جسم مضاد أحادي النسيلة مضاد لـ PKM2 لتقنيات WB و IF/ICC و IP و ELISA - P14618

المواصفات والمعايير الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة PKM2 وتوضعه

• يحفز PKM2 الخطوة النهائية المحددة لمعدل تحلل السكر عن طريق نقل مجموعة الفوسفوريل من فوسفوينول بيروفات (PEP) إلى ADP، مما يولد ATP. يتم تنظيم نشاط الإنزيم من خلال توازن ديناميكي بين رباعي الوحدات عالي النشاط وثنائي الوحدات غير النشط تقريبًا، مما يحدد مصير كربون الجلوكوز نحو إنتاج الطاقة أو التخليق الحيوي. مراجع ذات صلة: PMID:15996096 PMID:1854723 PMID:20847263
• يولد جين PK شكلين رئيسيين عبر الربط البديل: شكل M1 البالغ (PKM1) وشكل M2 الجنيني (PKM2). يمتلك PKM2 نشاط بيروفات كيناز جوهري منخفض ويتطلب تنشيطًا خيفيًا بواسطة D-فركتوز 1،6-بيسفوسفات (FBP)، بينما يكون PKM1 نشطًا بشكل دائم. مراجع ذات صلة: PMID:18337823 PMID:20847263
• بالإضافة إلى دوره الأيضي في السيتوبلازم، يعمل PKM2 كبروتين كيناز نووي. عند التحفيز مثل تنشيط مستقبلات EGF، ينتقل PKM2 إلى النواة ويفسفر أهدافًا بما في ذلك STAT3 عند Tyr-705 والهستون H3 عند Thr-11، مما يعزز نسخ الجينات المشاركة في تكاثر الخلايا، وتكون الأوعية الدموية (مثل VEGFA)، وتكون الأورام. مراجع ذات صلة: PMID:18191611 PMID:21620138 PMID:22056988 PMID:22306293 PMID:22901803 PMID:24120661 PMID:33314660 PMID:26787900 PMID:17308100
• يتم التعبير عن PKM2 بشكل رئيسي في الخلايا عالية التكاثر، بما في ذلك الخلايا الجذعية الجنينية، وخلايا سرطان الأجنة، والخلايا السرطانية، مما يجعله مؤشرًا حيويًا راسخًا للأورام. يتم التعبير عن الشكل البالغ PKM1 في أنسجة البالغين الطبيعية وعادة ما يكون غائبًا عن الأورام. مراجع ذات صلة: PMID:18337823
• يتوضع PKM2 في كل من السيتوبلازم والنواة. يتم تحفيز انتقاله النووي بواسطة مسارات إشارات مختلفة وهو أمر بالغ الأهمية لوظائفه غير الأيضية والمسرطنة.
• التعديلات اللاحقة للترجمة مثل الأسيتلة، والفسفرة، والهيدروكسيلة، والمثيلة تنظم بدقة النشاط الأيضي لـ PKM2، واستقرار البروتين، والاستيراد النووي، مما يربط الحالة الأيضية الخلوية بشبكات الإشارات.

التوجيه التجريبي والنصائح التقنية

• المستضد هو ببتيد اصطناعي يمتد على الأحماض الأمينية 380-480 من PKM2 البشري (NP_002645.3)، والذي يقع ضمن المنطقة الفريدة في الطرف C التي تميز PKM2 عن شكل M1. يشير هذا التصميم إلى خصوصية عالية لـ PKM2 مقارنة بـ PKM1.
• بالنسبة لـ Western blot، يبلغ الوزن الجزيئي المتوقع لـ PKM2 حوالي 58 كيلو دالتون. تحقق من أداء الجسم المضاد باستخدام ضوابط إيجابية مناسبة (مثل خطوط الخلايا السرطانية البشرية) وفكر في تحسين تخفيف الجسم المضاد الأولي وأوقات التعرض.
• في التألق المناعي/الكيمياء الخلوية المناعية (IF/ICC)، اختبر بروتوكولات تثبيت ونفاذية مختلفة للحفاظ على توضع PKM2، حيث يمكن أن يكون موجودًا في السيتوبلازم والنواة.
• بالنسبة للترسيب المناعي (IP)، استخدم ظروف تحلل طبيعية للحفاظ على مجمعات البروتين وتأكيد كفاءة التقاط الهدف.
• عند إجراء ELISA، قم بإنشاء منحنيات قياسية باستخدام بروتين PKM2 المؤتلف وتحقق من الحساسية والنوعية في مصفوفة العينة ذات الصلة.
• تمت الإشارة إلى التفاعل المتبادل مع PKM2 في الفئران والجرذان؛ تحقق من التعرف على الهدف في نظامك التجريبي المحدد باستخدام ضوابط خاصة بالأنواع.

CamelBio: جسرك الشامل للمصادر

تعمل CamelBio كشريكك الشامل للمصادر للمواد الخام الخاصة بالتشخيص المختبري (IVD)، حيث تقدم محفظة متكاملة تمتد من المفهوم إلى العيادة. للباحثين الذين يدرسون تحلل السكر، واستقلاب الأورام، وتطبيقات المؤشرات الحيوية للسرطان، توفر CamelBio كواشف إضافية بالجملة، وأزواج أجسام مضادة معتمدة، وأجسام مضادة أحادية النسيلة محسنة مثل هذا الجسم المضاد للأرانب الخاص بـ PKM2. بالإضافة إلى المنتجات القياسية، نتفوق في تأمين المواد الخام للأهداف النادرة، ونقدم خدمات تقنية واستشارات لتبسيط خط أنابيب التطوير التشخيصي الخاص بك.