الجسم المضاد الأحادي النسيلة ضد PMEL (gp100) للاستخدام في WB و IHC-P و ELISA - P40967

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة بروتين PMEL وموقعه الخلوي

• بروتين الخلايا الصباغية PMEL (المعروف أيضًا باسم gp100 و HMB-45 و SILV) هو بروتين ما قبل الأصباغ الميلانية يلعب دورًا مركزيًا في تكوين الأصباغ الميلانية وتكوين الصباغ.
• أثناء نضوج الأصباغ الميلانية، تتجمع الأجزاء المعالجة المولدة للأميلويد من بروتين PMEL في صفائح ليفية متوازية، مما يدفع استطالة الأصباغ الميلانية من المرحلة الأولى إلى الأصباغ الميلانية المخططة بيضاوية الشكل في المرحلة الثانية.
• في الأصباغ الميلانية المصطبغة في المرحلتين الثالثة والرابعة، تعمل مصفوفة الأميلويد كمنصة لتركيز سلائف الإيوميلانين، مما يسهل التوليف الفعال للميلانين مع عزل الوسائط التفاعلية السامة المحتملة.
• يُعد PMEL مستضدًا مميزًا خاصًا بالورم الميلانيني؛ تُقدم الببتيدات المهيمنة المناعية المستمدة من PMEL، مثل G9-154 (KTWGQYWQV) و G9-209 (ITDQVPFSV)، بواسطة جزيئات HLA وتحفز استجابات الخلايا التائية السامة للخلايا المضادة للورم.
• على المستوى دون الخلوي، يتركز PMEL في غشاء الشبكة الإندوبلازمية، وجهاز جولجي، وغشاء شبكة جولجي المقدم، والأجسام الداخلية (الأجسام متعددة الحويصلات)، والأصباغ الميلانية، كما يوجد في الحويصلات خارج الخلية والأشكال المفرزة.
• يخضع البروتين لتعديلات مكثفة بعد الترجمة، بما في ذلك الانقسام على أزواج من الأحماض الأمينية الأساسية، وتكوين روابط ثاني كبريتيد، والغليكوزلة، وإضافة حمض السياليك.
• يتم التعبير عنه عادة بمستويات منخفضة في الخلايا الصباغية البالغة الهادئة، ويتم التعبير عنه بشكل مفرط في الخلايا الصباغية الوليدة المتكاثرة وأثناء نمو الورم، خاصة في الأورام الميلانينية وبعض الشامات غير الطبيعية.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• يتوافق المستضد المناعي مع منطقة الطرف N-terminal (الأحماض الأمينية 25-211) من بروتين PMEL البشري، والتي يُتنبأ بأنها خارج الخلية/في التجويف؛ ضع هذا في الاعتبار عند تصميم استراتيجيات الكشف أو الاقتران بأجسام مضادة أخرى.
• بالنسبة للنشاف الغربي، يهاجر بروتين PMEL الكامل غير المعالج عند حوالي 70 كيلو دالتون، ولكن لاحظ أن بروتين PMEL الداخلي يخضع للمعالجة البروتوليتية إلى أجزاء متعددة؛ تحقق من نمط النطاق المتوقع في محللاتك.
• في الكيمياء المناعية على الأنسجة المثبتة بالبارافين، يجب أن يكون تلطيخ PMEL غشائيًا/سيتوبلازميًا في الخلايا الصباغية وخلايا الورم الميلانيني؛ قم بتضمين ضوابط إيجابية مناسبة (نسيج ورم ميلانيني) وضوابط سلبية.
• بالنسبة لتطبيقات ELISA، استخدم بروتين PMEL المؤتلف أو الببتيدات الاصطناعية كمستضدات مطبقة وقم بمعايرة الجسم المضاد بعناية لتحقيق أفضل نسبة إشارة إلى ضوضاء.
• نظرًا لأن تعبير PMEL يمكن أن يختلف باختلاف حالة تنشيط الخلايا الصباغية، ضع في اعتبارك استخدام خطوط خلايا الورم الميلانيني المعروفة (مثل SK-MEL-28) أو الخلايا الصباغية الأولية كضوابط إيجابية.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تسرع CamelBio تطوير التشخيص الخاص بك من خلال توفير منصة شاملة للمواد الخام للتشخيص المختبري. سواء كنت بحاجة إلى أجسام مضادة أحادية النسيلة تم التحقق من صلاحيتها مثل استنساخ anti-PMEL هذا، أو كنت تقوم بتطوير فحوصات لعلامات الورم الميلانيني، فإننا نقدم أزواج أجسام مضادة محسنة، وكواشف مساعدة بكميات كبيرة، ومصادر مخصصة للأهداف النادرة. شارك معنا لتبسيط مسارك من الفكرة إلى العيادة.