جسم مضاد أرنب متعدد النسيلة مضاد للفوسفو-راف1 (S259) للويسترن بلوت، الترسيب المناعي، الإليزا - P04049

المواصفات والمعلمات الأساسية للمنتج

الخلفية البيولوجية: وظيفة وتوطين RAF1

• RAF1 (المعروف أيضًا باسم c-Raf أو Raf-1) هو كيناز سيرين/ثريونين بروتيني يعمل كحلقة تنظيمية حرجة بين بروتينات Ras GTPases المرتبطة بالغشاء وشلال إشارات MAPK/ERK، حيث يحكم قرارات مصير الخلية مثل التكاثر، والتمايز، وموت الخلايا المبرمج، والبقاء، والتحول الورمي.
• عند التنشيط، يبدأ RAF1 شلال كيناز البروتين المنشط بالميتوجين (MAPK) من خلال الفسفرة المتسلسلة لكينازات MAPK ثنائية التخصص (MAP2K1/MEK1 و MAP2K2/MEK2) وكينازات الإشارة المنظمة خارج الخلية (MAPK3/ERK1 و MAPK1/ERK2).
• يفسفر RAF1 أهدافًا متعددة لاحقة، بما في ذلك BAD (عند Ser-75)، وأدينيلات سيكلاز (ADCY2, ADCY5, ADCY6)، و PPP1R12A (تثبيط نشاط الفوسفاتاز)، و TNNT2 (تروبونين تي لعضلة القلب)، مما يعدل بذلك موت الخلايا المبرمج، إشارات cAMP، ووظيفة القلب.
• يمكن للبروتين تعزيز تنشيط NF-kB وتثبيط ناقلات الإشارة المشاركة في الحركة (ROCK2)، موت الخلايا المبرمج (MAP3K5/ASK1 و STK3/MST2)، التكاثر، وتكوين الأوعية الدموية (RB1)، مما يسلط الضوء على أدواره التنظيمية الواسعة.
• ارتبط RAF1 بالتحول الورمي للخلايا الظهارية من خلال رفع مستويات المثبط النسخي SNAI2/SLUG، الذي يخفض مستويات بروتين الوصلات المحكمة أوكلودين (OCLN)، كما يقيد تنشيط الكاسباز استجابةً لتحفيز Fas، موت الخلايا البلعمية بوساطة ممرض، والتمايز الكريات الحمر.
• على المستوى تحت الخلوي، يوجد RAF1 في السيتوبلازم، غشاء الخلية، الميتوكوندريا، والنواة، حيث أن انتقاله إلى الميتوكوندريا يمكنه من الارتباط بـ BCL2 وإزاحة BAD لحماية الخلايا من موت الخلايا المبرمج.
• يحتوي البروتين على نطاق إصبع الزنك، ويخضع للفسفرة (بما في ذلك عند Ser259 الذي يتعرف عليه هذا الجسم المضاد)، ويلعب أدوارًا في التئام الجروح، إشارات Rho، والهجرة.
• في العضلات الهيكلية، يكون النمط 1 أكثر وفرة من النمط 2؛ ويرتبط RAF1 بأمراض مثل اعتلال عضلة القلب والصمم (CMD1NN).

إرشادات تجريبية ونصائح تقنية

• المستضد المولد للأجسام المضادة هو ببتيد اصطناعي مفسفر يمتد عبر Ser259 من RAF1 البشري. هذا التصميم يستهدف نظريًا الحاتمة المفسفرة؛ ومع ذلك، يجب على المستخدمين التحقق من خصوصية الفسفرة من خلال مقارنة الإشارات بين المستخلصات المعالجة بالفوسفاتاز وغير المعالجة في نظامهم التجريبي.
• نظرًا لأن الجسم المضاد تم إنتاجه في الأرنب ضد ببتيد بشري، فإن التفاعل التبادلي مع أنواع أخرى غير مضمون؛ يجب التحقق من ذلك في نظام العينة ذي الصلة إذا تم استخدام نماذج غير بشرية.
• لتحليل الويسترن بلوت (WB)، من المتوقع ظهور حزام حول 73 كيلو دالتون. استخدم ظروف حجب وغسل مناسبة لتقليل الارتباط غير النوعي، وقم بتضمين عنصر تحكم إيجابي (مثل مستخلصات خلايا محفزة) لتأكيد الكشف الخاص بالفسفرة.
• في الترسيب المناعي (IP) واختبار الإليزا، قد يعمل الجسم المضاد كما هو موضح؛ فكر في تحسين تركيزات الأجسام المضادة وظروف المحاليل لاختبارك المحدد.
• تجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة؛ قسّم إلى أجزاء واحفظ عند -20 درجة مئوية أو حسب التوصيات.

CamelBio: جسر التوريد الشامل الخاص بك

CamelBio هو شريكك الشامل للتوريد لمواد التشخيص الأولية، حيث نقدم أزواج أجسام مضادة تم التحقق منها، وأجسام مضادة أحادية النسيلة ومتعددة النسيلة محسنة، وكميات كبيرة من الكواشف المساعدة لدعم مشاريعك المتعلقة بـ RAF1 في التشخيص والبحث. كما تسهل سلسلة التوريد الشاملة لدينا الحصول على الأجسام المضادة ذات الأهداف النادرة والمواد الأولية المخصصة، لسد الفجوة من المفهوم إلى العيادة.