مولد أحادي الأرنب المضاد لـ POLR2A (الطرف N- الطرفي) للتطبيقات WB، IP، ChIP، ELISA - P24928

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين POLR2A

• يُشفر الجين POLR2A أكبر وحدة تحفيزية لبوليميراز الحمض النووي الريبوزي II (Pol II)، الذي يقوم بتصنيع سلائف الرنا المرسال والعديد من الرنا غير المشفرة الوظيفية باستخدام نيوكليوسيد ثلاثي الفوسفات كركائز. المراجع ذات الصلة: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• أثناء بدء النسخ، يتم استقدام Pol II إلى محفزات الحمض النووي، ويشكل POLR2A المركز النشط مع POLR2B، ويساهم بمنحوتة DxDGD المنسقة مع أيون المغنيسيوم Mg²⁺ وهي ضرورية لإضافة النيوكليوتيدات. المراجع ذات الصلة: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474, PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112

• يتكون المجال الطرفي C-الفريد (CTD) من 52 تكرار ببتيد سباعي، ويعمل كمنصة لتجميع العوامل التي تنظم بدء النسخ، الاستطالة، الإنهاء، والمعالجة المشتركة مع النسخ. المراجع ذات الصلة: PMID:24207025, PMID:26124092

• يُظهر POLR2A نشاطًا نوكليازيًا خارجيًا جوهريًا من 3'→5' للتصحيح القراءي، مما يتيح إزالة النيوكليوتيدات المدمجة بشكل خاطئ من خلال التراجع وكسور رابطة الفوسفوديستر. المراجع ذات الصلة: PMID:8381534

• فسفرة مجال CTD في السيرين 5 تتوسط هروب المحفز، بينما فسفرة السيرين 2 مطلوبة لإطلاق التوقف أثناء الاستطالة؛ تعمل مثيلة وأستلة لايسينات مجال CTD على ضبط مستويات التعبير الجيني بدقة. المراجع ذات الصلة: PMID:24207025, PMID:26124092

• بعيدًا عن النسخ المعتمد على الحمض النووي، يمكن لـ POLR2A أن يعمل كبوليميراز رنا معتمد على الرنا، حيث يمد الرنا غير المشفرة ويكرر جينوم فيروس دلتا الكبدي أثناء العدوى. المراجع ذات الصلة: PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• يتوطن البروتين في النواة، السيتوبلازم، والكروموسومات، مما يعكس أدوارها الديناميكية في النسخ ومعالجة الرنا.

• يُنتج الربط البديل لأشكال متعددة من البروتين، وقد ارتبطت المتغيرات المرتبطة بالأمراض في POLR2A باضطرابات النمو العصبي (مثل NEDHIB).

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يقع هدف المستضد المناعي (الأحماض الأمينية 550-650) داخل منطقة الطرف N- الطرفي وهو محفوظ عبر الإنسان والفأر والجرذ، مما يدعم التفاعل المتقاطع الملاحظ؛ يُنصح بمقارنة التسلسل لأنواع أخرى.
• بالنسبة للتلطخ الغربي (Western blot)، توقع وجود نطاق بالقرب من 217 كيلو دالتون؛ استخدم هلام SDS-PAGE بنسبة منخفضة (مثل 6%) وقم بتحسين ظروف النقل للبروتينات عالية الوزن الجزيئي.
• في ارتباط الكروماتين المناعي (ChIP)، قم بالتحقق من خصوصية الجسم المضاد باستخدام مواقع جينومية موجبة وسالبة، وقم بتحسين بروتوكولات الربط المتقاطع والقص نظرًا للحجم الكبير لمركب بوليميراز II.
• بالنسبة للترسيب المناعي (IP)، قد تحسن ظروف التحلل المعتدلة وإضافة معالجة بالنوكلياز ذوبانية POLR2A المرتبط بالكروماتين.
• الجسم المضاد مناسب أيضًا لـ ELISA؛ فكر في الاقتران مع جسم مضاد الالتقاط للكشف القائم على الساندويتش لمجمعات بوليميراز II الأصلية.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المواد

تبسط CamelBio عملية شراء المواد الخام للتشخيص خارج الجسم لمصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث، وتقدم أزواج أجسام مضادة مصدقة، أجسام مضادة أحادية وعديدة النسيلة محسنة، وكواشف سائبة مساعدة. بالنسبة لأبحاث النسخ وبوليميراز الحمض النووي الريبوزي II، يعد هذا المولد أحادي الأرنب المضاد لـ POLR2A (الطرف N- الطرفي) جزءًا من محفظة أوسع تغطي الوحدات الفرعية الرئيسية لبوليميراز II وعوامل النسخ. من خلال شبكة التوريد المتكاملة، تساعد CamelBio أيضًا في توريد المواد الخام للأهداف النادرة، مما يساعد العملاء على تسريع التطوير من المفهوم إلى العيادة.