مضاد بوليك كلوني أرنب ضد فوسفو-Zap70-Y319+Syk-Y352 لـ WB و IF/ICC و ELISA - P43403/P43405

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة ZAP70 وتوطينه الخلوي

• ZAP70 (بروتين مرتبط بسلسلة زيتا بوزن 70 كيلو دالتون) هو تيروزين كيناز سيتوبلازمي ينتمي إلى عائلة Syk، ويعرف أيضاً باسم الكيناز التيروزيني المرتبط بـ Syk (SRK).
• ضروري لإشارات مستقبل الخلية التائية (TCR): عند ارتباط TCR، يتم تجنيد ZAP70 إلى الأشكال ITAM المفسفرة على سلاسل CD3، حيث يُفسفر وينشط بواسطة LCK، مما يبدأ سلاسل الإشارات المصب. المراجع ذات الصلة: PMID:7509083
• يُفسفر ZAP70 المنشط بروتينات المحول LAT و LCP2، مما يطلق شبكة إشارات تنظم تنشيط الخلايا التائية، تكاثرها، إنتاج السيتوكينات وتمايزها.
• بالإضافة إلى إشارات TCR، يتحكم ZAP70 في التصاق الخلايا التائية، حركتها، وإعادة تنظيم الهيكل الخلوي؛ كما يتوسط عملية دخول TCR إلى داخل الخلية وتحلله عبر التفاعل مع CBL و SLA و SLA2، وبالتالي ينظم مستويات TCR على سطح الخلية.
• يساهم ZAP70 أيضاً في نمو وتنشيط الخلايا البائية عبر إشارات مستقبل الخلية البائية (BCR).
• أثناء نمو الخلايا التيمية، يعزز ZAP70 بقاء وتقدم دورة الخلية للخلايا التيمية مزدوجة السلبية CD4/CD8 قبل عملية الاختيار الإيجابي.
• التوطين داخل الخلية: في الغالب سيتوبلازمي، ولكنه ينتقل إلى غشاء البلازما عند تحفيز TCR.
• التعبير النسيجي: بشكل رئيسي في الخلايا التائية والخلايا القاتلة الطبيعية، وبمستويات أقل في الخلايا التيمية المبكرة والخلايا البائية الأولية / ما قبل البائية.
• تشمل السمات الرئيسية نطاقات SH2 المترابطة في الطرف N التي ترتبط بـ ITAMs المفسفرة، ونطاق كيناز يحتوي على موقع ارتباط ATP، ومواقع فسفرة متعددة (مثل Y319) تنظم النشاط؛ موصوف بكلمات مفتاحية مثل البروتين الفوسفوري، الربط البديل، والمتغير المرضي.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فوسفوري اصطناعي حول الموقع Y319 من ZAP70 البشري؛ يتعرف الجسم المضاد أيضاً على الموقع المقابل فوسفو-Y352 من Syk بسبب تشابه التسلسل حول موقع الفسفرة.
• في النقل البريدي الغربي (WB)، يُنصح باستخدام محللات من خطوط الخلايا التائية المحفزة بـ anti-CD3 أو بيرفانادات لتحفيز فسفرة قوية؛ قم بتضمين كنترول إزالة الفسفرة (مثل معالجة بفوسفاتاز لامبدا) لتأكيد الخصوصية للشكل الفوسفوري.
• في التألق المناعي / الخلية الخلوية (IF/ICC)، قم بتحسين ظروف التثبيت والنفاذية للحفاظ على كل من الحاتمة الفوسفورية والبنية الخلوية؛ قم بالصبغ المضاد بجسم مضاد كلي لـ ZAP70 لتقييم حالة التنشيط.
• في ELISA، يمكن استخدام مستضد طلاء من الببتيد الفوسفوري؛ تأكد من أن خطوات الحجب تقلل من الارتباط غير المحدد.
• التفاعل المتبادل مع الفأر يسمح بالكشف في النماذج الفارية للخلايا التائية؛ ومع ذلك، تحقق من التفاعل في النظام التجريبي المحدد لديك.
• الوزن الجزيئي المتوقع لـ ZAP70 يبلغ حوالي 70 كيلو دالتون؛ بالنسبة لـ Syk، يتم الكشف عن الشكل الإسوي بوزن 72 كيلو دالتون. في النقل البريدي الغربي (WB)، قد يظهر على شكل نطاقات متقاربة أو نطاق واحد حسب دقة الفصل.

CamelBio: جسرك الشامل لتوريد المستلزمات

كشريك شامل لتوريد المواد الخام للتشخيص في المختبر (IVD)، توفر CamelBio لمصنعي التشخيص ومختبرات الأبحاث أزواج أجسام مضادة موثوقة، كواشف مساعدة بكميات كبيرة، وحلول شراء مخصصة لأهداف الإشارات المناعية. يدعم هذا الجسم المضاد لفوسفو-Zap70/Syk الدراسات التي تتناول مسارات تنشيط الخلايا التائية والخلايا البائية، ونحن نقدم أجسام مضادة تكميلية للبروتين الكلي، محاليل حجب، وخدمة توريد الأهداف النادرة لتبسيط تطوير الاختبارات الخاصة بك من المفهوم إلى العيادة.