مضاد وحيد النسيلة أرانبي ضد الفوسفو-راف1 المفسفر عند S621 لتقنية النقل الغربي وال ELISA - P04049

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

خلفية بيولوجية: وظيفة وتوطين بروتين RAF1 (c-Raf)

• بروتين RAF1 (المعروف أيضاً باسم c-Raf أو Raf-1) هو كيناز بروتيني سيرين/ثريونين يعمل كرابط تنظيمي حاسم بين بروتينات Ras GTPase المرتبطة بالغشاء وسلسلة إشارات MAPK/ERK، ويعمل كمفتاح يتحكم في مصير الخلايا بما في ذلك التكاثر، التمايز، الاستماتة والبقاء.
• يبدأ هذا الكيناز سلسلة إشارات كيناز البروتين المنشط بالميتوجين (MAPK) عبر الفسفرة المتتالية لكينازات MAPK مزدوجة النوعية (MAP2K1/MEK1 و MAP2K2/MEK2) وكينازات المنظم خارج الخلية (MAPK3/ERK1 و MAPK1/ERK2).
• يقوم RAF1 بفسفرة مجموعة متنوعة من الركائز: BAD (عند الموقع Ser-75، عبر PAK1)، و حلقات الأدينيل (ADCY2, ADCY5, ADCY6)، و PPP1R12A (بتثبيط نشاط الفوسفاتاز)، و TNNT2؛ كما يعزز تنشيط عامل النسخ NF-κB ويثبط الكينازات ROCK2 و ASK1 و MST2.
• يمكن للبروتين حماية الخلايا من الاستماتة عبر الانتقال إلى الميتوكوندريا، حيث يرتبط بBCL2 ويزيح BAD؛ كما يحد من تنشيط الكاسباز استجابة لتنشيط Fas، واستماتة البلاعم الناتجة عن مسببات الأمراض، وتمايز الخلايا الحمراء.
• يساهم RAF1 في التحول الورمي عبر كبت بروتين الوصلة الضيقة أوكلودين (OCLN) عن طريق تحفيز زيادة تنظيم المثبط النسخي SNAI2/SLUG.
• يشمل التوطين تحت الخلوي السيتوبلازم، غشاء الخلية، الميتوكوندريا والنواة، مما يعكس أدوار التنظيم المتعددة له.
• يحتوي البروتين على مجال إصبع الزنك، ويرتبط بـ ATP، ويخضع للفسفرة (مثل الموقع S621)، الميثيلة، والربط البديل (النمط الأول أكثر وفرة في العضلات الهيكلية).
• تشمل الكلمات المفتاحية المرتبطة بـ RAF1 اعتلال عضلة القلب، الصمم، المتغير المرضي، الجين السرطاني الأولي، وكيناز بروتيني سيرين/ثريونين، مما يدل على مشاركته في كل من الفسيولوجيا الطبيعية والأمراض.

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المناعي هو ببتيد فوسفوري اصطناعي؛ تأكد من معالجة العينات بمثبطات الفوسفاتاز للحفاظ على حالة الفسفرة أثناء التحلل والتحضير.
• في تقنية النقل الغربي، توقع ظهور نطاق عند وزن جزيئي حوالي 73 كيلو دالتون؛ قم بتضمين الضوابط المناسبة مثل المحاليل الخلوية المعالجة بالفوسفاتاز أو الخلايا المنشطة مقابل غير المنشطة لتأكيد الخصوصية للبروتين المفسفر.
• نظراً لأن فسفرة RAF1 ديناميكية، فكر في استخدام مضاد RAF1 الكلي بالتوازي لتطبيع الإشارات وتفسير تغيرات التنشيط بدقة.
• في تقنية ELISA، قم بتحسين تركيز المستضد المطلي وتخفيف المضاد؛ يمكن أن يساعد منحنى قياسي باستخدام ببتيد فوسفوري معروف في القياس الكمي.
• تم الإبلاغ عن تفاعل متقاطع مع أنسجة الجرذ؛ قم بالتحقق من أداء المضاد في نظام نموذج الجرذ المحدد لديك، حيث قد تختلف شدة الإشارة بين العينات المختلفة.

CamelBio: جسرك الشامل لشراء المواد الأولية

توفر CamelBio لمصنعي التشخيص، المختبرات والمعاهد البحثية وصول شامل إلى المواد الأولية للتشخيص المناعي خارج الجسم، والخدمات التقنية والاستشارات - تغطي كل مرحلة من مراحل تطوير المنتج من المفهوم إلى التجارب السريرية. بالنسبة للدراسات التي تركز على محور الإشارات RAS-RAF-MEK-ERK، نقدم محفظة شاملة تشمل أزواج الأضداد المُحققة، والأضداد وحيدة النسيلة ومتعددة النسيلة المحسنة، والمواد المساعدة بكميات كبيرة، وخدمات شراء المواد الأولية للأهداف النادرة لتسريع تطوير الاختبارات الخاصة بك.