمم خصيصًا لأبحاث الفيروسات وتطوير التشخيص. سواء كنت بحاجة إلى توليد أجسام مضادة مخصصة، أو إمداد قابل للتوسع، أو استشارة تقنية، تعمل CamelBio على تبسيط مسيرتك من الفكرة إلى العيادة.